02临床生物化学实验室基本技术与管理

1、临床生物化学实验室基本技术与管理 一、重点 (一)实验室基本技术 1常用临床生物化学技术如光谱、电泳、离心、层析、电化学等技术在临床生化检测中的应用原理、应用方法和应用注意事项。 2常用免疫学技术如免疫透射比浊分析、放射免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析、时问分辨荧光免疫分析和流式细胞免疫分析等在临床生化检测中的应用原理、应用方法和应用注意事项。 3生物芯片和生物传感技术的原理、分类和在临床生化检测中的应用优势及应用注意事项。 4酶蛋白分离纯化、纯度鉴定和保存。 (二)实验室全面质量控制 1实验标本的质量要求、采集方法和影响因素。 2实验方法的分级、选择原则、评价方法及诊断性能，标准品的分

2、级使用原则。 3实验试剂的类型、选择原则、性能指标和评价方法。 4实验室全面质量控制的主要内容、室内质控和室问质评方法及胛方案等。 二、难点 HPLC、电化学技术；化学发光免疫分析、时间分辨荧光免疫分析；生物芯片和生物传感技术的原理；实验方法的评价及诊断性能；实验试剂的性能指标和评价方法；室内质控和室间质评方法及胛方案。三、常见题型与习题 (一)单项选择题(A型题)1为了维持移动速度恒定，进行蛋白电泳 时常固定的参数是 A电压 B电阻 C电流 D时问 E介质长度 【本题答案】 A2分光光度法中吸光度(A)与透光率(T)的 关系是 A T=2一lglA B T=2一lgA C A=2一lglT

3、D A=2一lgT E A=1一lgT 【本题答案】 D3利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是A凝胶层析法 B吸附层析法 C分配层析法 D亲和层析法 E离子交换层析法 【本题答案】 E4下列何者为含有层析法、吸光度、荧光等的仪器 A气相色谱仪 B高效液相色谱仪 C电泳仪 D超速离心机 E全自动生化分析仪 【本题答案】 B5通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路，将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称 A基因芯片 B蛋白质芯片 C细胞芯片 D组织芯片 E芯片实验室 【本题答案】 E6进行离心时，离心机转头的旋转速度为20 000rmin，相对离心为

4、40 000g，可称之 A低速离心 B平衡离心 C高速离心 D超速离心 E等密度离心 【本题答案】 C 7不属于生物传感器的是 A电化学传感器 B微生物传感器 C组织传感器 D免疫传感器 E酶传感器 【本题答案】 A8由实验室自己配置或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为 A一级标准品 B二级标准品 C控制物 D参考物 E原级参考物 【本题答案】 D9用于发展及评价参考方法和一级标准品的方法称为 A决定性方法 B参考方法 C指定参考方法 D常规方法 E经典方法 【本题答案】 A10测定光线通过溶液混悬颗粒后的光吸收或光散射程度的定量方法是 A荧光定量分析法 B散射光谱分析法 C发射

5、光谱分析法 D吸收光谱分析法 E原子吸收光度法 【本题答案】 B 11可见一紫外分光光度法的理论基础为 A LambertBeer定律 B Nelmst方程式 C Rayleigh方程式 DHeidelberger曲线 E ROC曲线 【本题答案】 A 12离心技术中对颗粒沉降速度无直接影响的因素是 A介质的粘滞度 B颗粒直径 C离心加速度 D颗粒偏离球形的程度E颗粒多少 【本题答案】 E13代表诊断试剂盒剂型研制的主要发展方向是 A液体型单试剂 B液体型双试剂 C固体粉型试剂 D固体片型试剂 E固体型单试剂 【本题答案】 B14有一蛋白质水解产物在用pH 6阳离子交换剂层析时，第一个被洗脱下

6、来的氨基酸是 A缬氨酸(pI 596) B赖氨酸(pI 974) C天冬氨酸(pI 277) D精氨酸(pI 1076) E酪氨酸(pI 566) 【本题答案】 A15能分析出有机化合物的元素组成及构造的仪器是 A原子吸收分光光度仪 B火焰光度计 C高效液相色谱仪 D质谱议 E毛细管电泳仪 【本题答案】 D16进行样品分析时，下列情况属偶然误差的是 A分析中存在干扰物 B吸管未经校正 C分析仪器波长不准 D标本量加错 E天平未经校正 【本题答案】 D17使用高效液相色谱分析仪进行定量分析时，最能代表分析物的量的是 A延滞时问 B峰高 C峰面积 D溶解度 E达峰时间 【本题答案】 C18根据蛋白

7、质分子的配基专一性进行分离的方法是 A离子交换层析 B凝胶过滤 C分子筛效应 D亲和层析 E分配层析 【本题答案】 D19Westgard多规则质控法中属警告规则的是 A 12s B 13s C 24s D 4ls E l 0x 【本题答案】 A20Westga耐多规则质控法中表示有随机误差的规则是 A 12s，22sB 13s，R4s C 22s，R4s D 22s，4ls E 4s, 10x 【本题答案】 B21我国室间质评系统中所规定“优良”的变异指数得分(VIS)是 A <50 B <80 C <100 D <150 E <200 【本题答案】 B22可用

8、平均值加减2个标准差(又±2s)作为参考值范围的血清生化检验项目是 A钾 B葡萄糖 C TG D ALP E ALT 【本题答案】 B23通过实验室间的比对，观察其结果的准确性、一致性、并采取一定措施使各实验室趋向一致的是 A室内质控 B室问质评 C实验室评审 D实验室认可 E实验室认证 【本题答案】 B24ROC曲线中的横轴表示 A假阳性率 B真阳性率 C灵敏度 D准确度 E特异性 【本题答案】 A25在方法比较试验中，统计求得的回归系数b代表的是 A偶然误差 B系统误差 C恒定误差 D比例误差 E两法相关性 【本题答案】 D26通过测定基因的丰度来确定基因的表达 模式和表达水平的

9、芯片是 A基因芯片 B蛋白质芯片 C芯片实验室 D组织芯片 E细胞芯片 【本题答案】 A27进行回收试验的样品浓度最好用 A病理标本的最高浓度值 B病理标本的最低浓度值 C参考范围内的浓度值 D医学决定水平的浓度值 E参考范围的上限浓度值 【本题答案】 D28临床自动生化分析仪配套用的标本条码下有10个阿拉伯数字，表示标本号的是 A第13位 B第45位 C第6位 D第78位 E第910位 【本题答案】 A29不是影响荧光定量分析中荧光强度的因素是 A光物质的浓度 B溶剂的性质 C荧光物质的摩尔吸光系数 D温度 E溶液的pH值 【本题答案】 C30下列蛋白质通过凝胶层析柱时，最后被洗脱的是 A过

10、氧化氢酶(分子量247 500) B血清白蛋白(分子量685 00) C乳球蛋白(分子量35 000) D肌红蛋白(分子量16 900) E牛胰岛素(分子量5700) 【本题答案】 E31离子交换树脂层析法无法除去下列哪种物质 A清蛋白 B甘氨酸C乙醇 D CKMB E LD【本题答案】 C32影响测定准确度的最重要的因素是 A干扰物的影响 B人员素质 C标本处理 D所用校准品 E所用仪器【本题答案】 D 33类固醇、儿茶酚胺、肾上腺素等物质测定时，尿标本防腐剂应选用 A浓盐酸 B甲醛 C甲苯(二甲苯) D麝香草酚 E浓硫酸 【本题答案】 A34测定比例系统误差的试验是 A重复性试验 B干扰试

11、验 C线性试验 D回收试验 E检测能力试验 【本题答案】 D35用于纯化酶和受体蛋白的最好方法是 A盐析法 B凝胶层析 C亲和层析 D离子交换层析 E有机溶剂沉淀法 【本题答案】 C36自动化特种蛋白分析仪多采用 A散射比浊分析技术 B透射比浊分析技术 C荧光分析技术 D电化学分析技术 E酶免疫分析 【本题答案】 A 37诊断试验临床应用价值评定过程中，选择研究对象时的样本量一般要求 A >30 B >60 C >90 D >100 E >150 【本题答案】 D 38ROC曲线的主要作用不包括 A易于查出任意界限值时对疾病的识别能力 B选择最佳的诊断界限值 C比

12、较两种及其以上的不同诊断试验对疾病的识别能力 D能提供一个比较直观、全面的关于灵敏度、特异度的情况 E能提供一个比较直观、全面判断测定结果是否准确的情况 【本题答案】 E 39与聚丙烯酰胺凝胶电泳的浓缩效应无关的因素是 A凝胶层的不连续性 B缓冲液离子成分的不连续性 C电位梯度的不连续性 D pH的不连续性 E蛋白质分子大小 【本题答案】 E 40分离分子量相近但等电点不同的蛋白质的首选方法为 A醋酸纤维薄膜电泳 B圆盘电泳 C密度梯度离心 D等电聚焦电泳 E琼脂糖凝胶电泳 【本题答案】 D 41凝胶过滤分离蛋白质的原理所利用的是 A蛋白质所带电荷的多少 B蛋白质是清蛋白还是球蛋白 C蛋白质所

13、含酸性氨基酸的多少 D在某个体系内该蛋白质含量的多少 E蛋白质的分子大小 【本题答案】 E42基于元素所产生的原子蒸气中待测元素的基态原子对所发射的特征谱线的吸收作用进行定量分析的技术是 A吸收光谱分析法 B散射光谱分析法 C发射光谱分析法 D荧光定量分析法 E原子吸收光度法 【本题答案】 E 43由于标本中与被测物共存物质也能和测定试剂发生反应所引起的误差原因是 A主观因素 B不遵守光吸收定律 C化学因素 D光学因素 E有色物质的生成受到影响 【本题答案】 C 44综合光学、流体力学、电子计算机技术，利用荧光素产生荧光的特点，快速灵敏的对单个细胞进行多参数定量测定和分选的技术称 A免疫透视比

14、浊分析 B放射免疫分析 C化学发光免疫分析 D酶免疫分析 E流式细胞免疫分析 【本题答案】 E 45下列情况均可引起误差，属于系统误差的是 A反应温度调高 B试剂的保质期已过 C分析仪器波长不准 D标本量加错 E反应时间记录错误 【本题答案】 C46判断方法学能否接受的误差指标是 A RE<EA B PE<EA C CE<EA D SE<EA E TE<EA 【本题答案】 E 47由权威机构对实验室有能力执行特定任务的正式承认称 A室内质量控制 B室间质量评价 C能力比对分析 D实验室认可 E实验室认证 【本题答案】 D 48诊断试验检出阳性患病者的百分率的指标是

15、 A检测精密度 B检测灵敏度 C检测准确度 D临床敏感度 E临床特异度 【本题答案】 D 49WhiCh formula desCribes the potential Change of the surfaCe 0f ion seleCtive eleCtrodes (ISE) A Von Slyke B Nernst formula C Van I)eemter f0Imla D Hemderson一HassellbalCh formula E Friedewald formula 【Key】 B (二)单项选择题(B型题) (15题共用备选答案) A原子吸收分光光度法 B散射比浊法 C荧

16、光分析法 D电化学分析技术 E电泳技术1微量元素检测常用的技术是 【本题答案】 A2激素检测常用的技术是 【本题答案】 C3蛋白质分离与鉴定常用的技术是 【本题答案】 E4血清钠钾检测常用的技术是 【本题答案】 D5微量蛋白检测常用的技术是 【本题答案】 B (610题共用备选答案) A偶然误差 B比例误差 C恒定误差 D系统误差 E灵敏度6重复性试验检测的是 【本题答案】 A7回收试验检测的是 【本题答案】 B8检测能力试验检测的是 【本题答案】 E9干扰试验检测的是 【本题答案】 C10方法比较试验检测的是 【本题答案】 D (1114题共用备选答案) A决定性方法 B参考方法 C常规方法

17、 D推荐方法 E经典方法 F干扰已知的方法 G文献介绍的方法11用于评价常规方法和试剂盒 【本题答案】 B 12用于发展及评价一级标准品 【本题答案】 A 13用于实验室中的常规检测 【本题答案】 C14用于鉴定二级标准品 【本题答案】 B (1519题共用备选答案) A丽春红S B考马斯亮蓝R250 C溴化乙锭 D伊红 E结晶紫 F SDS G过硫酸铵 H四甲基乙二胺 I冰醋酸一乙醇 J甲叉双丙烯酰胺15制备聚丙烯酰胺凝胶的催化剂 【本题答案】 G16制备聚丙烯酰胺凝胶的加速剂 【本题答案】 H17醋酸纤维素薄膜常用的染料 【本题答案】 A18核酸电泳常用的染料 【本题答案】 C19蛋白质电

18、泳中为消除或减少电荷对蛋白质移动的影响常加入 【本题答案】 F (三)多项选择题(x型题)1按Westgard多规则质控法，质控血清测定值在何种情况下为系统误差 A 12s B 13s C 22s D 4ls E 10X12 临床生物化学和生物化学检验学习与考试指导 【本题答案】 CDE2酶免疫分析的基本技术组成为 A高活性的酶和高质量的酶标抗体 B最佳固相载体和抗体包被技术 C最佳酶作用的底物 D通过电场来精确控制整个分析过程 E检测放大系统及再生技术 【本题答案】 ABCE3下列哪些情况可引起l晦床测定中的系统误差 A样品中存在干扰物 B天平未经校正 C分析仪器波长不准 D标本量加错 E吸

19、管未经校正 【本题答案】 BCE 4流式细胞仪接收并分析的信号主要有 A光散射讯号 B光吸收讯号 C荧光讯号 D电流讯号 E生物发光讯号 【本题答案】 AC 5影响血标本成分变化的主要因素有 A生理 B饮食 C药物 D溶血 E湿度 【本题答案】 ABCD 6二级标准品主要用于 A校正决定性方法 B为次级标准品定值 C评价及校正参考方法 D常规方法的标化 E作为常规检测的校准品 【本题答案】 DE 7常规方法的选择在可靠性方面应具有 A较高的检测精密度 B较大的检测能力 C较低的检测费用 D较快的检测速度 E较好的检测准确度 【本题答案】 ABE8方法比较试验测定的是候选方法的 A偶然误差 B比

20、例误差 C恒定误差 D总误差 E系统误差 【本题答案】 BCE9诊断试验项目所确定的医学决定水平一般包括 A待诊值 B确诊值 C提示预后的界值 D危急值 E参考值上限 【本题答案】 ABCD 10方法的性能标准应根据不同的目的而异，主要决定因素有 A参考值 B参考范围 C医学决定水平 D允许分析误差 E临床特异度 【本题答案】 CD 11理想的诊断试验应具有绝对的 A检测准确度 B检测灵敏度 C检测精密度 D临床敏感度 E I临床特异度 【本题答案】 DE 12特异度高的诊断试验常用于 A拟诊患有某病的概率较大时，以便确诊 B拟诊疾病严重但疗效与预后均不好的疾病，以防误诊 C拟诊疾病严重但疗效

21、好的疾病，以 防漏诊 D拟诊疾病严重且根治方法具较大损害时，急需确诊 E存在多种可能疾病的诊断，可排除某一诊断 【本题答案】 ABD13参考值的确定应着重考虑 A正确选择受检对象 B合理规定参考人群的条件 C保证一定数量的受检人数 D务必保证测定结果的可靠 E以又为参考值，又±3s为参考范围 【本题答案】 ABCD14终点法试剂盒质量评价要求为 A试剂空白的吸光度应低于规定标准 B试剂空白的反应速度时间曲线应平坦，且无明显波动 C反应达到平衡的时间应在读取测定吸光度的时间之前 D反应达到平衡后，吸光度最大并维持不变 E反应速度时问曲线的斜率要大，大而灵敏 【本题答案】 ABCD15连

22、续监测法试剂盒质量评价要求为 A反应速度下降型的试剂空白吸光度应在15左右 B反应速度上升型的试剂空白吸光度越低越好 C试剂空白的酶促反应时间曲线应平坦，吸光度变化应Amin000l D延迟期、线性反应期与设定的实验参数要相符 E酶促反应速度曲线的斜率要小，否则灵敏度下降 【本题答案】 ABCD16均数一标准差(xs)质控图的正常分布规律为 A 95数据落在x±2s内 B没有连续5次结果在x的同一侧 C没有5次结果渐升或渐降 D可出现2次结果在又x±2S外，但应在又±3S内 E允许有一次结果在x±3s外 【本题答案】 ABC17影响光谱分析的主要因素有

23、A化学因素 B主观因素 C光学因素 D试剂因素 E标本因素 【本题答案】 ABC18做好室内质控工作应注意的事项是 A要熟知室内质控的知识 B要有良好的质控血清 C质控血清要随标本一起检测 D质控血清定值方法要可靠，应有参 考实验室作后盾 E每天应将测定结果反映在质控图上 【本题答案】 ABCE19做回收试验应注意的事项是 A吸量要准确 B加入标准液后的浓度最好达到医学决定水平 C加入标准液后的体积应与基础样品的体积相同 D标准液一般须加人高、中、低不同浓度作样品 E标准液的体积一般在20以内 【本题答案】 ABCD20产生电泳的要素有 A电场 B带电粒子 C带电粒子移动的介质 D电泳装置形式

24、 E自动控制系统 【本题答案】 ABC21选择质控血清的原则 A稳定性好，特别是酶活力值在复溶1周内基本保持不变 B小瓶包装 C瓶问差异极小 D分析测试项目应满足需要 E最好用自己定标的血清 【本题答案1 ABCD22Which of the following statement(S)about biochemical tests isare tree A the specificity of the test is equivalent to its falsenegative rate B the sensitivity of a test is the percentage of af

25、fected individuals with positive test results C the accuracy of a test is the ability of the laboratory to achieve the sanle result on a sample in repeat analysis D the nlore tests that are performed on a patient the more likely it is to have at least one result outside the reference E screening for

26、 a disease of high prevalence will require tests of higher specificity than screening for one of lower prevalence 【key】 BD23Regarding the performance characteristic of a laboratory test，the fight one is A prevalence of the disease has no bearing on the predictive Value of a test B sensitivity is the

27、 proportion of patients with the disease who are identified by he test C specificity is the proportion of patients without the disease who are identified by the testD adjustment of the diagnostic cutoffvalue to improve the sensitivity will usually improve specificity as well E ROC(receiver operating

28、 characteristic) curves are ulseful ill the assessment of two or more tests for a given condition 【key】 BCE24Regarding preanalytical factors which influence the clinical chemistry results A treatment with oestrogens will 1cad to raised levels of total thyroxine B treatment with prednisolone yields l

29、ow levels of Cortisol by inmmnoassay C blood stored at 4overnight can lead to increased level of plasma potassium D blood collected in EDTA gives low laboratory results for alkaline phosphatase E heparinized blood removes fibrinogen，thereby reducing interference in protein eleetrophoresis key】 ACD(四

30、)填空题 1亲和层析法是利用目的的一类特殊层析技术和它的_、_【本题答案】 待分离物质，特异性配体2酶促反应时间曲线是以_为纵坐标，_具有特异的亲和力，从而达到分离_为横坐标作图，观察酶促反应和出现、持续和终止的时间，分析有关的性能指标。【本题答案】 吸光度，反应时间，动态期，平衡期 3均相EIA主要通过_同抗体结合形成_的免疫复合物，改变了标记酶的活性，通过催化_反应，测定酶活性变化，即可推算出被测样品中待测的方法。 【本题答案】 酶标抗原，酶标记，底物呈色，抗原含量4流式细胞术是综合光学、流体力学、电子计算机技术，利用_产生荧光的特点，快速灵敏的对_进行多参数_和_的技术。 【本题答案】

31、荧光素，单个细胞，定量测定，分选5实验室认证指_依据程序对实验室工作或服务是否符合规定的要求给予确认，给确认合格者出具_，并由_确保认证及其证书使用的_的有效性。 【本题答案】 认证机构，合格证书，认证体系，法规、协议及程序6室间质量评价是通过_的比对，观察各实验室结果的 _ 、一致性并采取_，使各实验室结果渐趋一致。 【本题答案】 实验室间，准确性，一定措施 7蛋白质微陈列指把制备好的蛋白质样品固定于经_的玻片、硅片等载体上，蛋白质与_结合，同时仍保留蛋白质的 ，可以高效地大规模获取生物体中蛋白质的信息。 【本题答案】 化学修饰，载体表面，物化性质，生物活性 8方法学评价是通过_，测定并评价

32、方法的_与_，测定的都是_。 【本题答案】 实验途径，精密度，准确度，误差 9回收试验即分析方法_加人常规分析样品中的 _的能力。目的是测定_，以衡量候选方法的。 【本题答案】 正确测定，纯分析物，比例系统误差，准确度 10酶电极是_与_交叉结合，生物学与物理学、化学融为一体的技术。 【本题答案】 生物技术，传感技术 (五)名词解释 1电泳 【本题答案】 在电场中，带电粒子向所带电荷相反的电极移动的现象称为电泳(electrophoresis)。按原理可分为移动界面电泳、区带电泳和稳态电泳或称置换电泳三种形式。 2光谱分析 【本题答案】 利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征，

33、来确定其性质、结构或含量的技术，称为光谱分析技术。 3离子交换层析法 【本题答案】 离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相，利用流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。 4电化学分析法 【本题答案】 利用物质的电化学性质，测定化学电池的电位、电流或电量的变化进行分析的方法。有电位法(potential method)、电导法和电容量分析法等多种。 5R0C曲线 【本题答案 诊断指标中以阳性率对假阳性率作图，并将相对的点连接起来所得到的曲线，称为受试者工作曲线(R0C曲线)。 6离心技术 【本题答案】 是根据颗粒在作匀速圆周运动时受到一个外向的离心力的行为而发展

34、起来的一种分离技术。这项技术在临床生物化学中常用来分离化学反应后的沉淀物，和收集生物大分子物质。 7参考值 【本题答案】 指一个地区的健康人群中，规定若干条规格标准，在总体中抽样进行调查测定，求出均值(x)和标准差(s)，通常将又定为参考值，将又x±2s定为参考范围。非正态分布用百分位数表示，只能作为它所代表人群的判断参考。 8临床灵敏度 【本题答案】 临床灵敏度(sensitivity)是指诊断试验检出阳性病人的百分率(TP率)。计算公式为：临床灵敏度=(实际上检测为阳性得病人数÷理论为阳性的病人数)×100。 9条码技术 【本题答案】 条码(bar Code)

35、技术是借助计算机为信息管理系统，提供高效、可靠、低成本自动识别和输人数据、信息的技术。 10医学决定水平 【本题答案】 医学决定水平是临床判断结果具有意义的被分析物浓度，即临床按照不同病情给予不同处理的指标阀值。 11散劓比浊法 【本题答案】 散射比浊法(nephelometzy)是利用光线通过混悬溶液时，由于颗粒的散射使通过的光线减弱，根据光线减弱的程度测定溶液中颗粒的浓度，所以，实际上可将散射浊度测定法看成是比色分析的一种特殊情况。 12决定性方法 【本题答案】 决定性方法(tefinitive method)是指确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不

36、够明确的方法。用于发展及评价参考方法和标准品。 (六)简答题 1何谓Westgard多规则质控中41s规则与10x规则?两者有什么相似之处? 【本题答案】 41s规则：当1份质控血清的测定结果连续4次超过+1s或一ls界限，或2份质控血清的测定结果同时连续2次超过+1s或一1s界限时，为“失控；10x规则：当l份质控血清测定结果连续10次偏于均值一侧时，或2份质控血清的测定结果同时连续5次偏于又一侧时，为“失控”。两者一般都由系统误差所致。 2生物传感技术的原理是什么? 【本题答案】 生物传感技术测定生物化学物质的原理是：待测定物质经扩散作用，进入固定化生物敏感膜层，经分子识别发生生物化学反应

37、，产生的信息被相应的化学或物理换能器转变成可定量和可处理的电信号，再经二次仪表放大并输出，便可经计算系统计算出待测物的浓度。 3临床常规生化实验方法选择的具体要求有哪些? 【本题答案】 国际临床化学联合会(IFCC)提出：临床常规方法应具有实用性和可靠性两方面的性能指标，至于某一项具体分析方法所应具有的性能标准，可由临床化学家根据采用这一试验的目的决定。 (1)实用性一般应具备：微量快速，便于急诊；费用低廉；应用安全。 (2)可靠性一般具有较高的精密度和准确度，以及较大的检测能力。 4诊断试验的选择原则是什么? 【本题答案】 用于诊断的任何试验必须具备灵敏度与特异度二个基本特性，两者缺一不可。

38、理想的诊断试验是具有绝对的敏感性和特异性。但由于生物个体差异和疾病过程的多样性的存在，在许多诊断试验中，有的敏感性高但特异性低；有的特异性高但敏感性低；有的两者都较高，但费用昂贵或对人体有较大损害；有的两者都一般，但简单易行。这就需要根据初步拟诊情况，依照不同试验目的来选择。 5影响电泳的主要因素有哪些?琼脂糖凝胶作固体支持介质的区带电泳有哪些优点? 【本题答案】 在电泳中，电场、带电粒子和促使带电粒子移动的介质是产生电泳的三大要素。因而，影响电泳的主要因素有：颗粒性质、电场强度、溶液性质、PH、离子强度、溶液粘度、电渗焦耳热和筛孔(支持物)等。琼脂糖凝胶作固体支持介质的区带电泳的优点主要有：

39、能产生电荷效应和分子筛效应；几乎不吸附蛋白质，电泳无拖尾现象；蛋白质可自由穿透，阻力小，分离清晰，透明度高。 6何谓临床特异度?临床特异度的诊断试验有哪些用途? 【本题答案】 临床特异度(speCmCity)指诊断试验检查确定未患病者的阴性百分率。计算公式为：临床特异度=(检查结果为阴性的人数÷全部受检的未患本病的人数)×100。临床特异度高的诊断试验，常用于：拟诊患有某病的概率较大时，以便确诊；拟诊疾病严重但疗效与预后均不好的疾病，以防误诊，尽早解除病人的压力；拟诊疾病严重且根治方法是具有较大损害时，需确诊，以免造成病人不必要的损害。 7临床常用的光谱分析类型及其主要影响

40、因素是什么? 【本题答案】 根据光谱谱系的特征不同，可把光谱分析技术分为发射光谱分析、吸收光谱分析和散射光谱分析三大类。在临床生物化学检验中，主要包括：吸收光谱分析法，如可见光及紫外光分光光度法、原子吸收分光光度法；发射光谱分析法，如荧光分析法和火焰光度法；散射光谱分析法，如比浊法。光谱分析的基础是被测物质的浓度与吸光度成正比，导致误差的主要原因有化学因素、主观因素和光学因素等三类。 (七)论述题 1。简述临床生化液体双试剂型试剂盒具的特点。 【本题答案】 液体型试剂的生化试剂组分高度均一、瓶问差异小、测定重复性好和使用方便；它也无需加入任何辅助试剂及蒸馏水，避免了外源性水质对试剂的影响，性能

41、较稳定，测定结果较为准确。但液体单试剂存在抗干扰能力差的缺点，给测定结果带来相当大的分析误差。液体双试剂型试剂盒，增强了抗干扰能力和试剂的稳定性，提高了测定的准确性。 2简述标本溶血对临床生化测定的影响及防止的方法。 【本题答案】 待测物在红细胞内浓度高于血浆时，溶血可使测定结果偏高，有些物质如LD、ACP、AST、K+等在红细胞内的浓度比血浆高22160倍，轻微溶血都对结果影响很大；血红蛋白可干扰胆固醇的酶法测定，抑制胆红素的重氮反应等；溶血也干扰某些光谱分析。因此，应尽量避免溶血。 防止溶血的办法是：抽血器和容器必须干燥洁净，尽量使用一次性抽血器(注射器)；不用或短时间使用止血带；抽血后取

42、下针头再将血液沿容器壁徐徐注入容器内；若用血浆应轻轻倒转容器与抗凝剂混匀，切勿用力振摇。 3试述免疫比浊测定的基本原理与注意事项。 【本题答案】 基本原理是抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应液的浊度亦随之增加，与一系列的标准品对照，即可计算出未知蛋白的含量。临床常用于免疫球蛋白、载脂蛋白及一些同工酶的检测。 注意事项：抗原或抗体量大大过剩，可出现可溶性复合物，造成误差。对单克隆蛋白的测定，这种误差更易出现；是应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩，这个值要预先测定，使仪器的测定范围在低于生理范围到高于正常范围

43、之间；受到血脂的影响，尤其是低稀释时，脂蛋白的小颗粒可形成浊度，造成假性升高。此外，加入聚合剂(或促聚剂)可促进大的免疫复合物的形成速度。 4试述生物芯片的原理与分类。 【本题答案】 生物芯片(bioChip)是通过微加工技术和微电子技术在固格体芯片表面构建的微型生化分析系统。 测定原理是把制备好的生物样品固定于经化学修饰的载体上，样品中的生物分子与载体表面结合，同时又保留其理化性质，在一定条件下，进行芯片上的生物分子反应，并使反应达最佳状态，然后利用芯片专用监测系统对芯片信号进行监测，即可高效、大规模获得生物体中待检测物质的信息。 生物芯片按固定的生物分子及材料不同可分为基因芯片、蛋白质芯片

44、、细胞芯片、组织芯片和芯片实验室等。临床生物化学常用的生物芯片主要为基因芯片(gene arrays)、蛋白质芯片(protein arrays)又称蛋白质微阵列(protein miCroarrays)及芯片实验室(1ab-on-Chip)三大类。 5简述室问质量评价中的胛方案及其判断标准。 【本题答案】 能力对比分析(profiCienCy test，W)是室间质量评价技术方案之一，方法是将未知标本分发给各实验室，并提供可靠的标准，对回报结果进行分析，判断实验室获得正确测定结果的能力。国际CLIA'88的Pro方案规定，临床生物化学项目每年至少进行3次PT调查，每次调查至少包括5个

45、不同的质控样本，frr在一年内，对于任一项至少可得15个测定结果。通过各实验室间持续的比较，作出结果判断。 计算公式为：针对某一项目的得分SCore：Sl=(该项目的可接受结果数÷该项目的总测定次数)×100；对调查的全部项目的得分：s2=(全部项目可接受结果总数÷全部项目总的测定次数)×100。 判断标准：国际CLIA88技术细则规定，s1、S2均应大于80，否则判为不满意且如果sl或S2连续两次或两次以上不满意，即为失败，对于某一个接受结果，不再进行优劣分级。 6试述连续监测法试剂盒的评价要求。 【本题答案】 连续监测法试剂盒评价：试剂空白值是否符合

46、规定，反应速度下降型的试剂空白吸光度应在15左右，反应速度上升型的试剂空白吸光度越低越好，不符合说明书中规定值者不宜使用；试剂空白的酶促反应时问曲线应平坦，吸光度变化gAAmi。0001，若大于此值，表明试剂本身分解变化，会使测定结果产生误差；延迟期、线性反应期与设定的实验参数是否相符，若不相符应予修改；观察酶促反应速度曲线的斜率，通过定值血清，分析试剂盒的灵敏度。当试剂盒中底物浓度不足，辅助酶或指示酶的酶量不足或质量不好、反应条件不是最适条件等情况时，酶促反应速度曲线斜率下降，灵敏度低，测定结果有严重比例误差，这种试剂盒无法纠正，不能使用。 7试述临床实验室全面质量控制的目的及主要内容。 【

47、本题答案】 临床实验室全面质量控制的目的就是检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确可靠。内容主要包括标本分析前、分析中和分析后的三个主要过程的质控。 (1)分析前的质量控制其内容主要为：人员培训；实验室设置；实验仪器的质量保证；检测方法的选择和评价；试剂和校准品的选择和评价；标本准备等。 (2)分析中的质量控制 内容主要包括：建立项目操作程序；室内质控和结果分析。 (3)分析后的质量控制 内容主要有：报告实验结果；室内质控的数据管理；参加室间评质；投诉调查与反馈。 (八)病例分析 病例l：女，65岁，服用了一段时间的噻嗪类利尿药物后，采血测定尿素、钾、钠浓度。护士抽

48、血后将标本遗忘，次日上午发现后才将标本送到检验科。检验科检测结果为：血清尿素118mmolL，K+66mmolL，Na+130mmolL。检验人员立即与医生进行了联系，试分析出现该结果的原因。 【本题答案】 由于实验室不知道标本在送检过程中有延误，根据检测结果分析，表明此患者可能处于尿毒症前期的血Na降低和高K血症。若标本正确，则为典型的Addison病，一种内分泌系统的急诊。实际情况是，没有及时地分离血清，K+、Na+就顺着其浓度梯度发生转移，使所测的血清K、Na浓度结果不可靠，所以需要重新采血以了解患者的电解质平衡状态。 Case 2A 43一yearold obese man whose

49、 plasma total Cholesterol ConCentration was 80 mmolLwas put on lipid lowering drugs；After 6 weeks his plasma total Cholesterol was 73 mmolLThe totalCoeffiCient of variation(CV)for plasma total Cholesterol is 61.Has he shown a statistiCally signifiCant response(P<0.05)to treatment【key 】 The probability that the differenCe between two resuIts is statistiCally signifiCant at a leVelof P<00