药学论文：肤痒颗粒的质量控制研究

1、药学论文：肤痒颗粒的质量控制研究                   作者：吴和珍,宋爱华,杨艳芳,施 峰,刘焱文    【摘要】  目的 建立肤痒颗粒的定性定量检测方法。方法 采用薄层色谱法鉴别肤痒颗粒中地肤子、白英,高效液相色谱法测定红花中羟基红花黄色素A的含量。使用C18色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸(24670),检测波长为403 nm。结果 定性方

2、法能够检出地肤子、白英；羟基红花黄色素A在0.1281.024 g范围内与峰面积呈良好的线性关系,r0.999 8,平均回收率为99.52%,RSD1.97%(n5)。结论 该方法可作为肤痒颗粒的定性、定量检测方法。     【关键词】  肤痒颗粒；薄层色谱法；高效液相色谱法；羟基红花黄色素A        Abstract：Objective To establish the qualitative and quantitative detective methods of

3、 Fuyang granules. Methods The TLC methods for identification of Fructus kochiae and Herba solani lyrati were established. A simple HPLC was established for the determination of hydroxysafflor A (HYSA). The mobile phase was methanol-acetonitrile-0.7% phosphoric acid (24670). UV detecting wavelength w

4、as at 403 nm. Results Fructus kochiae and Herba solani lyrati could be identified by TLC. HYSA showed a linear relationship at the concentration range of 0.1281.024 g, r0.999 8. The average recovery was 99.52% and RSD1.97% (n5). Conclusion The method can be used for qualitative identification and qu

5、antization determination of Fuyang granules.    Key words：Fuyang granules；TLC；HPLC；hydroxysafflor A     肤痒颗粒收载于中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂1,由红花、地肤子、白英、苍耳子、川芎5味中药组成,具有祛风活血、除湿止痒的功效,临床用于皮肤瘙痒症,湿疹,荨麻疹等瘙痒性皮肤病。原质量标准中只有2个理化鉴别,无薄层定性和含量测定方法。为了更好地控制制剂的内在质量,本试验对其定性、含量测定方法进行了探索。

6、    1  仪器与试药   Agilent 1100高效液相色谱仪,G1314A紫外检测器。水为重蒸馏水,所用试剂均为分析纯。地肤子对照药材、齐墩果酸对照品、羟基红花黄色素A(hydroxysafflor A,HYSA)对照品均由中国药品生物制品检定所提供。白英对照药材购自湖北省中药材公司,经湖北中医学院药学院鉴定教研室鉴定。肤痒颗粒由湖北东信药业有限公司提供。    2  方法与结果    2.1  定性鉴别 &

7、#160;      取本品4.0 g,研细,加乙醇40 mL,超声处理5 min,滤过,滤液加盐酸3.0 mL,加热回流2 h,溶液放至室温后,滤过,滤液于水浴上挥去乙醇至干,残渣加水20 mL使溶解,转移至分液漏斗中,以石油醚(6090 )萃取2次,每次15 mL,合并石油醚提取液,置水浴上挥干,残渣加乙醇1 mL溶解,作为供试品溶液。另取地肤子对照药材1 g,加甲醇20 mL,超声处理5 min,滤过,加盐酸1.5 mL,加热回流2 h,放至室温后,滤过,于水浴上挥去乙醇至干,残渣加水10 mL使溶解,溶液转移至分液漏斗中,以石

8、油醚(6090 )萃取2次,每次10 mL,合并石油醚提取液,置水浴上挥干,残渣加乙醇1 mL溶解,作为对照药材溶液。再取齐墩果酸对照品适量,以乙醇溶解,制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法2005年版中华人民共和国药典(一部)附录B试验,吸取上述3种溶液各10 L,分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚-三氯甲烷-丙酮(522)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,于105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。经3批样品及阴性对照试验,结果阴性无干扰。 &

9、#160;      取本品6.0 g,加乙醇50 mL,加热回流30 min,放冷,滤过,滤液回收乙醇至干,残渣加水20 mL使溶解,溶液转移至分液漏斗中,以乙酸乙酯萃取2次,每次15 mL,合并乙酸乙酯提取液,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇1 mL溶解,作为供试品溶液。取白英对照药材2.0 g,加乙醇20 mL,加热回流30 min,放至室温,滤过,滤液置水浴上挥干,残渣加水10 mL溶解,转移至分液漏斗中,以乙酸乙酯萃取2次,每次10 mL,合并乙酸乙酯提取液,置水浴上挥干,残渣加甲醇2.0 mL使溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱

10、法2005年版中华人民共和国药典(一部)附录B试验,吸取上述两种溶液各10 L,分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯(51)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,于105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。经3批样品及阴性对照试验,结果阴性无干扰。    2.2  含量测定        色谱柱：Alltima C18柱(5 m,250 mm×4.6

11、 mm)；流动相：甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(24670)；检测波长：403 nm；柱温：25 ；流速：1.0 mL/min；理论塔板数按HYSA峰计算应不低于3 000,阴性对照无干扰。在上述条件下,HYSA的保留时间约为11 min(见图1)。    取本品颗粒1袋,精密称定,混匀,研碎,取约2 g,精密称定,置25 mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取本品水溶液5 mL,置50 mL量瓶中,以甲醇稀释至刻度,滤过,取续滤液25 mL,置蒸发皿中挥去甲醇至干,残渣以25%的甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中,以25%的甲醇溶液稀释至刻度,摇

12、匀,即得。            取处方量1/10的药材(缺红花),置1 000 mL烧瓶中,按生产工艺加水提取2次,合并提取液,静置8 h,取上清液浓缩至适量体积,转移至100 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,取溶液2 mL置25 mL量瓶中,加入糊精0.5 g,蔗糖粉1.5 g,照供试品溶液制备方法制备,即得。        精密称取HYSA对照品6.40 mg,置50 mL量瓶中,加25%

13、甲醇溶解并稀释至刻度,制成每1 mL含HYSA 0.128 mg的溶液作为储备液。精密吸取储备液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL置1 mL量瓶中,加25%甲醇稀释至刻度,制成每1 mL分别含HYSA 0.012 8、0.025 6、0.051 2、0.076 8、0.102 4 mg的溶液。精密吸取上述溶液各10 L,注入高效液相色谱仪,测定。以峰面积为横坐标,HYSA的量(g)为纵坐标,绘制标准曲线。线形回归方程为：Y-2 165.1X23.921,r0.999 8。HYSA在0.1281.024 g范围内与峰面积呈良好的线性关系。    

14、        取本品同一供试品溶液,分别于制备后放置0、1、2、4、8、12 h,精密吸取20 L,注入高效液相色谱仪,测定,计算HYSA含量,HYSA含量相对标准偏差小于2.0%,表明供试品溶液在制备后12 h内测定基本稳定。        精密称取本品同一批样品5份,按正文含量测定项下方法进行测定,结果HYSA含量标准偏差小于2.0%,表明本方法重现性良好。      &

15、#160;         根据以上10批样品测定结果,依据中药新药研究技术要求暂拟定本供试品每袋含红花以HYSA(C27H30O15)计,应不少于3.5 mg。    3  讨论        本研究参照中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂“肤痒冲剂”质量标准1拟定,采用TLC法对制剂中的地肤子、白英进行鉴别,选择的制样方法及展开剂具有分离度好、重复性好、专属性强的特点。    含量测定以红花中HYSA为指标成分,采用高效液相色谱法进行含量测定。其方法的建立,参照2005年版中华人民共和国药典(一部)红花项下含量测定的方法2,根据本制剂的实际情况,将流动相调整为上述比例,结果表明,该方法简便,准确,专属性强,能客观地反映本品的内在质量。    【参考文献】  1 国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂(第6册)S.北京：化学工业出版社,1992.92.2 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)S.北京：化学工业出版社