液相进样针数

1、液相进样针数一、含量方法学研究所需图谱（流动相、检测限和定量限参照有关物质，如有关物质和含量方法一致，可以只做进样精密度、溶液稳定性）1、线性：包含60%、80%、100%、120%、140%,通常是57针，要求r.0.9992、进样精密度：用对照品做，单样连续进六针，要求RSD<2.0%。3、重复性试验：双样双针，一个样进两针，六个样，两个对照，总共16针,要求RSD<2.0%。4、回收率（准确度）：总共22针，分别做三个80%、三个100%、三个120%,一个样两针，两个对照四针，九个样18针，要求回收含量在98%102%之间，RSD<2.0%。5、含量测定：总共28针，

2、方法验证一两个对照品四针，仿制品两个样四针，小试样品两个样四针。中试样品三批一两个对照四针，一批双样四针，三批六个样十二针。6、溶液稳定性：单样单针，分另U0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%,7、专属性：空白辅料、空白溶剂、正常样、热破坏样、酸破坏样、酸液空白样、碱破坏样、碱液空白、光破坏样、氧化破坏样、双氧水空白样。共九针，需达到降解约20%,该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于2.0（已知杂质）。8、稳定性试验：包括加速0、1、2、3、6月30、40C,长期3、6、9、12、24月，均做含量测定和有关物质。含量测定双样双针，一样两针，一批两样，三批六样十二针

3、，两个对照四针。有关物质做空白溶剂，单样单针，100%样品、1%自身对照，共七针二、有关物质方法学研究所需图谱1、波长扫描和流动相的选择：参照国家标准并根据欧洲药典、USP英国药典以及日本药典中收载的流动相做，取样品，配成一定浓度进样，进行比较确定，选取其中最合适的。确定流动相后，并驱样品、对照品以及国外上市样品，配成参考文献中的浓度，进样；要求：分离度达1.5以上，分析时间通常为主身份保留时间的2-3倍，分析时间长可考虑采用梯度洗脱，共n+3张图谱系统适用性试验：配制6份相同浓度的杂质溶液进行分析，该杂质峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%,保留时间的相对标准差应不大于1.0%。另外，杂质峰

4、的拖尾因子不得大于2.0,理论塔板数应符合质量标准的规定。（已知杂质）耐用性：分别考察流动相比例变化土5%、流动相pH值变化±0.2、柱温变化土5C、检测波长变化土5nm、流速相对值变化土20%以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：各杂质峰的拖尾因子不得大于2.0,杂质峰与其他成分峰必须达到基线分离；各条件下的杂质含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%,杂质含量的绝对值在土0.1%以内。2、空白溶剂以及辅料干扰试验：取溶解样品用的溶剂，注入液相色谱仪，记录色谱图。观察溶剂图谱情况。并取样品、处方量的空白辅料按同样方法

5、配成一定的浓度，进样，记录的谱图。看辅料是否有干扰。共三张图谱，辅料吸收峰面积相对于主峰<0.05%视为无干扰杂质定位：如有已知杂质并且杂质对照品可获得的，配制杂质对照溶液，进样，记录色谱图。共四张图谱。3、专属性：正常样、热破坏样、酸破坏样、酸液空白样、碱破坏样、碱液空白、光破坏样、氧化破坏样、双氧水空白样。共九针，需达到降解约20%,该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于2.0（已知杂质）。4、检测限与定量限：检测限用稀释法一12个样12针。配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液杂质峰保留时间的相对标准差应不大于2.0%,峰面积的相对标准差应不大于5.0%。检测限S/N&g

6、t;3,定量限S/N>10。5、回收率（已知杂质）：分别做三个80%、三个100%、三个120%,一个样两针，两个对照四针，九个样18针，要求回收含量在80%120%之间，RSD<2.0%。各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%,相对标准差应不大于10%。6、线性：包含60%、80%、100%、120%、140%,通常是57针，要求r>0.999。截距在100%响应值的25%以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。7、1%精密度：单样连续进六针，要求RSD<2.0%。8、重复性试验（已知杂质

7、）：双样双针，一个样进两针，六个样，两个对照，总共16针，要求RSD<15.0%。9、溶液稳定性：单样单针，分另U0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%。按照分析方法分别配置对照品溶液与供试品溶液，平行测定两次主成分与杂质的含量，然后将上述溶液分别贮存在室温与冰箱冷藏室（4C）中，在1、2、3、5和7天时分别平行测定两次主成分与杂质的含量。可接受的标准为：主成分的含量变化的绝对值应不大于2.0%,杂质含量的绝对值在士0.1%以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质。10、小试方法验证及被仿制品：被仿制品1%自身对照，被仿制品100%样品，小试100%,小试1%自身对照。

8、方法验证：中试样品三批，100%样品和1%自身对照，空白溶剂。11、注明：主峰图谱要求拖尾因子0.95<r<1.05,分离度最好要求1.5,理论板数一般不低于3000.（个别品种需根据实际要求而定）。三、聚合物方法学研究图谱1系统适应性试验（水和磷酸盐缓冲液）：蓝色葡聚糖2000和对照品，理论塔板数要求不低于700。2、空白辅料3、供试品4、专属性试验：供试品，辅料干扰。5、检测限与定量限：般以信噪比3:1相应浓度确定最低检测限，以检测限X1000的量或浓度作为测定量（浓度）6、1%进样精密度：单样连续进六针，要求RSD<2.0%。7、溶液稳定性：单样单针，分另U0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%。8、线性：（浓度范围20%-200%）7个样。供试品溶液的浓度与聚合物测定结果的相关性考察：制备系列的供试品溶液，浓度范围为规定浓度的50%200%,共三份样品，以测得的高聚物峰面积对溶液浓度进行线性回归，相关系数r应大于0.99。F值测定的重现性考察：F值为对照溶液的浓度（mg）与测得的峰面积的比值，要求日内、日间的相对标准偏差在5%以内。对照品20%50%80%100%120%150%200%9、聚合物测定（方法验证）被仿制品供试品被仿制品对照一质量研究供试品一