(整理)安全检测指导书

1、食品安全检测实 验 指 导 书食品工程教研室实验一食品中铅的测定 .3实验二食品中三梨酸、苯甲酸的测定 6实验三食品中亚硝酸盐的测定 8实验四食品中漂白剂的测定（蒸储法）10实验一食品中铅的测定一、实验目的：了解食品中铅含量测定的原理；掌握食品中铅的测定方法。二、实验原理：试样经酸消解后，导入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后吸收283.3 n m共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比 较定量。三、试剂与仪器：3.1 硝酸。3.2 过硫酸钱。3.3 过氧化氢(30%)。3.4 高氯酸。3.5 硝酸(1+1):取50m硝酸慢慢加人50m冰中。3.6 硝酸(0.5 mo

2、l/1.):取3.2mL硝酸力口人50mLe中，稀释至100mL.3.7 硝酸(1 mol/L): 取6.4mL硝酸力口人50mLe中，稀释至100mL,3.8 磷酸钱溶液(20gg/L):称取2.0 g磷酸钱，以水溶解稀释100mL.3.9 混合酸：硝酸+高氯酸(4+1)。取4份硝酸与1份高氯酸混合。3.10 铅标准储备液：准确称取1.000g金属铅(99.99%),分次加少量硝酸(1+1), 加热溶解，总量不超过37mL移人1000m L容量瓶，加水至刻度，混匀。此溶液 每毫升含1.0 m g铅。3.11 铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于100m醉量瓶中，力口硝酸(0.5 m

3、ol/L)或硝酸(1mol/L)至刻度。如此经多次稀释成每毫升含量为 10.0, 20.0, 40.0, 60.0, 80.0ng铅的标准使用液。仪器：所用玻璃仪器均需以硝酸(1+5)浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗 干净。原子吸收分光光度计(附石墨炉及铅空心阴极灯)。马弗炉、干燥恒温箱、瓷地竭、压力消解器、压力消解罐。可调式电热板、可调 式电炉。四、实验步骤：试样预处理4.1 在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。4.1.2 粮食、豆类去杂物后，磨碎，过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。4.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀 浆机打成匀浆，储

4、于塑料瓶中，保存备用。4.2 试样消解湿式消解法：称取试样1.00g -5.00g 于凯式烧瓶中，放数粒玻璃珠加10mLi合 酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗电炉上消解，若变棕黑色，再加混合酸，直至冒 白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷用滴管将试样消化液洗入或过滤入(视 消化后试样的盐分而定)10 mL-25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤凯式烧瓶，洗 液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。4.3 测定4.3.2 1仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长 283. 3 nm, 狭缝0.2 nm-1.0nm ,灯电流5mA-7mA干燥温度120c ,20s ;灰化

5、温度450C ,持 续15s-20s,原子化温度1700C-2300 C ,持续4s-5s ,背景校正为笊灯或塞曼效 应。4.3.3 标准曲线绘制：吸取上面配制的铅标准使用液10.0,20.0,40.0,60.0,80.0 ng/mL(或Rg/L)各10 L 注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的 一元线性回归方程。4.3.4 试样测定：分别吸取样液和试剂空白液各10山，注人石墨炉，测得其吸光 值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含量。4.3.5 基体改进剂的使用：对有干扰试样，则注人适量的基体改进剂磷酸二氢钱 溶液(20 g/L) 一般为5山或与试样同量消除干扰。绘制铅

6、标准曲线时也要加入与 试样测定时等量的基体改进剂磷酸二氢钱溶液。五、数据记录与结果计算：试样中铅含量按式(1)进行计算。X=(C C) x v x 1000/m x 1000 (1)式中：X试样中铅含量，单位为微克每千克或微克每升 (;l/kg或JL g/L);C,测定样液中铅含量，单位为纳克每毫升(ng/mL);Co空白液中铅含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V 一 试样消化液定量总体积，单位为毫升（mL）;m试样质量或体积，单位为克或毫升（9或mL）;计算结果保留两位有效数字。精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%,六、结果分析与问题讨论实验二食

7、品中苯甲酸、山梨酸含量的测定薄层色谱法一、实验目的：掌握薄层分析的原理和方法。利用薄层法测定苯甲酸、山梨酸在 食品中的含量。二、实验原理：样品酸化后，用乙醴提取苯甲酸、山梨酸。将样品提取液浓缩，点于聚猷胺薄层 板上，展开。显色后，根据薄层板上苯甲酸、山梨酸的比移值，与标准比较定性， 并可进行概略定量。三、仪器与试剂：仪器：吹风机、层析缸、玻璃板：10cmx 18cm微量注射器：10 ; 100人、喷雾器。 试剂：异内醉、正丁醇、石油醴：沸程为30-60C、乙BL (不含过氧化物)、氨 水、无水乙醇、聚酰胺粉:200目、盐酸(1+1):取100 ml盐酸，加水稀释至200 mL 氯化钠酸性溶液(

8、40 g/L):于氯化钠溶液(40 g/L)中加少量盐酸(1+1)酸化、展 开剂：正丁醇+氨水+无水乙醇(7+1+2)、异丙醇+氨水+无水乙醇(7+1+2)、山梨 酸标准溶液：准确称取；0.2000g山梨酸用少量乙醇溶解后移入100mL容量瓶中， 并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 2.0 mg山梨酸、 苯甲酸标准溶液：准确称 取0.2000g苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度，此 溶液每毫升相当于2.0mg苯甲酸。显色剂：澳甲酚紫一乙醇(50%)溶液(0.4 g /L),用氢氧化钠溶液(4g /L)调至 pH=8,四：操作方法：样品提取：称取2.50 g事先混合均匀的

9、样品，置于25m L带塞量筒中，加0.5 m L盐酸(1 十1)酸化，用15, 10 ml乙醴提取两次，每次振摇1min,将上层醴提取液吸入 另一个25 mL带塞量筒中，合并乙醴提取液，用 3 ml氯化钠酸性溶液(40g/L) 洗涤两次，静止15 min,用滴管将乙醴层通过无水硫酸钠滤入 25mL容量瓶中。 加乙醴至刻度，混匀，吸取10.0mL乙醴提取液分两次置于10mL带塞离心管中， 在约40c的水浴上挥干，加入0.10mL乙醇溶解残液，备用。测定：聚酥胺粉板的制备：称取 1.6 g聚猷胺粉，力口 0.4 g可溶性淀粉，加约7m L 水，研磨3-5min,立即倒人涂布器内制成10 cmx 1

10、8c m,厚度。.3 m m的薄层板 两块，室温干燥后，于80c干燥1h,取出。置于干燥器中保存。点样：在薄层板下端2cm的基线上，用微量注射器点1仙12以价品液，同时各点 1仙岸仙皿梨酸、苯甲酸标准溶液。展开与显色：将点样后的薄层板放人预先盛有展开剂槽内，展开剂槽周围贴有滤纸，待溶剂前沿上展至10 cm,取出挥干，喷显色剂，斑点成黄色背景为蓝色样 品中所含山梨酸、苯甲酸的量与标准斑点比较定量 （山梨酸、苯甲酸的比移值依 次为 0.82 , 0.73 ）五、计算：X=实验三 香肠中亚硝酸盐测定一、实验的目的：掌握分光光度计的原理及其使用方法。 学会用分光光度法测定 食品中亚硝酸盐的含量。二、实

11、验原理：样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N-1-蔡基乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。三、仪器与试剂与材料：仪器：小型粉碎机；721分光光度计；万分之一天平；水浴锅等。试齐I：(1)氯化钱缓冲液：1L容量瓶中加入500mL*,准确加入20.0mL盐酸，振荡 混匀，准确加入50mL氢氧化钱，用水稀释至刻度。必要时用稀盐和稀氢氧化钱 调试至 pH9.69.7o(2) 硫酸锌溶液(0.42mol/L ):称取120g (ZaSO4 7H2训水溶解，稀释至1L。(3) 氢氧化钠溶液(20g/L):称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1L。(4) 对氨

12、基苯磺酸溶液：称取10g对氨基苯磺酸，溶于700mL*和300mL冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。(5) N-1-蔡基乙二胺溶液(1g/L):称取0.1gN-1-蔡基乙二胺，加60猿酸 溶解并稀释至100mL混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。(6) 显色剂：临用前将N-1-蔡基乙二胺溶液(1g/L)和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。(7) 亚硝酸钠标准溶液：准确称取 250.0mg于硅胶干燥中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，力口 10mL氯化钱缓冲液，加水稀至刻度，混 匀，在4 c避光保存。此溶液每毫升相当于 500仙g的亚硝酸钠。(8)亚硝酸钠标准使用液：临

13、用前，吸取亚硝酸钠标准溶液0.50mL,置于50mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0 Ng亚硝酸钠。四、操作步骤：1 ) 样品处理：称取约10.00g (粮食取5g)经绞碎混匀样品，置于打碎机，加 30mL水和6mL氢氧化钠溶液（20g/L）,混匀，用稀盐酸调样品 pH=8.0定量转移至100mL 容量瓶中加10mL硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加25mL氢氧化钠，混匀。置60c水浴中加热10min,取出后冷至室温，加水至刻度，混匀。放 置0.5h,用滤纸过滤，弃去初滤液 20mL收集滤液备用。2 ）测定（1） 亚硝酸盐标准曲线的制备： 吸取0.00; 1.00

14、; 2.00; 3.00; 4.00; 5.00mL 亚硝酸钠标准使用液（相当于0.0 ; 5.0 ; 10.0 ; 5.0 ; 20.0 ; 25.0 g亚硝酸钠）， 分别置于25mL带塞比色管中。于标准管中分别加入 4.50 mL氯化俊缓冲液，加 2.5 0mL60叱酸后立即加入5.00 mL显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置 25min,用1cm比色杯（灵敏度低时可换2cm比色杯），以零管调节零点，于波 长550nm处测吸光度，绘制标准曲线。低含量样品以制备低含量标准曲线计算，标准系列为：吸取 0,00; 0.40; 0.80 ; 1.20 ; 1.60 ; 2.00mL亚硝钠标准使用

15、液（相当于 0.0 ; 2.0 ; 4.0 ; 6.0 ; 8.0 ; 10.0仙g亚硝酸钠）。（2） 样品测定：吸取10.00mL （或更合适的量）上述滤液（4.1 ）于25mL带塞 比色管中，自4.2.1 “于标准管中分别加入4.50mL氯化俊缓冲液”起依法操作。 同时做试剂空白。5、计算Vm2 1000X 二m1 V2 1000ViX样品中亚硝酸盐的含量，mg/kg;m1样品质量，g；m2测定用样液中亚硝酸盐的质量，I g;V1样品处理液总体积，mLV2-一测定用中液体积，mL;6、思考题:1）标准曲线的求作过程中应注意哪些事项？2）紫外可见分光度计的结构如何？其测定原理是什么？实验四食

16、品中漂白剂的测定（蒸储法）1、实验目的：进一步认识二氧化硫及亚硫酸盐在食品中用途，掌握其测定方法。2、实验原理：在密闭容器中对样品进心行酸化并加热蒸储， 以释放出其中的二氧化硫，释放 物用乙酸铅溶液吸收。吸收后用浓盐酸酸化，再以碘标准溶液滴定，根据所消耗 的碘标准溶液量计算出样品中的二氧化硫含量。 本法适应于色酒及葡萄糖浆、果 脯。3、仪器与试剂：仪器：电炉；全玻璃蒸储器；300mL三角瓶；微量棕色酸式滴定管。试齐I：（1）盐酸（1+1）;（2）乙酸铅溶液（20g/L）:（3）碘标准溶液c（1/2I2）=0.01mol/L:将碘标准溶液（0.1mol/L ）用水稀释 10倍。（4）淀粉指示液（

17、10g/L）:称取1g可容性淀粉，用少许水调成糊状，缓缓亲 倾入100mL沸水中，随加随搅拌，煮沸 2min,放冷，备用，此溶液应临用时新 制。材料：红葡萄酒等4、分析步骤：4.1、 样品处理：固体样品用刀切或剪刀剪成碎末后混匀，称取约 5.00g均匀样 品（样品量可视含量高低而定）。液体样品可直接吸取 5.0010.00mL样品，置 于圆底蒸储烧瓶中。4.2、 测定：4.2.1 :蒸储：将称好的样品置入圆底烧瓶中，加入 250mL*,装上 冷装置，冷凝管下端应插入三角瓶中的 25mL乙酸铅（20g/l ）吸收液中，然后在 蒸储瓶中加入10mLit酸（1 + 1）,立即盖塞，加热蒸储。当三角瓶中溶液约200mL 时，使冷凝管下端离开液面，再蒸僧 1min。用少量蒸储水冲洗插入乙酸铅溶液的装置部分。在检测样品的同时要做空白试验。4.2.2滴定：向取下