六味地黄汤对雌性致衰模型小鼠生殖器官影响的实验研究

1、六味地黄汤对雌性致衰模型小鼠生殖器官影响的实验研究<    【关键词】   六味地黄汤； 卵巢早衰Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Liuw Ei Dihuang Tang on causing senility to ovaria of mice. MethodsTo establish senility model through subcutaneous injection of D-galactogen into the neck and back of mice, which

2、 were subsequently treated with Liuw EI Dihuang Tang and ethylene cyclohexne. Meanwhile, to observe the effects of Liuwei Dihuang Tang on the content of -endorphin, sero-estrogen and progestogen, and on ovaria and uterine histomorphology. ResultsLiuwei Dihuang Tang could improve the content of -endo

3、rphin, increase the cornified and epithelial cell and epidermal cell in the vaginal exfoliated cell smear of mice. ConclusionLiuwei Dihuang Tang serves the same function as estrogen, which restores the normal functioning of ovaria by regulating the workings of subthalamus-hypophysis-ovarian axis.Key

4、 words：Liuwei Dihuang Tang;   POF    六味地黄汤（LW）是中医滋补肾阴的代表方剂。由熟地、山茱萸、山药、茯苓、泽泻、牡丹皮6味药组成,其特点是长于三阴(肝脾肾)并补而以补肾为主的方剂。长期 临床 观察此方有抗衰老功能，但从未看到抗衰老实验室对小鼠生殖器官细胞、形态结构研究的报道。本研究通过把六味地黄汤用于实验小鼠活体内对卵巢、子宫 组织 细胞、形态结构观察，从而为六味地黄汤对卵巢早衰分子生物学研究提供较可靠的实验依据。    卵巢早衰(premature ovarian fail

5、ure, POF)是指卵巢功能提前衰退，表现为妇女40岁之前非生理性的月经停止，伴有潮热、原发及继发不孕、全身和生殖器萎缩，卵泡刺激素(follicular stimulating homone,FSH)升高(FSH>40IU/L)及E2下降。目前病理机制不甚清楚，而建立POF动物模型对其病因的基础研究以及指导临床的诊断和治疗有重要意义。由于半乳糖血症患者常表现为原发性闭经或卵巢早衰，且有报道动物体内的半乳糖增多可引起类似与卵巢早衰的改变，故本课题组采用D -半乳糖建立小鼠卵巢早衰动物模型1，通过观察LW对小鼠下丘脑垂体卵巢轴（HPO）的调节作用及对小鼠生殖器官形态学影响，探讨LW对PO

6、F的治疗机制，指导临床诊断和治疗。 1  材料与仪器 1.1   动物 雌性昆明种小鼠60只，812周龄，体质量25 30 g，由河南省南阳医专实验动物中心提供。饲养 环境 安静，温度2535，相对湿度为5060，自由进食、水。1.2 药品与试剂六味地黄汤草药药材购于河南省南阳市医药公司，由南阳 医学 高等专 科学 校药理教研室按比例组方 ，经煎制、过滤、浓缩为1 g/ml (以生药汁) 六味地黄汤口服液，高压灭菌，O冰箱保存备用。D - 半乳糖为上海恒信制药厂产品，批号为20010218。 用灭菌生理盐水配制成50 g/L,0冰箱保存备用。乙烯雌酚由上

7、海衡山药业有限公司生产，批号为000201。雌二醇（E2）放射免疫药盒购自天津德普公司；孕醇（P）放射免疫药盒购自 中国 医学科学院和医学技术中心；-内啡肽（-EP）放射免疫药盒购自海军放免技术中心。其他制剂均为国产分析纯。1.3 仪器和设备 (2/2)VI普通类B型脱水机，孝感宏业TS-12L；日本原装进口（1/2）JVCTK-C921EC显微镜摄像机；日本原装进口OLYMPUSCX31显微镜；德国原装进口mICROMGMBH Hm200切片机；CS摊片机。 电子 体温计，DT一ITB型;电子天平，JD2000 - 2 ;Y计数器，GAMMA -C120。 2 方法 2.1  衰老动物模型的建立 采用D-半乳糖亚急性衰老模型建立法。D -半乳糖按每只小鼠经背部皮下注射D - 半乳糖0.3 ml/（kg·d），注射42 d。2.2 实验分组  将60只小鼠随机分成正常对照组（A）、衰老模型组(B)、六味地黄汤治疗1组(C)，六味地黄汤治疗2组(D)，乙烯雌酚组(E)，每组12只。A组、B组各鼠每天灌胃生理盐水20 g·kg-1，同时B组，C组，D组，E组各鼠每天经背部皮下注射D-半乳糖0.3 ml·kg-1，连续给药42 d。从11天开始，C组，D组分别灌服六味地黄汤（原汁1 g/ml浓度）2