猪免疫抗体不同检测方法的对比试验

1、猪免疫抗体不同检测方法的对比试验摘要 应用某国产胶体金诊断试剂盒和进口酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断试剂盒，分别检测猪血清中口蹄疫、猪瘟和蓝耳病抗体合格率，比较两种血清学诊断方法的准确性。结果表明，胶体金诊断试剂盒结果和ELISA结果差异显著，两者的符合率较低。因此，应加强国内部分胶体金诊断试剂的监控。关键词：抗体检测；胶体金；ELISA随着养殖业的持续发展及动物防疫工作的进一步深化，对动物进行免疫接种已成为预防和控制动物疫病的重要手段。口蹄疫、猪瘟和蓝耳病是国家要求强制免疫的重大动物疫病，其抗体监测关系免疫效果的考核、合理免疫程序的建立，也是评估疫苗质量、对重大动物疫情预警能力的的可靠依

2、据。县级以上兽医实验室目前开展抗体监测主要使用ELISA试剂盒，其昂贵、费时和要求专业仪器和专业人员的特点，使之不适合基层推广使用。近年来，随着一系列胶体金检测产品在动物疫病检测领域的推广运用，以其操作简单、价格低廉、现场即时检测等特点，迅速获得了基层兽医站和养殖户的认可。为了解这项新技术的检测准确性和可靠性，我们用胶体金和ELISA两种试剂盒检测猪血清中的抗体水平，其结果对比如下。1 材料与方法1.1 被检血清从全市5个规模养猪场采集并分离猪血清共27份,-20保存备用。1.2 诊断试剂口蹄疫合成肽ELISA试剂盒为上海优耐特生物医药有限公司生产，批号：201012004；猪瘟抗体ELISA

3、试剂盒为北京爱德士元亨生物科技有限公司生产，批号：43220-X681；猪蓝耳病抗体ELISA试剂为北京爱德士元亨生物科技有限公司生产，批号： 40959-X061。胶体金快速诊断试剂盒为苏州艾瑞德生物医药有限公司生产，猪口蹄疫抗体快速检测试剂盒批号：CFC005A；猪瘟抗体快速检测试剂盒批号：CFC002A；猪繁殖与呼吸综合症抗体快速检测试剂盒批号：CFC001A。1.3 检测方法2 检测结果表1 两种方法检测血清抗体结果ELISA胶体金双阳性数双阳性率两者符合率总数阳性数阳性率阳性数阳性率口蹄疫2727100%1141%1141%41%猪瘟271866%2385%1763%74%蓝耳病27

4、2178%311%27%26%两种方法的检测结果经x2检验，有显著差异。表2 样品结果分布图ELISA合格ELISA不合格口蹄疫胶体金合格110胶体金不合格160猪瘟胶体金合格176胶体金不合格13蓝耳病胶体金合格21胶体金不合格1953 结果分析3.1 由表1可知，分别用2中诊断试剂盒测定27份血样抗体，ELISA测得的口蹄疫和蓝耳病抗体的合格率明显高于胶体金 ，而测得猪瘟抗体的合格率略低于胶体金。从两种方法的检测结果的符合率来看，猪瘟最高，为74%，口蹄疫次之，为41%，蓝耳病检测符合率只有26%。两种检测方法的结果出现了明显分离，因此，两种检测方法不具有平行相关性。3.2 由表2可知，对

5、样本个体而言，既有ELISA检测合格而胶体金不合格的样本，又有胶体金检测合格而ELISA检测不合格的样本。因此，不能以此判断两种检测方法的敏感性高低。4 讨论 4.1在重大动物疫病防控效果的考核中，抗体检测是检验免疫效果不可或缺的手段，而检测方法的不同往往导致结果上存在一定的差异。在本实验中，应用ELISA和胶体金两种方法对27份猪血清进行抗体检测，结果有显著差异（x2检验，P0.05）。ELISA检测技术比较成熟，具有很高的特异性和敏感性，胶体金快速诊断法需凭肉眼观察色带深浅，与参照图对照，难免主观上的偏差。另外，胶体金抗原成分与被检抗体的亲和性，也与检测的合格率直接相关。4.2而胶体金快速检测试剂盒是新型定性和半定量的现场即时检测技术，目前在人传染病和激素类检测上非常成功，而在畜禽应用上处于起步阶段。 本文对国家强制免疫的三种疾病分别用两种方法检测，结果证明，胶体金检测技术目前仅适合基层养殖场，作为动物疫病的早期诊