氧化还原平衡失衡与颈动脉粥样硬化

1、氧化还原平衡失衡与颈动脉粥样硬化         10-09-06 15:40:00     编辑：studa20                    作者：吴彧 王丽霞 韩跃刚 原芳 卢建敏 【摘要】  目的 探讨氧化还原平衡失衡与颈动脉粥样硬化的关系。方

2、法 高分辨超声技术检测颈动脉内膜厚度，以显示颈动脉粥样硬化的发展程度，并将102例拟诊颈动脉粥样硬化患者分为：颈动脉斑块形成组46例，颈动脉内膜中层增厚组32例，颈动脉内膜中层厚度正常组24例。取静脉血，测血浆还原型谷胱甘肽（GSH）与氧化型谷胱甘肽（GSSG），还原型辅酶（NADPH）与氧型辅酶（NADP+），氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）和丙二醛（MDA）浓度。计算GSH/GSSG，NADPH/NADP+的氧化还原电位。结果 随颈动脉内膜增厚(从IMT正常组组到动脉斑块组)，GSH（mol/L）(IMT正常组：7.39±1.03，IMT增厚组：6.54±0.94，动脉

3、斑块组:5.49±0.86)、GSH/GSSG(IMT正常组:12.12±1.83,IMT增厚组：8.60±1.47，动脉斑块组：7.22±1.18)渐次减低， GSSG（mol/L）（IMT正常组：0.62±0.03，IMT增厚组：0.68±0.04,动脉斑块组：0.77±0.05）、GSH/GSSG氧化还原电位（mV）（IMT正常组：-145.4±3.4，IMT增厚组：-140.2±3.1，动脉斑块组：-136.2±2.3）渐次升高（P0.05），向氧化方向明显偏移；NADPH、NADPH/

4、NADP+氧化还原平衡亦显示出与GSH、GSSG类似但较弱的变化；氧化应激损伤产物oxLDL（g/L）（IMT正常组：557.3±174.8，IMT增厚组：762.9±203.5，动脉斑块组：916.9±237.4）、MDA（mol/L）（IMT正常组：6.27±1.52，IMT增厚组：9.86±1.97，动脉斑块组：12.61±2.33）随颈动脉内膜增厚明显增加（P0.05）。结论 氧化还原平衡失衡、向氧化方向偏移与颈动脉粥样硬化的发生、发展可能有内在联系。 【关键词】  动脉粥样硬化；氧化还原平衡；谷胱甘肽；辅酶；氧化型

5、低密度脂蛋白颈动脉粥样硬化实际上是一种颈动脉内膜慢性炎症性疾病1。在颈动脉粥样硬化发病的诸多危险因子中，如胆固醇异常升高、高血压、糖尿病、吸烟、高同型半胱氨酸血症等，在分子水平的损伤机制中都有氧化应激的参与。氧化应激通过引起脂质过氧化，内皮细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞的氧化损伤进而促进颈动脉粥样硬化的发生发展2。但机体对于氧化应激又有着非常强大的防御、拮抗机制，两者的平衡构成了机体内环境的一个重要稳态机制，被称为氧化还原平衡 3。本研究对拟诊颈动脉粥样硬化患者血浆的氧化还原平衡进行了监测，并同步进行颈部血管超声检查，确定颈动脉内膜厚度及粥样斑块的形成面积，探讨血浆的氧化还原平衡是否与颈动脉内膜的

6、增厚及粥样斑块的形成有相关性。1  资料与方法1.1  对象 所有研究对象为2008年3月至2009年9月在河南省人民医院心内科的住院拟诊颈动脉粥样硬化患者，共102例，男57例，女45例，年龄3982岁，平均（58.6±14.9）岁。排除严重肝、肾疾病，内分泌代谢疾病，结缔组织疾病和肿瘤。患者行颈部血管超声检查，按内膜中层厚度或斑块形成分为三组，颈动脉斑块形成组46例，颈动脉内膜中层厚度（IMT）增厚组32例，IMT正常组24例。1.2 方法采用SONO5500型彩色超声心动图仪，行两侧颈动脉检查，由固定专人测定，探头频率7.5 MHz。患者仰卧位，先

7、从锁骨的内侧端横向扫查颈总动脉，然后将探头沿其行走方向向头侧移位，跨过分叉部，分别检测患者双侧颈总动脉、颈动脉分叉部、颈内动脉起始处、颈外动脉，检查内容包括：IMT，有无斑块形成及斑块形态、大小、范围、软硬度。IMT1.0 mm为正常，1.01.3 mm为IMT增厚，以内膜局限性突出管腔、内膜厚度1.3 mm为颈动脉斑块形成。取研究对象清晨空腹静脉血3 ml，放入预冷肝素（187.5 U/0.3 ml）抗凝管中，试管放在冰水混合物中保存，1 h内低温（4）5 000 r/min,离心3 min，取500 l血浆超低温（-30）保存在不锈钢洁净（EP）管中，备测还原型辅酶（NADPH）和氧化型辅

8、酶（NADP+）。另取750 l血浆加入10%偏磷酸750 l，低温（4）5 000 r/min，离心15 min，取上清液500 l，超低温（-30）保存在EP管中，备测还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）。其余血浆用以测定氧化应激产物：氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）和丙二醛（MDA）。oxLDL用ELISA法测定（试剂盒由上海荣盛生物有限公司提供），MDA用硫代巴比妥法检测（试剂盒由南京建成生物工程研究所提供），所有测定步骤均按说明书严格执行。GSH和GSSG样品的测定均按荧光光度法进行4（试剂盒由南京建成生物工程研究所提供）。GSH/GSSG氧化还原电位的计算按Nernst方程5：Eh=Eo+RT/2F ln(GSSG)/(GSH)2其中，R为气体常数；F为法拉第常数；E0为GSHGSSH的标准电位值，以血液pH7.4时，标准E0为-264 mV。NADPH和NADP+样品的测定也按荧光光度法进行4。NADP+和NADPH氧化还原电位的计算同上均按Nernst方程Eh = Eo+ RT/2F In(NADP+)/(NADPH) 5。1.3  统计学分析 采用SPSS12.0统计分析软件包进行统计分析，计量资料以x±s表示，组间比较采用方差分析，两组比较用q检验。2  结 果2.1