草坪褐斑病菌和镰刀枯萎病菌拮抗木霉菌的筛选及效果研究

1、草坪褐斑病菌和镰刀枯萎病菌拮抗木霉菌的筛选及效果研究52GrasslandandTurf(Bimonthly)2006No.6(SumNo.119)草坪褐斑病菌和镰刀枯萎病菌拮抗木霉菌的筛选及效果研究姚彦坡h,吕国忠,张淑金.,孙晓东研究所,辽宁大连116600;3.大连市高新技术创业服务中心,辽宁大连116600)摘要:通过木霉属5个菌株与草坪禾草褐斑病茼,草坪禾草镰刀枯萎病茼的对峙培养试验,发现哈茨木霉1,哈茨木霉2,深绿木霉,钩状木霉及桔绿木霉的抑茼效果很好,可以作为草坪镰刀枯萎病菌的生物防治拮抗茵加以利用.在这5株木霉中以哈茨木霉对草坪镰刀枯萎病菌的拮抗作用最强.关键词:木霉茼;苹坪禾

2、草褐斑病菌;草坪禾草镰刀枯萎病茵拮抗作用中圈分类号:S432文献标识码:A文章编号:10095500(2006)06005204草坪禾草褐斑病菌(Rhizoctoniasolani),草坪禾草镰刀枯萎病(Fusariumoxysporum)是发生在草坪上的一类重要的土 菌病害.该病害在我国冷,暖季型草坪上普遍发生,且对草坪的生长和发育危害严绝大多数为多年生植物.这为草坪禾草褐斑病菌,草坪禾草镰刀枯萎病菌的积累提供了有利条件.目前,国内在对草坪镰刀枯萎病等土传病害的防治中,化学染环境,而且病原物易对杀菌剂产生耐药性甚至抗药性,所以,在植物病害防治中越来越多的人们开始探索利用生物防治的方法来解决植

3、物病害问题,生物防治逐渐成为人们所关注的焦点和热点,尤其是拮抗木霉菌(Trichodermaspp.)在植物病害防治中的应用倍受人们的关注1.因此,利用拮抗微生物防治草坪土传病害将是我国未来草坪病害防治的新方向.木霉菌在植物病害生物防治中具有重要的地位和意义2.作为一种有益真菌,木霉菌广泛存在于土壤及其他基质中,其生存能力强,适应性广,具有对多种植物病原菌的拮抗作用和强烈的分解纤维素的能收稿日期:20060322;修回日期:2006一II一28作者简介:姚彦坡(1977一),男,河北邯郸人,在读硕士研究生.吕国忠为通讯作者.要开发价值的自然资源正逐渐被农业生物防治领域研究,开发和利用.在国内外

4、研究中,利用木霉菌防治植物病害特别是土传病害的报道很多,但对草坪禾草褐斑病菌和草坪禾草镰刀枯萎病生物防治的研究较枯萎病这2种重要草坪土传病原菌的拮抗作用,以期筛选到对草坪土传病害防治有应用潜力的木霉菌,提高对草坪病害的综合防治效果.l材料和方法病原菌:立枯丝核菌(R.solani),尖孢镰刀菌(F.oxysporum)菌株为2004年夏季在大连金石滩高尔夫球场采集的草坪病害标本分离获得和鉴定.木霉菌:供试的木霉菌菌株由大连高尔夫球场的草坪禾草根际土壤分离获得和鉴定,共获得5个木霉菌株,即哈茨木霉1(Trichodermaharzianum),哈茨rinoviride)及钩状木霉(T.hamat

5、um).培养基:病原菌和木霉菌的培养均采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA).菌苔的制备:取分离到的木霉菌株哈茨木霉1,哈茨木霉2,深绿木霉,桔绿木霉,钩状木霉及草坪褐斑病菌立枯丝核菌,草坪禾草镰刀枯萎病菌尖孢镰刀菌,分别接种于PDA平板培养基上,于25培养箱草原与草坪2006年第6期总第119期53中培养3d,然后用直径5mm的经灭菌的打孔器在菌落边沿打取菌苔备用.对峙培养:在直径90mm的PDA平板培养基上,在相距3cm处分别接入上述制备好的木霉菌菌苔和病原菌菌苔作对峙培养,以单独接种各供试菌的菌苔为对照,置于培养箱中25计算时,采用两菌落相向半径进行拮抗生长测定.'在木霉菌与病原菌

6、对峙培养试验中,往往以产生菌在抑制病原真菌的同时,其自身也被病原真菌所抑制率与相对抑菌效果依据宋瑞清等口的计算方法.被抑制率=璺型塑笔篆鬲要×00相对抑菌效果一霎曩崔蓑器篙睾2结果与分析5株木霉菌和2种病原菌的生长速度不同(表1),以哈茨木霉l和褐斑病菌生长较快,其中哈茨木霉1在6Oh菌落半径达4.5cm,已长满培养皿,而哈茨木霉2在72h菌落半径才达2.68cm,其他3株木霉菌养皿,而草坪枯萎病菌在72h菌落半径才达2.05cm.供试的5株木霉菌和2种病原菌对峙培养后茵丝生长速度不同(表2),哈茨木霉1与褐斑病菌对峙培养72h,菌落相向半径仍可达3.55cm,生长较快,而深绿木霉菌

7、与镰刀枯萎病菌对峙72h,其相向半径才达1.58cm.从对峙培养的相向半径结果来看,5个木霉菌株对草坪褐斑病菌的拮抗效果要好于其对草坪镰刀枯萎病菌的作用.拮抗真菌在抑制病原真菌的同时,其本身也被病原真菌所抑制,因此在计算拈抗能力时,采用相对抑制效霉菌株对草坪褐斑病菌的抑制率和相对抑制效果见图分别为:钩状木霉,哈茨木霉1,深绿木霉,哈茨木霉2,枯绿木霉.而相对抑制效果由高到低依次为:哈茨木草坪褐斑病菌拮抗效果最好的为哈茨木霉2,相对抑抗能力,可以作为生防菌加以开发和利用.囊1木霉曹和瘸原曹单独培养的曹藩半径Table1SemidiameteroffungElcoloniesculturedind

8、ividually培养时问/hRsF122436486O72注Thar1一harzianumllThar2一丁.harzianum2lTat一丁.atroviride;Thaoxysporum'裹2木霉蕾与痛原蕾对峙培养结果54GrasslandandTurf(Bimonthly)2006No.6(SumNo.119)时间/h图1木霉菌株对草坪褐斑菌的抑制率时间/h田2术霉菌株对草坪褐斑菌的相对抑制效果由于拮抗真菌在抑制病原真菌的同时,其本身也被病效果.即拮抗真菌被抑制1个单位所产生的效果.木霉菌株对草坪镰刀枯萎病菌的抑制率和相对抑制效由高到低为:钩状木霉,桔绿木霉.哈茨木霉2,哈茨木

9、次为:哈茨木霉2,钩状木霉,桔绿木霉,哈茨木霉1,深病菌对峙培养中,在最初的24h内不但没有抑制病原菌的生长,反而促进病原菌的生长,之后,拈抗能力逐渐上升.除深绿木霉外,其他4个木霉菌株对草坪镰为草坪上镰刀枯萎病的拮抗生防菌加以开发利用.田3术霉菌株对草坪镰刀枯萎病菌的抑制率舳O褥器5432lO1眯较幂嚣靛罂.柏加O加莲姗罐嚣.草原与草坪2006年第6期总第119期55圈4术霉曹株对草坪镰刀桔薹病誓的相对抑制效果3讨论抑菌试验表明,在PDA培养基上,木霉菌的5个菌株中,除深绿木霉对镰刀枯萎病菌具有促进作用外,其他4个木霉菌株对草坪褐斑病菌和镰刀枯萎病菌有和丝核菌有很强的拮抗能力,这与田连生引,

10、徐同报道的结果相一致.在试验的木霉菌株中,哈茨木霉1,哈茨木霉2,钩状木霉及桔绿木霉可以作为草坪褐斑病,镰刀枯萎病的生物防治拮抗菌加以开发利用深绿木霉可用于对草坪褐斑病的生防菌.从试验结果还可以看出,一种拮抗菌并不是对所有的病原菌都有拮抗作用,相反,有时对病原菌的生长还有促进作用,如研究中深绿木霉与草坪镰刀枯萎病菌的对峙培养中,就有此类现象发生,这与宋瑞清等报道的有关木霉菌可以促进病菌的生长一致.目前,在对拮抗木霉菌株进行筛选时,普遍采用平板上木霉菌对病原菌的抑制作用作为主要的筛选标准方法所得到的结果往往与盆栽试验和大田应用试验的存在很多缺陷,导致筛选效率低下,不能筛选到有效的菌株.发现快速简

11、便而又可靠的筛选技术势在必行.在应用木霉进行病害生物防治时,由于种内和种间的差别,木霉菌与其他微生物之间也发生种种相互作用.木霉菌可以专化作用于多种病原菌,这种专化作用与抗生素和细胞壁降解酶有关.因此,在选择高效拮抗菌时,应选择那些相对抑菌效果好,而拮抗菌本复杂的生存环境之中,受到多种条件的影响,实际的应用效果要低于室内.因此,在试验中筛选到的木霉菌株的实际生物防治效果还有待于室外应用检验.参考文献:1陈为京,陈建爱.木霉对土壤环境适应性分析J.菌物系统,2003,22(增刊);395398.wthanddeliveryofbiologicalcontrolagentstothesoll口.P

12、hytopathology,1975,65:819821.制能力及其对植物病原真菌的拮抗作用FJ.菌物系统,2003,22(增刊)l3994O1.E4-高克祥.木霉菌株T88对7种病原真菌的拮抗作用J.河北林果研究,1999,70:880885.E53王芋.木霉菌在生物防治上的应用及拮抗机制J.黑龙江农业科学.2001,(I):4143.63李宏科.拮抗微生物的开发和利用J.世界农业,1998,(2):2830.7宋瑞清,周秀华.木霉(Trichodermaspp.)对三种引起大棚蔬菜病害病原菌的影响J.菌物研究,2004,2(4):6,1O.E8田连生.木霉对尖镰孢菌的拮抗及生防效果研究J.

13、植物保护,2001.27(4)4748.J.植物病理,2002,32(2);97102.(下转59页)Sl50lO眯餐磊嚣智霉草原与草坪2006年第6期总第119期59RoleofgreenlandinurbanonthereductionofheatislandeffectWANGJuan,LINYinding,LIUQingliTechnologyCollege,Xiongyue115009,China)Abstract:Theeffectofverticalstructure,acreageandshapeofurbangreenlandonheatislandreductionwass

14、tudiedinTaiyuanCity.Thesequenceofabilityforreduongheatislandeffectwaswoodland>treeeffectreduction.Keywords:urbangreenland;heatislandeffect;verticalstructure(上接55页)/grassisland-+一?-一+-4-,AntagonisticeffectofTrichodermaagainstRhizoctonia0'111'solaniandusartum0xysporumoccurringonturfgras

15、sYAOYanpo,LVGuozhong,ZHANGShu-jin.,SUNXiaodong(1.CollegeofPlantProtection,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110161,China;2.InstituteofBioresourcesandEnvironment,DalianNationalitiesUniversity,Dalian16600,China;techE,.P户,.PP",声Centres,Dalian116015,China)bornepathogens,theyareofpotentialbiocontrolagents