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文档简介
1、采用HPLCfe测定三七中3种皂甘的含量三七是我国传统医学中最珍贵的药材之一,具有止血、补血、活血、抗血栓等多种功效1。本文以三七总皂苷分散片为研究对象,通过高效液相色谱法对三七皂音R1、人参皂昔Rb1、人参皂苷Rg1等三种皂苷含量进行测定,并对其具体操作方法及检测结果进行分析。具体报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料仪器:选择日本岛津仪器生产的LC-10A高效液相色谱仪(组成部分有微体积串联双柱塞、柱温箱、紫外可见双波长检测器、超声波提取器HS3120、中文化LC工作站)。试剂J:对照品人参皂昔Rb1(批号:110703-201420)、对照品人参皂苷Rg1(批号:110703-2014
2、21)、对照品三七皂苷R1(批号:110703-201423);三七总皂苷分散片(三七总皂苷含量为50mg/片);洗脱剂乙腈(色谱纯)、甲醇(分析纯)、水(超纯水)。其中,对照品皂苷购自中国食品药品检定研究院,三七总皂苷分散片为自制,洗脱剂购自津市科密欧化学试剂开发中心。1.2 方法分别取人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品进行精密称定,并使用浓度为20%的乙腈水溶液对其进行溶解,并制成1ml的混合溶液(其中人参皂苷Rb1含量为0.5mg、人参皂音Rg1含量为0.4mg三七皂音R1含量为0.12成。同时取两片三七总皂苷分散片研细,精密称取0.3g,用50ml甲醇溶解,再次称定经超
3、声处理后,冷却,称定并使用甲醇将重量补足,以微孔滤膜进行滤过处理,精密量取25ml续滤液,待其彻底挥干之后,在残渣中加入甲醇溶液进行充分溶解。溶解结束之后转移至大小合适的容量瓶中,稀释混匀,再次进行滤过处理,获得的续滤液即为供试品溶液。色谱柱选择规格为4.6mrm250mm5m的Inertsil-Cl8柱,流动相选择乙腈-水溶液(前28min和40min后乙腈与水的比例为19:81,2840min乙睛与水的比例为47:53),在流速1.0ml/min、柱温为35c条件下,波长203nm下对三种不同皂苷的含量进行检测。对照品溶液、供试品溶液的进样量分别为10以L和3以L。同时,在不同条件下分别对检测时的线性关系、精密度、样品溶液稳定性、回收率等进行考察。2 结果观察高效液相色谱法检测获得的色谱图,列出峰面积(A)与进样量(C)的线性回归方程,可见人参皂音Rb1、人参皂昔Rg1、三七皂音R1的线性范围分别是0.48以g、0.510以g、0.122
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