氨茶碱溶液稳定性

1、实验三实验三 氨茶碱溶液稳定性实氨茶碱溶液稳定性实验验 方法学考察方法学考察验证内容验证内容 准确度、精密度（重复性、中间精密准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性（线性、范围和耐用性（溶液稳定性）溶液稳定性） 。耐用性定义：耐用性定义：是指在测定条件有小的变动时是指在测定条件有小的变动时, ,测定结果不测定结果不 受影响的承受程度受影响的承受程度, ,为常规检验提供依据。为常规检验提供依据。典型的变动因素有：典型的变动因素有：被测溶液的稳定性、被测溶液的稳定性、样品的提取次数、样品的提取次数、 时间等。时

2、间等。液相中典型的变动因素有：液相中典型的变动因素有：流动相的组成和流动相的组成和pHpH值、不同厂牌值、不同厂牌 或不同批号的同类型色谱柱、柱温、流速等。或不同批号的同类型色谱柱、柱温、流速等。气相色谱典型的变动因素有：气相色谱典型的变动因素有：不同厂牌或不同批号的色谱柱、不同厂牌或不同批号的色谱柱、 固定相、不同类型的单体、柱温、进样口和检测器温度等。固定相、不同类型的单体、柱温、进样口和检测器温度等。稳定性考稳定性考察察 稳定性考查一般包括稳定性考查一般包括长期冷冻稳定性长期冷冻稳定性（时间要长于取（时间要长于取样到测定中间的间隔时间、储存条件而定）、样到测定中间的间隔时间、储存条件而定

3、）、反复冻融的反复冻融的稳定性稳定性（一般反复冻融（一般反复冻融3 3次）、次）、未处理样品室温放置的稳未处理样品室温放置的稳定性定性（时间按照从样品取出到前处理的间隔而定，一般为（时间按照从样品取出到前处理的间隔而定，一般为4h4h）、）、处理过的样品放置一定时间的稳定性处理过的样品放置一定时间的稳定性（因为大批量因为大批量时，样品在进样盘中可能放置很长时间才测定，所以放置时，样品在进样盘中可能放置很长时间才测定，所以放置的条件可以参照在进样盘中的条件、时间而定的条件可以参照在进样盘中的条件、时间而定），当然有），当然有时还要求做时还要求做储备液的稳定性。储备液的稳定性。 实际操作时，一般按

4、照上述条件取得样品，代入当天实际操作时，一般按照上述条件取得样品，代入当天的随行标准曲线，然后算出浓度，再和理论浓度进行比较。的随行标准曲线，然后算出浓度，再和理论浓度进行比较。1.1.样本的室温稳定性样本的室温稳定性 一般来讲配制一般来讲配制含药物低中高三个浓度含药物低中高三个浓度的样本各的样本各3 3* *N N份，份，室温条件下放置室温条件下放置1.2.3.N1.2.3.N个小时后，处理样本，用该批标个小时后，处理样本，用该批标准曲线计算浓度，考察浓度的偏差。偏差合格则为准曲线计算浓度，考察浓度的偏差。偏差合格则为N N个小个小时稳定。时稳定。2.2.样本的处理液稳定性样本的处理液稳定性

5、 同样配制低中高三个浓度的样本各同样配制低中高三个浓度的样本各3 3* *N N份，份，样本处理样本处理后，后，1.2.3.N1.2.3.N个小时后进样分析，同样用该批标准曲线计个小时后进样分析，同样用该批标准曲线计算浓度，考察浓度的偏差。算浓度，考察浓度的偏差。3.3.冻融稳定性冻融稳定性 配制低中高三个浓度的样本各配制低中高三个浓度的样本各1212份，份，冻融冻融0.1.2.30.1.2.3次次后，处理进样分析，后，处理进样分析，考察浓度的偏差，值得提一下的是考察浓度的偏差，值得提一下的是0 0次与第一次间隔次与第一次间隔2424小时小时后再拿出解冻，第一次与第二次，后再拿出解冻，第一次与

6、第二次，第二次与第三次第二次与第三次间隔间隔1212小时后小时后解冻。解冻。4.4.长期冷冻稳定性：长期冷冻稳定性： 配制含药物低中高三个浓度的样本各配制含药物低中高三个浓度的样本各3 3* *N N份冷冻份冷冻0.N0.N天后，处理后以该天所做标准曲线计算浓度，考察天后，处理后以该天所做标准曲线计算浓度，考察偏差。偏差。5.5.储备液稳定性：储备液稳定性： 储备液放置储备液放置N N天后，在第天后，在第N N天称量（与最开始称量天称量（与最开始称量相当）药物，同时配制一个固定的浓度，以放置相当）药物，同时配制一个固定的浓度，以放置N N天的天的浓度除以新配的浓度。偏差不能超过浓度除以新配的浓

7、度。偏差不能超过5% 5% 。一般来说，一般来说，以下两种做法为多：以下两种做法为多：（1 1）对于原料药，取）对于原料药，取对照品溶液对照品溶液分别于一定时间分别于一定时间间隔进样，计算测定的间隔进样，计算测定的RSDRSD，一般不得过，一般不得过2.0%2.0%；（2 2）对于制剂，取）对于制剂，取供试品溶液供试品溶液分别于一定时间间分别于一定时间间隔进样，计算测定的隔进样，计算测定的RSDRSD，一般不得过，一般不得过2.0%2.0%； 事实上，即使是制剂中，辅料对主药的影响也很有限，事实上，即使是制剂中，辅料对主药的影响也很有限，有时甚至是起到了增加稳定性的作用，所以正确的作法是，有时

8、甚至是起到了增加稳定性的作用，所以正确的作法是，对于制剂，对于制剂，还可以选择下面这种做溶液稳定性的方法：还可以选择下面这种做溶液稳定性的方法： 取配制好的取配制好的对照品对照品溶液及溶液及供试品供试品溶液，于一定时间间溶液，于一定时间间隔测定，计算隔测定，计算含量含量或有关物质，再计算出或有关物质，再计算出RSDRSD，这样做就，这样做就可以兼顾以上两种方法的不足。可以兼顾以上两种方法的不足。方法学认证中溶液稳定性的全面判定方法学认证中溶液稳定性的全面判定l不能单从主成分入手。不能单从主成分入手。l还要注意所有组分的百分比变化，绝对还要注意所有组分的百分比变化，绝对值变化。值变化。标准品、对

9、照品定义标准品、对照品定义 l中国药典凡例中已有明确的定义：中国药典凡例中已有明确的定义：l对照品对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质。能的标准物质。l标准品标准品系指用于系指用于生物生物检定、抗生素或检定、抗生素或生物生物药品中含量或效药品中含量或效价测定的标准物质，以效价单位价测定的标准物质，以效价单位(U)(U)表示。表示。l标准物质标准物质是具有一种或多种足够均匀和很好确定了的特性是具有一种或多种足够均匀和很好确定了的特性量值量值, ,用以校准仪器用以校准仪器, ,评价测量方法或给物质赋值的材料或评价测量方法或给物质

10、赋值的材料或物质。由于其具有准确量值的计量标准物质。由于其具有准确量值的计量标准, ,故不仅用于标准故不仅用于标准分析仪器分析仪器, ,评价分析仪器的计量性能评价分析仪器的计量性能, ,而且是测量时必备的而且是测量时必备的参比标准参比标准, ,是仪器信号值转换为被测特性量值的依据。是仪器信号值转换为被测特性量值的依据。实验目的实验目的l了解方法学考察目的；了解方法学考察目的；l掌握溶液稳定性试验操作方法。掌握溶液稳定性试验操作方法。实验原理实验原理 药物溶液的稳定性试验属于药物溶液的稳定性试验属于方法学考察中耐用性方法学考察中耐用性方面方面的，目的是为了保证在一定时间内（药物稳定的，目的是为了

11、保证在一定时间内（药物稳定存在）检测出来的药物含量是准确可靠的。一般在存在）检测出来的药物含量是准确可靠的。一般在检测药物含量时，由于仪器或其他原因不能及时对检测药物含量时，由于仪器或其他原因不能及时对样品液进行含量检测，此时就需要了解药物溶液在样品液进行含量检测，此时就需要了解药物溶液在一定条件下放置多长时间内是稳定的，最终得出一一定条件下放置多长时间内是稳定的，最终得出一个稳定的时间范围，用于指导操作过程。个稳定的时间范围，用于指导操作过程。实验仪器与材料实验仪器与材料l实验仪器：紫外分光光度计、精密天平、石英实验仪器：紫外分光光度计、精密天平、石英比色皿、比色皿、50ml50ml烧杯、玻

12、璃棒、称量纸、烧杯、玻璃棒、称量纸、10ml10ml容容量瓶、量瓶、25ml25ml容量瓶、洗瓶。容量瓶、洗瓶。l实验材料：氨茶碱原料、蒸馏水、氢氧化钠。实验材料：氨茶碱原料、蒸馏水、氢氧化钠。l0.01M NaOH0.01M NaOH溶液的配制：称取氢氧化钠溶液的配制：称取氢氧化钠0.4g0.4g，用蒸馏水定容至用蒸馏水定容至1000ml1000ml，即得。，即得。实验方法实验方法l标准品溶液的制备：标准品溶液的制备：精密称取氨茶碱对照品精密称取氨茶碱对照品25mg25mg置置于于50mL50mL容量瓶中，容量瓶中，先用少量先用少量0.01M0.01M的的NaOHNaOH溶液振摇溶液振摇使溶解，再用该溶液定容至刻度，配成浓度为使溶解，再用该溶液定容至刻度，配成浓度为0.5mg/mL0.5mg/mL的溶液作为标准储备液；的溶液作为标准储备液；l样品溶液的制备：样品溶液的制备：从上述标准储备液中吸取从上述标准储备液中吸取0.5ml0.5ml溶液共两份，再分别置于溶液共两份，再分别置于25ml25ml容量瓶中，然后用容量瓶中，然后用0.01M NaOH0.01M NaOH溶液定容