A族链球菌M蛋白相关疫苗的研究进展.docx

1、者血清常呈乳状，基础血TG值11.30mmoI/L是最为重要的特征。妊娠晚期合并高脂血症性胰腺炎的预后与母儿并发症密切相关，临床护理不当极易引起胰腺炎进展，导致子宫内压增加甚至继发感染，严重威胁母亲和婴儿的健康。常规护理干预在护理管理措施的制定、临床患者的病情动态监控以及护理态度等各方面均有一定的间隙，相比较而言，综合护理干预具有一定的个性化和系统化，能在一定程度上弥补相关常规护理间隙，加强妊娠期营养补给，保证胎儿健康，从而提高护理质量10-,2综合护理干预从医护人员分配与管理、术前基础护理、术中检查护理、术后心理护理、饮食护理等多方面入手，针对患者病情及其自身状况，采取合理护理方案，有效降低

2、患者血清TG值，保护孕妇和胎儿，效果突出。本研究结果提示，采用综合护理干预的患者，其术后合并妊娠高血压性心脏病、肾衰竭、妊娠期高血压疾病的发生率(3.51%、1.75%.5.26%)均较对照组低(31.59%、35.09%、33.33%),且试验组患者治疗后对医护人员护理工作中交接时间是否准时、设备转运是否得当、生命体征监控是否准确、护理态度是否友善、护理措施是否个性化及人性化的满意度均优于对照组。综上所述，妊娠晚期合并高脂血症性胰腺炎患者的护理工作对于保证患者和胎儿的预后及发育至关重要，综合护理干预能从多方面多角度针对患者病情予以护理干预，有效降低患者血清TG值.减少并发症的发生，在一定程度

3、上提高了患者的生活质量。.参考文献1迟心左.妊娠合并高脂血症性重症急性腰腺炎J/CD.中华临床医师杂志：电子版,2012,6(1):147-149.2李萍，瞥保利，盛晓英，等.妊娠合并急性胰腺炎30例的中西医结合治疗J.中国中西医结合外科杂志.2013,19(3)：289-290.3郑永科.刘长文.妊娠合并高脂血症性急性胰腺炎的研究J.全科医学临床与教育,2013,11(3):285-287.4李璘倩，黎贵湘.程桂兰.妊娠合并急性映藻炎的护理进展J.护理与康复,2012,11(6),517-519.5孟沽.妊娠合并急性腴腺炎崽者的循证护理J.河北医药，2012,34(17):27102712.

4、6菅志远，沈先锋.周平.等.晚期妊娠合并急性腴腺炎18例诊治分析J.中国现代普通外科进2012,15(7),576-577.585.7李艳.周莹，郭旭日,等.妊娠合并急性胰腺炎的临床合理用药J.中国药业，2012,21(8)：9596.8毕旭东.减少误诊、重视妊娠期急性胰腺炎的诊断和治疗J.中国现代医学杂志，2012,22(14),6568.C9韩红梅，朴熙绪.妊娠合并高脱血症性胰腺炎治疗进展J.世界华人消化杂志.2011,19(35),3623-3628.10朱玲莉，黎贵湘，李成倩，等.1例双胎妊娠合并高脂血症性急性胰腺炎，患者的护理J.护理实践与研究.2013,10(3),155-156.

5、11胡弓I，张意，董玉华.等.妊娠合并急腹症的临床特点与护理J.护理与康复.2009,8(5),402-404.12焦凤彩，朱磊.王淑珍.妊娠晚期高脂性重症胰腺炎的临床护理及饮食指导J.中国病案，2009,10(6)：4748.(本文编辑：许卓文).综述.A族链球M蛋白相关疫苗的研究进展袁婷，关晓菲(综述)，马翠卿.(审校)(河北医科大学基础医学院免疫学教研室，河北省重大疾病免疫机制及干预重点实验室，河北石家庄050017)关健伺酿脓链球菌；疫苗；综述文献doi：10.3969/j.issn.l007-3205.2015.01.041中图分类号R378.12文献标志码A收稿日期2014-05-

6、15,修回日期2014-07-11基金项目国家自然科学基金资助项目(30901350).河北省自然基金资助项目(H2O122O6O76)作者简介袁婷1988-),女，河北廊坊人，河北医科大学基础医学院医学硕土研究生，从事感染免疫研究.通讯作者.E-mail：macuiqing文章细号1007-3205(2015)01-0103-05A族链球菌(groupAstreptococcus,GAS)也称化脓性链球菌，是最常见的也是致病性最强的革兰阳性菌之一，其可以引起多种感染性疾病如扁桃体炎、急性咽炎、喉炎、风湿热、猩红热及严重的毒性休克综合征。值得关注的是GAS感染后还可以导致严重的变态反应性疾病如

7、风湿性心脏病、急性肾小球肾炎等。国内外从来没有停止过对GAS疫苗的研究，主要聚焦于免疫原性强的M蛋白，现就以M蛋白为基础的疫苗研究进展综述如下。1 GAS的流行病学GAS广泛存在于自然界、健康人的咽喉部以及人和动物的粪便中.通过空气、皮肤接触等方式传播。据世界卫生组织报道，全球每年约有517000例患者死于链球菌感染所致的各种疾病，其中约30%死于链球菌的侵袭性感染，近70%死于链球菌感染后所致的风湿热、风湿性心脏病、急性肾小球肾炎等疾病。我国广东省、吉林省、浙江省、湖北省及重庆市学龄儿童GAS年平均感染率为50%,部分农村地区GAS感染率高达70%80%,GAS上呼吸道感染导致的风湿性心脏病

8、在5个省市儿童中平均发病率达22/10万目前，治疗GAS感染的主要措施为应用抗生素如青霉素、大环内脂类药物，或静脉注射免疫球蛋白。虽然没有报道显示GAS对青霉素有耐药性,但相关研究证实青霉素在GAS咽炎的治疗中失败率达20%40%。而对大环内酯类敏感的GAS会利用生物膜形成隔离，成为逃避抗生素治疗的机制从而在宿主体内残留。严重的GAS侵袭性感染，如链球萌毒性休克综合征和坏死性筋膜炎，静脉内注射免疫球蛋白以促进调理吞噬作为辅助治疗手段，收到一定的疗效,但免疫球蛋白的弊端是只能提供短期保护。就日前形势来看，GAS感染已成为临床治疗中的棘手问题。所以，对于GAS的有效防治，除了控制传染源外，应用疫苗

9、成为最有效的措施。2 GAS疫苗中有效成分的选择关于GAS疫苗的研究是基于链球菌的各种蛋白及成分，如M蛋白、C5a肽酶、外毒素B、A族碳水化合物、链球曲纤连蛋白结合蛋白1(streptococcalfibronectinbindingproteinl,Sfbl)、血清不透明因子(serumopacityfactor,SOF)和纤连蛋白结合蛋白54(fibronectinbindingprotein54,FBP54)等构建并制备的亚单位疫苗，但因各种原因，迄今为止仍然没有安全有效的GAS疫苗供人类使用最近-个时期，对GAS疫苗的研制进入了新时代。通过计算机辅助,利用反向疫苗学、蛋白质组学、生物信

10、息学、全基因测序和DNA微阵列等先进技术，能快速发现并推断毒力因子、表面相关蛋白和可能的候选疫苗。但GAS疫苗的发展仍然面临着挑战性。导致这一现象的原因可归结为3个：GAS的血清型众多，而它们之间又很少存在交叉，很难制备针对所有流行菌株的疫苗；缺乏合适有效的动物模型加以评价也是限制疫苗发展的原因之一;在GAS疫苗应用中，最大的障碍是GAS某些免疫原性强的表面蛋白如M蛋白，与人体组织蛋白存在交叉反应，使得疫苗的应用面临着诱发自身免疫病的风险。20世纪60年代末期，在使用天然的M蛋白制备疫苗试验中发现，接种疫苗组较对照组儿童风湿热的发病率明显增加。但是，其他GAS蛋白亚单位疫苗所诱发的免疫应答及预

11、防作用都不及M蛋白，故到目前为止，M蛋白依然是GAS亚单位疫苗研究的重要的备选蛋白，但显然对于GAS疫苗的研究策略有待改善。M蛋白是GAS所有血清型都表达的一个重要致病因子。它是GAS细胞壁的蛋白抗原成分，以二聚体形式存在，由2条多肽链复合成一条a-螺旋卷曲固定在细胞表面，每条多肽链包含多达4个重复区域(记为AD)。C-端为高度保守区，N-端通常是由一个高变区A区和一个半可变区B区构成(图Do图1M蛋白结构示意图M蛋白是GAS抗吞噬作用的主要决定因素。基于M蛋白高变区的抗原特异性(Lancefield血清学分类法)，已经确定的M蛋白血清型至少有150种。M蛋白不同区段的抗原异质性使其呈现出不同

12、的功能，M蛋白的N端高变区可结合H因子、H因子样蛋白和C4bp结构，C-端保守区也可结合H因子，这些因子均是经典补体途径的调节因子，有助于抗吞噬作用，故GAS通过M蛋白结合补体调节蛋白以干扰补体介导的调理吞噬作用。另外，M蛋白的许多血清型的B区都可结合纤维蛋白原，同样有助于抗吞噬作用。4M蛋白相关疫苗由于M蛋白有较好的免疫原性和免疫保护性,可刺激机体产生保护性抗体.成为了疫苗研究的重点。M蛋白的抗原决定簇与人体多种组织抗原存在交叉性，包括心脏、骨骼肌球蛋白、原肌球蛋白、层黏连蛋白和角蛋白等。研究发现，M蛋白的调理表位与自身免疫性表位是分隔开的，大多数组织的交叉性表位被定位在B区、A-B侧翼区或

13、B-C侧翼区，而在A区和C区中存在着与人体组织交叉反应同时又可以诱导机体产生调理性抗体的表位。据此，利用基因重组技术，M蛋白相关疫苗的研究有3个策略，以多种血清型M蛋白N-端可变区片段为基础制备多价多肽疫苗；以M蛋白C-端保守区保护性表位为基础制备多价多肽疫苗；M蛋白融合其他蛋白的多肽疫苗。4.1基于M蛋白N-端的相关疫苗M蛋白N-端可变区具有能够激发产生最大杀菌活性抗体的表位，并且几乎没有与人体组织蛋白发生交叉反应的表位，所以对于该种疫苗的研究备受追捧。Kotloff等成功重组构建了含有M24、M1、M3、M5、M6和M19蛋白血清型N-端片段的基因序列，该疫苗的动物实验显示，免疫血清中含有

14、相应GAS血清型的调理性抗体，表明该抗体在大多情况下是针对M蛋白保护性抗原表位所产生的。该种疫苗的I期试验结果显示6价M蛋白血清型片段所诱导的抗体滴度显著增加，同时未检测到该抗体与人体组织存在交叉反应。在此基础上，由美国IDBiomedicalCorporation公司研制出了26价多肽疫苗网，采用明矶佐剂免疫家兔，可产生特异性血清IgG抗体，在临床I期试验中观察到该疫苗具有良好的免疫原性及显示出良好的安全性。美国2000-2004年5400例GAS侵袭性感染病例中，分离出的79%的血清型与该26价疫苗一致3),提示该疫苗所包含的表位广泛分布于该地区流行的链球菌菌株表面，揭示了该疫苗具有应用于

15、该地区临床的可能性。近日.Dale等方基于北美和欧洲时下流行的GAS血清型成功制备出30价疫苗，用此疫苗免疫家兔可得到能调理该30种血清型的抗血清。然而该疫苗的30种血清型仅能覆盖马里和南非GAS感染血清型中的40%和59%。由此可见，该种疫苗制备方法也存在弊端，M蛋白血清型众多，不可能构建一种疫苗可包含所有血清型，这就要求根据某一地区、某一时段GAS的流行趋势选取相应血清型设计疫苗，而该种疫苗只能对当地GAS感染有效，而且一旦流行菌株发生变化或出现新的菌株则保护效果大大降低。4.2基于M蛋白C端的相关疫苗到目前为止，已经有争种方法针对M蛋白C端保守区保护性表位制备相关GAS疫苗。第1种方法是

16、合成了4个涵盖M6蛋白C-端重复区的重叠肽。使用该多肽滴鼻免疫SwissCD1小鼠后，再用同源M6和异源M14GAS分离株分别鼻内攻击小鼠妇，结果显示GAS咽部定植均显著减少。第2种方法是合成了M5蛋白C-端重复区的2种多肽。通过动物实验的主动免疫和被动免疫发现口分，针对M5多肽的血清IgG水平升高，但却无法在体外诱导调理吞噬作用。第3种方法是通过识别M5蛋白C-端重复区内的T、B细胞表位，构建了长度为55个氨基酸的序列(StreptlnCor)c对BALB/c小鼠皮下接种，StrepiInCor和完全弗氏佐剂/不完全弗氏佐剂共同给予，结果发现可以诱导高滴度的血清IgGc，60第4种方法是从M

17、5蛋白C-端筛选出一段20个氨基酸的多肽(P145),并通过实验衍生出2个序列，即含有M蛋白保守的B细胞表位及不与人体发生交叉反应的T细胞表位，分别命名为J8和J14。研究证明，J8和J14可以诱导小鼠血清特异性IgG和IgACl73水平增高。第5种方法是基于M蛋白C-端重复区序列制备活疫苗。首先对CD1小鼠鼻内免疫接种表达M6蛋白C-端重复序列的牛痘病毒，再进行同源M6和异源M14GAS分离株的鼻内攻击，结果显示可显著减少GAS咽部定植。乳酸乳球菌是一种肠道共生菌群，也被用来作为活疫苗的载体，携带M6蛋白C-端重复区编码的基因序列.对CD1小鼠行鼻内免疫接种该活疫苗后，导致唾液IgA和血清I

18、gG水平增高吧4.3M蛋白融合其他蛋白的多肽疫苗FbaA(anFn-bindingproteinexpressedonthesurfaceofGAS)是2001年发现的GAS表面的一种相关蛋白，具有较好的免疫原性，可诱发与M蛋白相当的保护性免疫应答，且FbaA蛋白在不同的GAS血清型中有很高的同源性。将纯化的FbaA蛋白和M蛋白分别皮下免疫小鼠，2组的血清IgG水平相似且FbaA免疫组的保护效果仅次于M蛋白免疫组，差异无统计学意义r,9-201o近期该课题组利用喉菌体肽库及单克隆抗体技术筛选出7个FbaA优势表位，通过PCR技术将该表位同中国南方地区流行的4个GAS血清型的M蛋白相融合，构建出

19、含有7个FbaA优势表位和5个M蛋白片段的GAS疫苗(F7M5)。其中包括的5个M蛋白片段分别来自M1、M3、M6、M18的N端和C端的共同保守序列J14,将此多肽疫苗免疫小鼠，结果显示小鼠血清IgG水平相较单纯应用上述5个血清型的多肽疫苗显著升高。攻毒试验显示F7M5蛋白免疫组的保护率明显高于其他对照组。表明该种融合疫苗诱导了较高的抗体水平和较好的保护率:。5展望在过去的几十年里，对GAS疫苗的研究取得了很大进展，研究者除了研究以M蛋白为基础的疫苗外，还把目光投到其他可能蛋白上，如C5a肽酶、精氨酸脱亚胺酶5、链球菌分泌酯酶可、链球菌血红素蛋白受体羽等，但目前仍没有安全有效的商用疫苗问世。总

20、之，GAS疫苗研制中的一些影响因素需要综合考虑，包括GAS血清型的地理分布差异、该抗原包含自身免疫表位的可能性、人类疫苗佐剂的选择、设计合理有效的实验动物模型等。就我国GAS疫苗研究领域而言，GAS相关流行病学资料的不足也是影响疫苗研发制备的因素。参考文献1?BisnoAL.RubioFA.ClearyPP.etal.ProspectsforagroupAstreptococcalvaccine：rationale*feasibility,andobstaclesreportofaNationalInstituteofAllergyandInfectiousDiseasesWorkshopJ.

21、ClinInfectDis,2005,41(8)111501156.2 饶栩翔.黄震东，岑润超,等.我国风湿性心脏病的流行现状J.中华心血管病杂志,1998,26(2),98-100.3 PichicheroMECaseyJR.SystematicreviewoffactorscontributingtopenicillintreatmentfailureinStreptococcuspyogenespharyngitisfj.OtolaryngolHeadNeckSurg,2007(137(6):851-857.4 BaldassarriL.CretiR,RecchiaS,ctal.Ther

22、apeuticfailuresofantibioticsusedtotreatmacrolidesusceptibleStreptococcuspyogenesinfectionsmaybeduetobiofilmformationJ.JClinMicrobiol,2006,44(8)：2721一2727.5 CourtneyHS.HastyDI.DaleJB.Serumopacityfactor(SOF)ofStreptococcuspyogenesevokesantibodiesthatopsonizehomologousandheterologousSOF-positiveserotyp

23、esofgroupAstreptococciJ.InfectImmun200371(1)150975103.6jMcarthurJ,MedinaE*MuellerA,etal.Intranasaivaccinationwiththestreptococcalfibronectinbindingprotein1SfblfailstopreventgrowthanddisseminationofStreptococcuspyogenesinamurineskininfectionmodelJ.InfectImmun.2004,72(12).7342-7345.7 MassellBF,Honikma

24、nLH,AmezcuaJ.Rheumaticfeverfollowingstreptococcalvaccination.ReportofthreecasesJ.JAMA,1969,207(6)：11151119.8 CunninghamMW.Autoimmunityandmolecularmimicryinthepathogenesisofpost-streptococcalheartdiseaseJ.FrontBiosci,2003,8,533-543.9 SamanidouVF.NikaMK.PapadoyannisIN.HPLCasatoolinmedicinalchemistryfo

25、rthemonitoringoftricyclicnntidcprcManti*inbiofluidsHMiniRevMedChem,2008.8(3),256-275.10 KotloffKL,CorrettiMPalmerKetal.SafetyandimmunogenicityofarecombinantmultivalentgroupAstreptococcalvaccineinhealthyadults.PhaseItrialJ.JAMA,2004.292(6),709-715.11 McneilSA,HnlpcrinSA.LangleyJM,etal.Safetyandimmuno

26、genicityof26-valentgroupastreptococcusvaccineinhealthyadultvolunteersJ.ClinInfectDis*200541(8)：1114-1122.123OLoughlinRERobersonA.CieslakPR.ctal.TheepidemiologyofinvasivegroupAstreptococcalinfectionandpotentialvaccineimplications：UnitedStates.20002004J.CiinInfectDis,2007,45(7),853-862.13 DaleJB,Penfo

27、undTA,ChiangEY,etal.New30-valentMprotein-basedvaccineevokescross-opsonicantibodiesagainstnon-vaccineserotypesofgroupAstreptococciJ,Vaccine,2011,29(46),8175-8178.14：BessenD.FischettiVA.Influenceofintranasa)immunizationwithsyntheticpeptidescorrespondingtoconservedepitopesofMproteinonmucosalcolonizatio

28、nbygroupAstreptococciJ.InfectImmun.1988,56(10),2666-2672.15 BronzeMSCourtneyHSDaleJB.EpitopesofgroupAstreptococcalMproteinthatevokecross-protectivelocalimmuneresponsesJ.JImmunol,1992,148(3)：888893.16 GuilhermeLPostolE.FreschiDeBarrosSetal.AvaccineagainstS.pyogenesidesignandexperimentalimmuneresponse

29、J.Methods,2009,49(4)s316321.17 BatsloffMR.HartasJ.ZengW,etal.Intranasalvaccinationwithalipopeptidecontainingaconformationallyconstrainedconservedminimalpeptide,auniversalTcellepitope,andaself-adjuvantinglipidprotectsmicefromgroupAstreptococcuschallengeandreducesthroatcolonizationJ.JInfectDis12006194

30、(3)1325330.18 MannamP,JonesKF,GellerBL.Mucosalvaccinemadefromlive,recombinantLactococcuslactisprotectsmiceagainstpharyngealinfectionwithStreptococcuspyogenesJJ.InfectImmun,2004,72(6)：34443450.19 MaCQ.LiCh*WangXR,etal.SimilarAbilityofFbaAwithMProteintoelicitprotectiveimmunityagainstgroupastreptococcu

31、schallengeinmiceJ.CellMolImmunol.2009,6(1),73-77.20 李彩虹，马翠卿.王的，等.A族链球菌表面新发现蛋白Fba核表达质粒的构建及其诱导的免疫应答J.中国免疫学杂志,2007.23(9)：835838.21MaCLiuZ.LiW,ctal.EbaA-andMprotein-basedmultiepitopevaccineelicitsstrongprotectiveimmuneresponsesagainstgroupAstreptococcusinmousemode!J.MicrobesInfect.2014.16(5).409-418.22

32、ParkHS,ClearyPP.ActiveandpassiveintranasalimmunizationswithstreptococcalsurfaceproteinC5apeptidase,preventinfectionofmurinenasalmucosa-associatedlymphoidtissue,afunctionalhomologueofhumantonsils。.InfectImmun,2005,73(12):78787886.23 HEnninghamA.ChiarotE,GillenCM,etal.Conservedanchorlesssurfaceprotein

33、sasgroupAstreptococcalvaccinecandidatesJ.MolMed(Berl),2012,90(10):1197-1207.24 LiuM,ZhuH.LiJ,etal.GroupAStreptococcussecreted107esterasehydrolyzesplatelet-activatingfactortoimpedeneutrophilrecruitmentandfacilitateinnateimmuneevasionJJ.PLoSPathog,2012,8(4)：el002624.25 HuangYS.FisherM,NasrawiZ,etal.De

34、fensefromthegroupAstreptococcusbyactiveandpassivevaccinationwiththestreptococcalhemoproteinreceptorJ.JInfectDis.2011.203(11):1595-1601.(本文编辑：赵丽洁)PLK/Akt信号转导通路与肿瘤细胞增殖徐彦楠】，周晨明2(综述)，姚胜杰*赵俊霞】(审校)(1.河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室，河北石家庄050017；2.河北医科大学电镜实验中心，河北石家庄050017)关词PI3K1Akt,细胞增殖doi：10.3969/j.issn.l007-3205.2015.01.042中图分类号R73-37文献标志码A文章编号1007-3205(2015)01-0107-03恶性肿瘤最突出的特征是细胞的异常增殖，细胞增殖的调控与肿瘤