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1、单位及实验室名称 项 目 汉源县人民医院检验科 尿液标本的细菌学检验操作 编号:LAB/SOP/HY/微-003 日期:2010年5月3日 版本:第一版,第0次修订 第1页,共3页一、【标本采集】1.接受无菌导尿法,取尿液5-10ml,盛于无菌试管中送检。2.尿路感染一般采集中断尿:其方法为:(1)女患者先用肥皂水及1:1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口,留取中段尿;(2)男患者应先翻转包皮冲洗,用2%红汞或1:1000苯扎溴铵消毒尿道口,留取中段尿;(3)儿童、婴儿先消毒其阴部,将无菌小瓶直接对准尿道,待排尿后立即送检。3.若取左右两侧肾盂尿,应由泌尿科医师实行,左右侧的标签应标记明确
2、,以免消失错误。4.做结核杆菌检查时,可收集24h尿液,将沉淀部分盛于洁净瓶内送检。伤寒杆菌等其它细菌的培育检查,可取早晨第一次尿液送检。5.膀胱穿刺:此法主要用于厌氧菌培育。二、【检验方法】1.直接涂片检查(1)一般细菌涂片:以无菌方法吸取尿液1015ml置于无菌试管内,经3000r/min,离心沉淀15-20分钟,倒去上清液,取沉渣涂成薄膜镜检,自然晾干,革兰染色镜检,可以得出初步报告“找到革兰菌,形似细菌”。(2)结核分枝杆菌:尿液经高压消毒后,将尿液离心取沉淀物涂片,抗酸染色镜检,依据镜检可报告:“找到或未找到抗酸杆菌”。(3)假丝酵母菌涂片:取尿液离心沉淀物置于洁净玻片上,加以盖玻片
3、,轻轻加压,用高倍镜检查。如沉渣太多可滴加100g/L的KOH溶液使其溶解后再镜检。若发现有发亮的芽丝胞子和假菌丝,经革兰染色镜检时有酵母样细胞时,可报告“找到酵母样细胞,形似假丝酵母菌”。否则可报告“未找到假丝酵母菌”。2.细菌培育(1)一般细菌培育:将接种环灭菌后挑取离心沉淀物,分别接种在血平板及中国兰平板上,35培育18-24h,观察有无细菌生长,依据菌落特征和涂片、染色结果,选择相应的方法做进一步鉴定,如培育2天无细菌生长,则报告“经48h培育无细菌生长”。(2)厌氧菌培育:必须用膀胱穿刺尿进行培育,接种厌氧琼脂平板,置厌氧环境。三、【检验程序】 尿液 离心沉淀涂片染色镜检 定量培育 分离培育 结核杆菌检查 细菌计数 厌氧环境培育 一般及CO2环境培育 罗氏培育基 涂片镜检 菌落观察 生化反应试验 血清学检查 自动化鉴定 药敏试验 报告结果四、【结果判定】清洁中段尿标本中革兰阴性杆菌菌落计数>105cfu/ml,革兰阳性球菌菌落计数>104cfu/ml有诊断意义,如培育48h无细菌生长,则报告“培育48h无细菌生长”。 作者:肖德慧 时间:2010-5-3内容总结(1)2.尿路感染一般采集中断尿:其
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