高中生物二轮复习基因工程及克隆技术基础自修课

1、高中生物二轮复习基因工程及克隆技术基础自修课“基因工程与克隆技术基因工程与克隆技术”课前诊断课前诊断卷卷点击链接点击链接限制酶限制酶DNA 连接酶连接酶载体载体作用作用切割切割_和载体和载体拼接拼接DNA 片段，片段，形成形成_携带目的基因携带目的基因进入进入_作用作用部位部位两个核苷酸之间的两个核苷酸之间的_限制酶限制酶DNA 连接酶连接酶载体载体作用作用特点特点(条件条件)识别双链识别双链DNA 分子的分子的某种某种_在特定位点在特定位点上切割上切割Ecoli DNA 连接酶只能连连接酶只能连接接_T4 DNA 连接连接酶能连接酶能连接_和平末端和平末端能在宿主细胞能在宿主细胞内稳定存在并

2、大内稳定存在并大量复制量复制有多个有多个_具有特殊的具有特殊的_常用常用类型类型EcoR 限制限制酶酶 Sma 限限制酶制酶Ecoli DNA 连连接酶、接酶、T4 DNA 连接酶连接酶质粒、质粒、噬菌体噬菌体的衍生物、动植的衍生物、动植物病毒等物病毒等方法方法具体操作具体操作直接分离直接分离从自然界已有的物种中分离，如从从自然界已有的物种中分离，如从_中获取中获取人人工工合合成成化学合成化学合成已知核苷酸序列的已知核苷酸序列的_，直接利用，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板合成仪用化学方法合成，不需要模板逆转录法逆转录法 以以RNA为模板，在为模板，在_作用下人工合成作用下人工合

3、成PCR技术技术扩增扩增目的基因目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在与单链相应互补序列结合，然后在_作用下延伸作用下延伸植物细胞植物细胞动物细胞动物细胞微生物细胞微生物细胞常用常用方法方法_法、法、基因枪法、基因枪法、_法法_技术技术_法法(用用Ca2处理处理)受体受体细胞细胞受精卵、体细胞受精卵、体细胞_原核细胞原核细胞项目项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养取材取材植物植物_或出生不久的幼龄或出生不久的幼龄动物的动物的_项目项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养过程过程项目项目植物组织培养植物组织培养

4、动物细胞培养动物细胞培养结果结果获得植株个体，可以体获得植株个体，可以体现现_新的细胞，不新的细胞，不_，不体现全能性不体现全能性条件条件无菌无菌营养营养适宜条件适宜条件无菌、无毒无菌、无毒营养，营养，_等等温度和温度和pH气体环境：气体环境：_应用应用植株快速繁殖植株快速繁殖脱毒植株的培养脱毒植株的培养人工种子人工种子生产药物、杀虫剂等生产药物、杀虫剂等转基因植物的培育转基因植物的培育蛋白质生物制品的生产蛋白质生物制品的生产皮肤移植材料的培育皮肤移植材料的培育检测有毒物质检测有毒物质生理、病理、药理学的生理、病理、药理学的研究研究项目项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理 细胞膜的细胞膜的_、细胞的、细胞的_细胞膜的细胞膜的_过程过程项目项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合相关酶相关酶纤维素酶和纤维素酶和_或胶原蛋白酶或胶原蛋白酶融合方融合方法法物理法：离心、电激、物理法：离心、电激、振动；振动；化学法：聚乙二醇等试化学法：聚乙二醇等试剂诱导剂诱导除物理法和化学法外还除物理法和化学法外还可以用可以用_诱导诱导结果结果杂种植株杂种植株杂交细胞杂交细胞 意义意义克