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文档简介
1、选修1 DNA的粗提取与鉴定的实验练习1、DNA的粗提取与鉴定的实验(l)本实验材料选用鸡血细胞液而不用鸡的全血,主要原因是由于鸡血细胞液中含有较高含量的 (2)图A中加入蒸馏水的目的是 (3)通过图B所示步骤取得滤液后,再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是 并在坐标系内画出DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的变化的图象(4)图C所示加入蒸馏水的目的是 (5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可用 试剂进行检验,颜色反应为 色2、下面是某位同学以洋葱为实验材料进行DNA提取与鉴定的实验步骤:a称取30克已切碎的洋葱,放入研钵中,加入少量石英砂,倒入10mL0.14mol/L的氯
2、化钠溶液,充分研磨b研磨后,用漏斗和纱布过滤,得到滤液c沿烧杯壁缓缓向滤液中加入95%的酒精溶液20mL,并用玻璃棒快速搅拌,待纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起d取两支试管,编为1、2号,各加入2mol/L的氯化钠溶液2mL,向1号试管中加入一些纤维状粘稠物,振荡使其溶解,然后向两支试管中各加入2mL二苯胺试剂,观察颜色变化请分析回答:(1)指出以上实验步骤中的三个错误: 、 (2)在a步骤中,加入少量石英砂是为了 ,有时人们还在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂,原因是洗涤剂能 ,有利于DNA的释放(3)c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是 色的(4)在所有操作均正确的情况下,d步骤中
3、1号、2号试管内溶液颜色变化分别为 (5)DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料,原因是 3、关于DNA粗提取的实验材料的选择,研究者经过多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料请据图回答问题:(1)在实验中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是BA稀释血液,冲洗样品B使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出C使血细胞破裂、增大DNA溶解量D使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA(2)生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若它们按实验要求完成实验步骤后,结果是很难提取到DNA,原因是 (3)不同的NaCl溶液中,DNA的溶解度不同,在NaCl溶液浓度是 时,DNA的溶解度最小(4)DNA的析出
4、和鉴定时,析出DNA时应将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的 (写出体积分数),静置后溶液中将析出DNA鉴定时所用的试剂为 4、某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:材料处理:称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20C,另一组置于-20C条件下保存24 h。DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL 研磨液,充分研磨。用纱布过滤,取滤液备用。第二步:将滤液放在6075 C的恒温水浴箱中保温1015 min,然后将溶液过滤。第三步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的
5、冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。第四步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl 溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入4 mL 二苯胺试剂, 混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液颜色的深浅,结果如表:材料保存温度菜花辣椒20 C+ + + +-20 C+ + + + + + +注:+越多表示蓝色越深。分析上述实验过程,回答下列问题:(1)该探究性实验课题的名称是_。(2)第二步操作目的是_。(3)第三步中缓缓地搅拌,这是为了减少_。(4)根据实验结果,得出结论并分析。结论1:与20 C相比,相同实验材料在-20
6、C条件下保存,DNA的提取量较多。结论2:_。针对结论1,请提出合理的解释:_。(5)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一歩提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第四步的基础上继续操作的步骤是:_。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。5、图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图,请据图分析,回答下列问题:(1)图中正确的实验操作顺序是 (用序号与箭头表示)(2)步骤中加入蒸馏水的目的是 ;步骤中加入蒸馏水后DNA析出,该操作的原理是(3)步骤中所用酒精最佳是经过 后再使用,该步骤的目的是 (4)DNA可用
7、 试剂鉴定,沸水浴后的颜色反应为 (5)由于鸡血较难找到,某学生试图用人血代替,结果没有成功,其原因最可能是 6、请回答下列有关DNA粗提取及鉴定的相关问题(1)在提取DNA实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液,其作用分别是:2mol/L NaCl溶液: ;0.14mol/L NaCl溶液: (2)用鸡血提取DNA的整个操作过程中,每100mL血液中加入3g柠檬酸钠的作用是: (3)鉴定DNA所用的试剂: 7、下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答下列问题:(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入_并搅拌,可使鸡血细胞破裂。(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的_。(
8、3)步骤三、四的操作原理是_;步骤四中,通过向溶液中加入_调节NaCl溶液的物质的量浓度至_mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。(4)步骤七:向步骤六过滤后的_中加入等体积的冷却的_,静置23 min,溶液中会出现_色丝状物,这就是粗提取的DNA。(5)步骤七:DNA遇_试剂,沸水浴5 min,冷却后,溶液呈_色。选修1 DNA的粗提取与鉴定的实验练习参考答案1、解:(1)DNA存在于鸡血细胞中,因此DNA提取实验的材料用鸡血细胞液而不用鸡的全血(2)分析题图可知,图A的操作是向鸡血细胞中加入蒸馏水,目的是使血细胞吸水胀破,释放出核物质DNA(3)图B所示步骤是向含有DNA的滤
9、液中加入2mol/L的NaCl溶液,目的是使DNA溶解于NaCl溶液中;DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的变化曲线如下图:(4)分析题图可知,C步骤是向溶解有DNA的高浓度NaCI溶液中加入蒸馏水,目的是稀释NaCL溶液的浓度,使DNA析出(5)在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会呈现蓝色,因此可以用二苯胺鉴定DNA故答案为:(1)DNA(2)使血细胞吸水胀破,释放出核物质DNA(3)使DNA溶解于NaCl溶液中(4)使DNA的溶解度下降而沉淀析出(5)二苯胺 蓝色2、解:(1)以上实验步骤中的三个错误为:a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为0.14mol/L”;b步骤中“用玻璃棒快速搅拌;d步骤中
10、没有沸水浴加热(2)洗涤剂能溶解细胞膜,有利于DNA的释放(3)c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是白色的(4)1号试管中含有DNA,加入二苯胺后沸水浴加热颜色变蓝;2号试管中不含DNA,加入二苯胺后沸水浴加热颜色不变蓝(5)DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料,原因是猪的成熟红细胞无细胞核(或无DNA)故答案为:(1)a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为0.14mol/Lb步骤中“用玻璃棒快速搅拌”d步骤中没有沸水浴加热(意思正确即可)(2)研磨充分溶解细胞膜(3)白(4)变蓝、不变蓝(5)猪的成熟红细胞无细胞核(或无DNA)3、解:(1)实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞
11、涨破释放出DNA,第二次日的是稀释 NaCl溶液,使DNA从溶液中析出,故选B(2)牛羊马为哺乳动物,其成熟的红细胞中没有细胞核,因此若它们按实验要求完成实验步骤后,结果是很难提取到DNA(3)不同的NaCl溶液中,DNA的溶解度不同,在NaCl溶液浓度是0.14mol/l时,DNA的溶解度最小(4)DNA的析出和鉴定时,析出DNA时应将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的95%的酒精,静置后溶液中将析出DNA鉴定时所用的试剂为二苯胺故答案为:(1)B(2)牛羊马为哺乳动物,其成熟的红细胞中没有细胞核(3)0.14mol/l(4)95%的酒精二苯胺4、(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)去除滤液中的杂质(3)DNA断裂(4)等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄中提取的DNA 量最多 低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢(5)将第四步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液5、(1)(2)加速血细胞的破裂 DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小(3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)
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