试验五血液分析仪的使用和结果分析

1、实验五血液分析仪的使用和结果分析Usage and Result Assessme nt of Hematology An alyzer实验原理电阻抗型血细胞分析仪原理：仪器的小孔管有内外两个电极，在接通电源的 电解质溶液中，内、外电极之间形成一个稳定的电流。 细胞悬液经负压吸引通过 小孔管上的宝石计数小孔时，由于血细胞具有相对非导电的特性，使电路中小孔 感应区内的电阻突然增大，引起瞬间电压变化而形成脉冲信号。 这些脉冲信号经 过放大、阈值调节、甄别、整形、计数及自动控制保护系统，完成对血细胞进行 计数和体积的测定，自动打印出结果。脉冲信号的强弱反映细胞体积的大小，脉冲信号的多少反映细胞的数量

2、。仪器的光电比色装置可测定血红蛋白浓度。1. 红细胞分析(1) 细胞计数：与血小板在同一通道进行检测。采用阈值调节和浮动界标 法区分红细胞与血小板。通道内的细胞介质为等渗、近中性的电解质溶液。(2) 血红蛋白测定：在白细胞通道内进行。红细胞被溶血剂破坏后，释放 出的血红蛋白转化为血红蛋白衍生物， 吸收峰在530nm550nm之间，仪器内有 流动比色装置进行测定。因ICSH推荐使用HiCN法进行仪器矫正，故采用的溶 血剂中多含氰化物，形成氰化血红蛋白；为防止环境污染，也可以采用不含氰化 物的溶血剂，如 SLS-Hb法。(3) 红细胞参数分析： MCV、RDW :仪器取自近万个红细胞体积的检 测数

3、据，由统计学运算得到的平均值和变异系数。 HCT: MCV与红细胞计数 的乘机。MCH、MCHC :计算方法与手工法相同。2. 白细胞分析(1) 白细胞计数：白细胞通道有滴加溶血素的装置，破坏红细胞前方可进 行白细胞计数。(2) 白细胞分群：溶血素在破坏红细胞的同时，也改变了白细胞膜的通透 性，使细胞内液外溢而引起了白细胞体积的改变， 此时细胞体积的大小取决于细 胞内颗粒的含量和细胞核的大小。将白细胞分成 2群3群，可计算出各自百分 率及绝对值：小细胞群：30fl90fl，以淋巴细胞为主。因淋巴细胞核较小，细胞质最少。中间细胞群：90fl160fl，主要包括嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细

4、胞。嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞颗粒较淋巴细胞丰富； 单核细胞核体积最大但 胞质颗粒并不丰富。大细胞群：160fl450fl，以中性粒细胞为主。中性粒细胞颗粒最丰富。3. 血小板分析(1) 血小板计数：与红细胞在同一通道进行检测。(2) 血小板参数分析：MPV和PDW:原理同MCV和RDW。PCT是 PLT和MPV的乘积4. 血细胞体积分布直方图：血细胞分析仪的微电脑以各种细胞的体积为横 坐标，相应大小的细胞所占百分率为纵坐标绘制成的 3个拟合曲线。分别反映各 类血细胞的群体分布情况。试剂与器材校正后的电阻抗型血细胞分析仪、配套试剂和消耗品(样品杯、抗凝管、采 血器材、消毒纱布或纸巾)。操作步骤

5、1 启动仪器、准备器材。2 采血、稀释毛细血管血和静脉血都可使用，采血方法同第一章实验1,抗凝剂首选EDTA-K2。毛细血管血可随时进行预稀释，也可先转移到盛有抗凝 剂的带盖容器中等待集中测定。如使用静脉血测定，多采用机内自动稀释，测定 前需注意转换仪器的测定模式。3上机测定，具体的仪器按说明书操作。仪器将自动对标本进行测试并打 印结果。4.记录结果、关机。考前须知1. 确认仪器在正常工作状态1稀释液空白计数各项指标应到达说明书要求。2测定低、中、高定值的全血质控标本或单项指标质控标本时，其结果应在X =2SD之内，或质控图处于质控状态。3检测标本时，仪器计数时间在规定范围内，无堵孔现象。防止

6、堵孔的措施有采血顺利，及时混匀。防止消毒棉或纸巾上的纤维物质混入血液中。 保证稀释液清洁无污染。疑为冷凝集的标本，可在37C温箱温育后测定。2. 坚持检查结果审核复查制度对已确诊或疑心血液病、发热待查患者的标 本，无论检查参数及直方图是否正常， 均应进行血涂片的显微镜检查。 对白细胞 计数和分类异常的标本、血小板严重减少或显著增加的标本，也应进行复查。3. 严格按照操作手册使用仪器并作好仪器使用登记。4. 定期保养仪器。参考范围仪器型号不同，所提供的参数数量和直方图的图形也不尽相同。 但各项参数 的数值见表2-9与手工检测结果差异不大。表2-9血细胞自动分析仪提供的参数和直方图以成人为例工程英

7、文缩写参考值报告方式白细胞数WBC410 静脉血3.59.5X 109/l红细胞数RBCM : 4.0 5.5; F: 3.54.0X 1012/L血红蛋白(Hb or HGB)M: 120160; F: 110150g/L血红细胞比容HCT or PCVM : 0.40.5; F: 0.48l/l平均红细胞体积MCV 80 100fl平均红细胞血红蛋白含量MCH 2731Pg平均红细胞血红蛋白浓度MCHC320360g/L血小板数PLT or Pit150350X 109/L小细胞或淋巴细胞百分比20 40%(W SCR or lymph %)大细胞或中性粒细胞百分比50 70%(W-LCR

8、 or Gran %)中等大小细胞单核细胞 +嗜酸<10%+嗜碱粒细胞百分比 W-MCRor Mid %( M+E+B )小细胞或淋巴细胞绝对值0.8 4.09X 109/L(W-SCC or lymph# )大细胞或中性粒细胞绝对值2.0 7.09X 109/LW-LCC or Gran#中等大小细胞单核细胞 +嗜酸<1.09X 109/L+嗜碱粒细胞绝对值(W-MCC or Mid# )红细胞体积分布宽度RDW14.5 15.5%血小板比容PCTL/L平均血小板体积MPV 6.8 13.6fl血小板体积分布宽度PDW15.5 18.1%白细胞体积分布直方图41,0613、 、_

9、-J_a和O J 400fl |红细胞体积分布直方图IM3dmisam血小板体积分布直方图结果分析1 红细胞参数的变化意义同前面章节。血细胞分析仪还可提供反映红细胞彼此之间体积差异程度的指标 RDW，其意义在于帮助鉴别缺铁性贫血和轻 型珠蛋白合成障碍性贫血：前者 RDW增大而后者可以正常，可能性各占100% 及88%。早期诊断缺铁性贫血：RDW升高早于MCV的下降。贫血形态学 分类：Bessman根据MCV/RDW可将贫血分为6类表2-10，对贫血的鉴别诊 断有一定价值。表2-10 Bessman的贫血形态学分类类型MCVRDW常见疾病小细胞均一性贫血I正常轻型珠蛋白合成障碍性贫血、慢性疾病感

10、染、尿毒症、肿瘤、类风湿性关节炎等小细胞非均一性贫血缺铁性贫血、慢性失血性贫血、铁粒幼细胞贫血正细胞均一性贫血正常正常再生障碍性贫血早期、MDS急性失血性贫血和溶血性贫血正细胞非均一性贫血正常早期缺铁性贫血、营养性混合性贫血大细胞均一性贫血正常局部再生障碍性贫血、溶血性贫血、甲状腺机能低卞大细胞非均一性贫血下巨幼细胞贫血、免疫性溶血性贫血2. 白细胞参数的变化 如白细胞检查各项参数都正常，可直接报告，无须 复查血涂片。白细胞计数异常，临床意义同手工计数，但白细胞分群并不能真正 代表白细胞分类结果。仪器出现报警信号时仍需手工复查。3. 血小板参数的变化 血小板计数见第四章实验四。血小板其他参数中

11、临 床价值较大的指标为 MPV和PDW，是判断骨髓生成巨核细胞和血小板能力的 重要依据。MPV的参考值并非在一个统一的范围。Bessman研究说明，血小板数与MPV值呈非线性负相关。血小板减少紫癜病人血小板持续减少伴MPV下降和PDW上升提示骨髓衰竭、预后不良。另外，血标本的干扰如：血小板聚 集，可导致血小板计数减少，MPV增大。红细胞碎片造成血小板计数增多。 小红细胞，造成血小板计数增多， MPV及PDW增大。4. 血细胞体积分布直方图(1)白血细胞体积分布直方图：白细胞直方图的变化，可以评价血液中白 细胞群体的变化，但缺乏特异性，不同种类的白细胞增多或减低可使白细胞直方 图产生相似的变化。

12、因此，异常白细胞直方图只能提示白细胞分群之间的比例变 化或可能出现的异常细胞(表2-11)，具体诊断时必须用显微镜复查血液涂片。 更多的是作为检验医师进行室内质量控制的依据之一。表2-11影响白血细胞体积分布直方图图形改变及出现警报信号的原因分析警告信号 岀现位置可能的原因直方图改变(2)红细胞直方图：红细胞直方图的临床应用价值不同于白细胞直方图,对指导临床医师进行贫血的鉴别诊断和疗效观察意义较大。不同类型的贫血直方 图形峰的位置、峰低的宽度、峰顶的形状表现不同，根据直方图形的不同，对不 同类型的贫血进行鉴别诊断；在贫血的治疗过程中通过观察红细胞直方图是否出 现峰顶移动，是否可出现双峰现象来进

13、行治疗效果的观察。但应明确，因红细胞平均寿命约120d,故而贫血有效治疗后出现的双峰现象可持续较长时间。(3) 血小板直方图：血细胞自动分析仪根据血小板体积的大小和离散情况 表现出不同的直方图，其范围主要分布在 2fl-30fl之间。影响血小板直方图的因 素有：红细胞碎片：可干扰血小板直方图，使其出现异常。血小板聚集：直 方图显示峰左侧起点较高，血液涂片上可见聚集成堆的血小板。小红细胞干扰： 直方图显示峰的右侧离横坐标较高，呈拖尾状，血液涂片上可见较多的小红细胞。 血小板体积异常缩小：直方图显示峰左移，MPV偏小，提示血样中以小血小板为主。实验评价1. 血细胞分析仪可分为电阻抗型、光电型、光散射型、电容型等。目前临床实验室应用最为广泛的仪器为电阻抗型， 主要完成红细胞、血小板各项参数的 检测及白细胞计数及三部法分类。 可进行五部法白细胞分类的仪器有： 容量、电 导、光散射型，阻抗与射频联合白细胞分类法，激光与细胞化学技术联合白细胞 分类计数和多角度偏振光散射白细胞分类技术。 其中电阻抗型血液分析仪在临床 应用范围最广。2. 本法具有标本用量少、简便快速、精密度高的优点