乳中蔗糖含量的测定

1、第 1 页* 实训七 乳中蔗糖含量的测定第 2 页1、能够以组为单位完成乳中蔗糖含量测定的过程。2、能够根据测定结果准确计算出试样蔗糖的含量。一、实训目的一、实训目的实训七 乳中蔗糖含量的测定第 3 页（一）试剂和材料：除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。 1、乙腈：色谱纯。 2、乳糖标准贮备液（20 mg/mL）：称取在942烘箱中干燥2 h的乳糖标样2 g（精确至0.1mg），溶于水中，用水稀释至100mL容量瓶中。放置4冰箱中。 3、乳糖标准工作液：分别吸取乳糖标准贮备0mL，1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10 mL容量瓶中， 用乙腈定

2、容至刻度。 配成乳糖标准系列工作液， 浓度分别为0 mg/mL， 2mg/mL，4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL，10mg/mL。 二、实训要求二、实训要求实训七 乳中蔗糖含量的测定第 4 页 4、蔗糖标准溶液（10mg/mL）：称取在105 2烘箱中干燥2h的蔗糖标样1g（精确到0.1 mg），溶于水中，用水稀释至100mL容量瓶中。放置4冰箱中。 5、蔗糖标准工作液：分别吸取蔗糖标准溶0mL，1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成蔗糖标准系列工作液，浓度分别为0mg/mL，1mg/mL，2 mg/mL，3mg/mL，4mg/mL，5mg/m

3、L。 （二）仪器和设备： 天平（感量0.1mg）、高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器、超声波振荡器二、实训要求二、实训要求实训七 乳中蔗糖含量的测定第 5 页（一）原理 试样中的乳糖、蔗糖经提取后，利用高效液相色谱柱分离，用示差折光检测器或蒸发光散射检测器检测，外标法进行定量。 （二）分析步骤 1、试样处理 称取固态试样1g或液态试样称取2.5 g（精确到0.1 mg）于50 mL容量瓶中，加15 mL5060水溶解，于超声波振荡器中振荡10min，用乙腈定容至刻度，静置数分钟，过滤。取5.0mL过滤液于10mL容量瓶中，用乙腈定容，通过0.45m滤膜过滤，滤液供色谱分析。可根

4、据具体试样进行稀释。 三、实训内容三、实训内容实训七 乳中蔗糖含量的测定第 6 页2、测定 （1）参考色谱条件 p 色谱柱：氨基柱 4.6 mm 250 mm，5 m，或具有同等性能的色谱柱； p 流动相：乙腈：水=70：30； p 流速：1 mL/min； p 柱温：35； p 进样量：10L；p 示差折光检测器条件：温度3337； p 蒸发光散射检测器条件：飘移管温度：8590； p 气流量：2.5 L/min； p 撞击器：关 三、实训内容三、实训内容实训七 乳中蔗糖含量的测定第 7 页2、测定 （2）标准曲线的制作 将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰面积或峰高，以峰

5、面积或峰高为纵坐标，以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线。 （3）试样溶液的测定 将试样溶液（试样处理液）注入高效液相色谱仪中，测定峰面积或峰高，从标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度。 三、实训内容三、实训内容实训七 乳中蔗糖含量的测定第 8 页（三）分析结果的表述 试样中糖的含量按下式计算： 式中： X试样中糖的含量，单位为克每百克（g/100 g） ；c样液中糖的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； V试样定容体积，单位为毫升（mL）； n样液稀释倍数； m试样的质量，单位为克（g）。 三、实训内容三、实训内容实训七 乳中蔗糖含量的测定第 9 页（四）注意事项与说明：1、 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值