常用缓冲溶液配制方法

1、.常用缓冲溶液的配制方法1甘氨酸盐酸缓冲液0.05mol/LX毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pHXYpHXY2.02.42.62.85050505044.032.424.216.83.03.23.43.65050505011.48.26.45.0甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。2邻苯二甲酸盐酸缓冲液0.05 mol/LX毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升pH(20)XYpH(20)XY2.22.42.62.83.0555554.0703.

2、9603.2952.6422.0223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液pH0.2mol/L Na2HPO4毫升0.1mol/L柠檬酸毫升pH0.2mol/L Na2HPO4毫升0.1mol/L柠檬酸毫升2.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.85.00.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3010.6018.7617.821

3、6.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。Na2HPO4·2H2O分子量 =

4、 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。4柠檬酸氢氧化钠-盐酸缓冲液pH钠离子浓度mol/L柠檬酸克C6H8O7·H2O氢氧化钠(克)NaOH 97%盐酸毫升HCl浓最终体积升2.23.13.34.35.35.86.50.200.200.200.200.350.450.3821021021021024528526684838383144186156160116106456810512610101010101010使用时可以每升中参加1克克酚，假设最后pH值有变化，再用少

5、量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5柠檬酸柠檬酸钠缓冲液0.1 mol/LpH0.1   mol/L柠檬酸毫升0.1   mol/L柠檬酸钠毫升pH0.1   mol/L柠檬酸毫升0.1   mol/L柠檬酸钠毫升3.03.23.43.63.84.04.24.44.64.818.617.216.014.914.013.112.311.410.39.21.42.84.05.16.06.97.78.69.710.85.05.25.45.65.86.06.26.46.68.27.36.45.54.7

6、3.82.82.01.411.812.713.614.515.316.217.218.018.6柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。6乙酸乙酸钠缓冲液0.2 mol/L pH(18)0.2   mol/L NaAc(毫升)0.3   mol/L HAc(毫升) pH(18)0.2   mol/LNaAc(毫升)0.3  

7、 mol/LHAc(毫升)2.63.84.04.24.44.60.751.201.802.653.704.909.258.808.207.356.305.104.85.05.25.45.65.85.907.007.908.609.109.404.103.002.101.400.900.60Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。7磷酸盐缓冲液1磷酸氢二钠磷酸二氢钠缓冲液0.2 pH0.2   mol/L Na2HPO4(毫升)0.2  mol/L NaH2PO4(毫升) pH0.2

8、60;  mol/LNa2HPO4(毫升)0.2   mol/L NaH2PO4(毫升)5.85.96.06.16.26.36.46.56.66.76.86.98.010.012.315.018.522.526.531.537.543.549.555.092.090.087.785.081.577.573.568.562.5 56.551.045.07.07.17.27.37.47.57.67.77.87.98.061.067.072.077.081.084.087.089.591.593.094.739.033.028.023.019.016.013.010.5

9、8.57.05.3Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。Na2HPO4·12H2O分子量 = 358.14，0.2 mol/L溶液为71.628克/升。NaH2PO4·2H2O分子量 = 156.01，0.2 mol/L溶液为31.202克/升。磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH X围最宽：NaH2PO4： pKa12.12，pKa27.21； Na2HPO4：pKa17.21，pKa212.32配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH1

10、4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH68，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH1012。用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但假设配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐缓冲液的优点为：容易配制成各种浓度的缓冲液；适用的pH X围宽；pH 受温度的影响小；缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。其缺点为：易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。2磷酸氢二钠磷酸二

11、氢钾缓冲液1/15 mol/LpHmol/L/15Na2HPO4(毫升)mol/L/15KH2PO4(毫升)pHmol/L/15Na2HPO4(毫升)mol/L/15KH2PO4(毫升)4.925.295.916.246.476.646.816.980.100.501.002.003.004.005.006.009.909.509.008.007.006.005.004.007.177.387.738.048.348.678.187.008.009.009.509.759.9010.003.002.001.000.500.250.100Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05

12、，1/15M溶液为11.876克/升。KH2PO4分子量 = 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。8磷酸二氢钾氢氧化钠缓冲液0.05MX毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升 pH(20)X (毫升)Y毫升pH(20)X (毫升)Y毫升5.86.06.26.46.66.85555550.3720.5700.8601.2601.7802.3657.07.27.47.67.88.05555552.9633.5003.9504.2804.5204.6809巴比妥钠-盐酸缓冲液18pH0.04M巴比妥钠溶液0.2V盐酸pH0.04M巴比妥钠溶液(毫升)0.

13、2N盐酸(毫升)6.87.07.27.47.67.88.08.210010010010010010010010018.417.816.715.313.411.479.397.218.48.68.89.09.29.49.61001001001001001001001005.213.822.521.651.130.700.35巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升10Tris盐酸缓冲液0.05M，2550毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷Tris溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。pHX(毫升)pHX(毫升)7.107.207.307.407.507.607.7

14、07.807.908.0045.744.743.442.040.338.536.634.532.029.28.108.208.308.408.508.608.708.808.9026.222.919.917.214.712.410.38.57.0三羟甲基氨基甲烷TrisHOCH2 CH2OH CHOCH2 NH2分子量=121.14;0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。11硼酸硼砂缓冲液0.2M硼酸根pH0.05M硼砂毫升0.2M硼酸毫升pH0.05M硼砂毫升0.2M硼酸毫升7.47.67.88.01.01.52.03.09.08.58.0

15、7.08.28.48.79.03.54.56.08.06.55.54.02.0硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.37;0.05M溶液=0.2M硼酸根含19.07克/升。硼酸H3BO3,分子量=61.83,0.2M溶液为12.37克/升。硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。12甘氨酸氢氧化钠缓冲液0.05MX毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升pHXYpHXY8.68.89.09.29.450505050504.06.08.812.016.89.69.810.010.410.6505050505022.427.232.038.645.5甘氨酸

16、分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。13硼砂-氢氧化钠缓冲液0.05M硼酸根X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升pHXYpHXY9.39.49.65050506.011.023.09.810.010.150505034.043.046.0硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。14碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液0.1MCa2+、Mg2+存在时不得使用pH0.1MNa2CO3(毫升)0.1MN2HCO3(毫升)20379.169.409.519.789.9010.1410.2810.5310.838.7

17、79.129.409.509.729.9010.0810.2810.57123456789987654321Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。15“PBS缓冲液pH7.67.47.27.0H2ONaClNa2HPO4NaH2PO410008.52.20.110008.52.20.210008.52.20.3100ml8.5g2.2g0.4gpH标准缓冲溶液 Standard pH Buffer Solutions名称(Name) 配  制 (pounding way) 不同

18、温度时的pH值(pH in different temperatures) 0510152025303540草酸盐标准缓冲溶液 cKH3(C2O4)2·2H2O为0.05mol/L。称取12.71g四草酸钾KH3(C2O4)2·2H2O溶于无二氧化碳的水中，稀释至1000ml 1.67 1.67 1.67 1.67 1.68 1.68 1.69 1.69 1.69 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 4550556070809095- 1.70 1.71 1.72 1.72 1.74 1.77 1.79 1.81 - 酒石酸盐标准

19、缓冲溶液 在25时，用无二氧化碳的水溶解外消旋的酒石酸氢钾(KHC4H4O6)，并剧烈振摇至成饱和溶液 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0510152025303540- - - - - 3.56 3.55 3.55 3.55 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 4550556070809095- 3.55 3.55 3.55 3.56 3.58 3.61 3.65 3.67 - 苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液 c(C6H4CO2HCO2K)为0.05mol/L，称取于(115.0±5.0)枯燥 2

20、3h的邻苯二甲酸氢钾KHC8H4O410.21g，溶于无CO2的蒸馏水，并稀释至1000ml 注：可用于酸度计校准 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 05101520253035404.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.01 4.01 4.02 4.04 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 4550556070809095- 4.05 4.06 4.08 4.09 4.13 4.16 4.21 4.23 - 磷酸盐标准缓冲溶液 分别称取在(115.0±5.0)枯燥23h的磷酸氢二

21、钠Na2HPO4(353±001)g和磷酸二氢钾KH2PO4 (339±001)g，溶于预先煮沸过1530min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml注：可用于酸度计校准 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 05101520253035406.98 6.95 6.92 6.90 6.88 6.86 6.85 6.84 6.84 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 4550556070809095- 6.83 6.83 6.83 6.84 6.85 6.86 6.88 6.89 - 硼

22、酸盐标准缓冲溶液 c(Na2B4O7·10H2O)称取硼砂Na2B4O7·10H2O(380± 001)g注意：不能烘！，溶于预先煮沸过 1530min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml。置聚乙烯塑料瓶中密闭保存。存放时要防止空气中的CO2的进入注：可用于酸度计校准 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 05101520253035409.46 9.40 9.33 9.27 9.22 9.18 9.14 9.10 9.06 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 455055

23、6070809095- 9.04 9.01 8.99 8.96 8.92 8.89 8.85 8.83 - 氢氧化钙标准缓冲溶液 在25，用无二氧化碳的蒸馏水制备氢氧化钙的饱和溶液。氢氧化钙溶液的浓度c1/2Ca(OH)2应在0.04000.0412mol/L。氢氧化钙溶液的浓度可以酚红为指示剂，用盐酸标准溶液c(HCl)=0.1mol/L滴定测出。存放时要防止空气中的二氧化碳的进入。出现混浊应弃去重新配制 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 051015202530354013.42 13.21 13.00 12.81 12.63 12.45 12

24、.30 12.14 11.98 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 4550556070809095- 11.84 11.71 11.57 11.45 - - - - - 注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。常用pH缓冲溶液的配制和pH值Preparation and pH Values of mon pH Buffer Solutions序号(No.)溶液名称 (Solution name)配制方法 (Preparation)pH值(pH value)1 氯化钾-盐酸 13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与25.0 ml 0.2 mol/L  KCl混合均匀后，加水稀释至100 ml 1.72 氨基乙酸-盐酸 在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g，加480 ml浓盐酸，再加水稀释至1L2.3 3 一氯乙酸-氢氧化钠 在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g  NaOH，溶解完全后再加水稀