人感染h7n9禽流感标本采集要求课件

1、 人感染人感染H7N9禽流感病毒的病原学禽流感病毒的病原学 人感染人感染H7N9禽流感监测病例定义禽流感监测病例定义 标本采集种类标本采集种类 标本采集主要器材和试剂标本采集主要器材和试剂 标本采集方法标本采集方法 标本的保存、运送标本的保存、运送 标本采集要求标本采集要求 禽流感病毒属正粘病毒科甲型流感病毒属。禽甲型流感病毒颗粒呈多形性，其中球形直径80120nm，有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。 依据其外膜血凝素（H）和神经氨酸酶（N）蛋白抗原性不同，目前可分为16个H亚型（H1H16）和9个N亚型（N1N9）。 禽甲型流感病毒除感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。可感

2、染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3。 此次报道的为全球首次发现人感染H7N9禽流感病毒。该病毒为H7N9和H9N2重配的新型病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒，基因序列分析表明为禽源病毒。 同时具备以下4项条件1、发热(腋下体温38)；2、具有肺炎的影像学特征；3、发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少；4、不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。 除第除第4条不同于不明原因肺炎病例定义，以上三条均相符。条不同于不明原因肺炎病例定义，以上三条均相符。不不明原因肺炎第明原因肺炎第4 条为：经规范抗菌药物治疗条为：经规范抗菌药物治疗35

3、天，病情无天，病情无明显改善或呈进行性加重。明显改善或呈进行性加重。 医疗机构应当及时采集病例相关临床样本。1、上呼吸道标本上呼吸道标本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）；2、下呼吸道标本下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）3、血清标本血清标本（发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复期血清）；4、尸检标本尸检标本（如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体解剖，采集肺组织、气管、支气管等组织标本）；5、应当尽量采集病例发病早期发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）。”发烧72小时标本” 1、拭子：WHO及美国CDC规定，鼻烟拭子采集只能用塑料杆的涤

4、纶或人造棉拭子（如常用的聚酯纤维拭子），不能用藻酸钙拭子或木杆拭子，因可能使某些病毒失活或抑制PCR；脱脂棉含有荧光物质，影响实时应荧光定量PCR结果。 2、压舌板 3、3ml Hanks液螺口采样管 4、封口袋 5、冷藏运输包 6、油性标记笔或标签纸 7、样品登记表 8、真空采血管 9、个人防护装备 鼻咽拭子采样是流感病原学监测中的一个重要环节,操作简单,但在流感监测工作中却极为重要。标本采集的时间、位置及质量对能否分离到病毒或提取到有活性的RNA至关重要，而标本保存与运输不当，也会影响病毒的分离。为提高病毒的分离率，在用于病毒分离样品的采集数量、类型和地点方面，实验室技术人员应与流行病学人

5、员达成共识。一般来说，用于病毒分离的样品应与血样同时采集，以便进行血清学诊断。 1 鼻拭子 采集标本时，嘱咐病人头部尽量保持不动，将聚酯纤维头拭子轻轻转动缓缓插入病人鼻孔至颚部(注意：不可太用力，但要尽量深，通常5cm以上)，停留数秒吸取分泌物，轻轻旋转取出拭子，置采样管折断手接触部位的塑料柄，使拭子浸泡至采样液中，旋紧管盖。 2 咽拭子 嘱咐病人放松，发“啊”声， 立即用压舌板压住病人舌前23，聚酯纤维头拭子适度用力多次抹擦悬雍垂（腭垂或小舌，见图）后部咽后壁及双侧扁桃体，避免触及舌部，取出后置采样管，折断手接触部位的塑料柄，使拭子浸泡至采样液中，旋紧管盖。 3、切记：、切记：咽拭子与鼻拭子

6、采到一个咽拭子与鼻拭子采到一个Hanks管（管（23ml ）。如商品化采样管液）。如商品化采样管液体过多，采样前倒掉一部分，以提高病毒体过多，采样前倒掉一部分，以提高病毒浓度及阳性率。聚丙烯拭子采样前不需用浓度及阳性率。聚丙烯拭子采样前不需用生理盐水湿润，以吸收更多的分泌物。生理盐水湿润，以吸收更多的分泌物。 4、漱口液标本：在病人发热72小时内尽早采集。先让病人咳嗽几声，将5-10ml无菌生理盐水（不含青霉素）倒入病人口中，让病人头向后倾并发出“噢”的声音，反复几次。将漱口液吐入50ml带垫圈的螺口塑料离心管中，旋紧管盖。 5、尸检组织标本：病人死亡后应尽早进行解剖，采集肺、气管、肾、脾、肝

7、、心脏、脑、血凝块等组织和淋巴结等重要器官标本。每一采集部位分别使用不同消毒器械；每种组织应多部位取材，每部位应取2050g，淋巴结2个，分别置于50ml带垫圈的无菌螺口塑料管中，立即置于-70以下保存或冷藏（48）送至有关实验室。尸检组织标本对于病原学研究非常重要，应尽量多采集。 标识标识：油性记号笔或标签纸在采样管上标记标本名称、姓名、编号等； 包装包装：符合符合“生物安全相关规定生物安全相关规定” 所采集的标本首先用封口袋密封，周围最好包裹吸水缓冲材料，用第二个封口袋再次密封，放入带冰排的标本运输箱； 填写填写“不明原因肺炎病例/聚集性病例标本送检表”，送检表用另一个封口袋密封，不要与标本放到一起； 于24 小时内送当地国家流感监测网络实验室检测，最迟不超过48小时，如果有-70冰箱，可长期保存。 无菌操作：采样人员须以无菌操作采集各类标本。采集标本所使用的容器、采样液等均应无菌。 标识：每份标本必须标明标本编号、标本种类及采集日期。采集单位应指定专人负责标本信息的登记、收集和管理，详细记录信息，并认真填写“不明原因肺炎病例/聚集性病例标本送检表”。不明原因肺炎病例标本送检表.doc 所有标本的收集、运输和保藏都应装在有螺旋盖的塑料管中，以防止开、关标