芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究课件

1、芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究Anand IS. Heart Failure, 1997芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究 6. aquaporin-2 芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究Aquaporin(AQP)Aquaporin(AQP)是具有高度选择性水通道的同源蛋白质家族，在维持机是具有高度选择性水通道的同源蛋白质

2、家族，在维持机体的水平衡中起着重要作用，并且与水平衡紊乱所致疾病有密切关系。体的水平衡中起着重要作用，并且与水平衡紊乱所致疾病有密切关系。 AQP2是肾脏在生理条件下最主要的受是肾脏在生理条件下最主要的受AVP调节的水通道，是目前唯一发现调节的水通道，是目前唯一发现的其基因突变可导致肾性尿崩症的的其基因突变可导致肾性尿崩症的Aquaporin水通道蛋白，被认为是维持体内水通道蛋白，被认为是维持体内水平衡调节的必须物质。水平衡调节的必须物质。Nielsen S, Physiol Rev. 2002; 82: 205244.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究充血性心力衰

3、竭大鼠肾脏充血性心力衰竭大鼠肾脏AQP2AQP2水通道水通道mRNAmRNA表达的改变表达的改变C C HF1 HF1 HF2 HF2Xu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究 C C HF1 HF1 HF2 HF2 MXu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究研究背景研究背景芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究研研 究究 背背 景景CHFCHF大鼠血浆大鼠血浆A

4、VPAVP较对照组升高，同时上调肾脏较对照组升高，同时上调肾脏AQP-2AQP-2的基因和蛋白表达。的基因和蛋白表达。CHFCHF时水潴留的重要途径时水潴留的重要途径: : 心输出量下降心输出量下降 垂体分泌血管加压素（垂体分泌血管加压素（AVPAVP ） 肾集合管主细胞肾集合管主细胞V2-R AQP-2V2-R AQP-2表达上调表达上调 集合管水重吸收集合管水重吸收 水潴留。水潴留。下调肾脏下调肾脏AQP-2AQP-2的表达，是否可以成为纠正的表达，是否可以成为纠正CHFCHF患者水潴留、缓解临床症状、改善心脏功能的靶患者水潴留、缓解临床症状、改善心脏功能的靶点之一？点之一？Xu DL.

5、J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.许顶立等许顶立等, 中华医学杂志中华医学杂志,1998;78(2):118-120 芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究V2拮抗剂(OPC-31260)对充血性心力衰竭大鼠肾脏AQP2水通道蛋白mRNA表达的影响 C HF2 HF+V C HF2 HF+V C HF2 HF+V 肾皮质肾皮质 肾外髓质肾外髓质 肾内髓质肾内髓质Xu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究V2拮抗剂(OPC-31260

6、)对充血性心力衰竭大鼠肾脏内髓质AQP2水通道蛋白表达的影响 C C HF2 HF2 HF+V HF+V MXu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究研研 究究 背背 景景 中药芪苈强心的成分主要包括黄芪、附子及苈葶子中药芪苈强心的成分主要包括黄芪、附子及苈葶子等中药材，有益气温阳、活血通络、利水消肿的作用。等中药材，有益气温阳、活血通络、利水消肿的作用。已有研究报道，芪苈强心可以增强心肌收缩力，增已有研究报道，芪苈强心可以增强心

7、肌收缩力，增加尿量，改善加尿量，改善CHFCHF患者的心脏功能，患者的心脏功能，那么芪苈强心是那么芪苈强心是否可以影响否可以影响CHFCHF大鼠肾脏大鼠肾脏AQP-2AQP-2的表达？的表达？因此，本研究选用芪苈强心作为干预药物，观察芪因此，本研究选用芪苈强心作为干预药物，观察芪苈强心对苈强心对CHFCHF大鼠尿量及肾脏大鼠尿量及肾脏AQP-2AQP-2表达的影响。表达的影响。芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究在结扎前降支后，观察到前壁供血区心肌变苍白。在结扎前降支后，观察到前壁供血区心肌变苍白。ECG出现出现J点抬高点抬高0.2 mV，提示结扎冠脉成功。，提示结扎

8、冠脉成功。AMI术后术后4周，存活大鼠经超声心动图检查后，见大鼠心周，存活大鼠经超声心动图检查后，见大鼠心脏前壁变薄，室壁运动减弱，确定脏前壁变薄，室壁运动减弱，确定CHF大鼠造模成功。大鼠造模成功。 CHF模型标准：模型标准：选用选用2月龄，雄性月龄，雄性SD大鼠，体重大鼠，体重200-250g，采用结扎左冠状动脉致急性心，采用结扎左冠状动脉致急性心肌梗死（肌梗死（AMI）后心力衰竭大鼠模型。）后心力衰竭大鼠模型。芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究 芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究结结 果果 Compared to CTL-1, :

9、P 0.01.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究结结 果果 The changes of urinary volume in different groups rats during 1 week treatment QH-1组、组、QM-1组、组、QL-1组大鼠随着用药时间的延长尿量显著增加组大鼠随着用药时间的延长尿量显著增加7654321bef ore时间（天）时间（天）24. 0022. 0020. 0018. 0016. 0014. 0012. 00尿尿量量（m lm l ）Q L-1Q M -1Q H -1C H F-1C TL-1分组芪苈强心对慢性心力衰

10、竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR检测各组检测各组V2-RmRNAV2-RmRNA变化变化 结结 果果 Compared to CTL-1,: P 0.01.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR检测各组检测各组AQP-2-RmRNAAQP-2-RmRNA变化变化 结结 果果 CHF-1CHF-1组组AQP-2 mRNAAQP-2 mRNA表达较表达较CTL-1CTL-1组显著增加（组显著增加（P P0.010.01）而芪苈强心治疗而芪苈强心治疗1 1周后，周后，QH-1QH-1组、组、QM

11、-1QM-1组、组、QL-1QL-1组组AQP-2 AQP-2 mRNAmRNA表达与表达与CHF-1CHF-1组相比均无显著性差异（组相比均无显著性差异（P P0.050.05）Compared to CTL-1,: P 0.01.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究结结 果果 29KD3645KD 1 2 3 4 5. .注：注：1 1为为CTL-1CTL-1组组; 2; 2为为CHF-1CHF-1组组; 3; 3、4 4、5 5分别为分别为QH-1QH-1、QM-1QM-1、QL-1QL-1组组Compared to CTL-1,: P 0.01.芪苈强心对慢性

12、心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究结结 果果 : P 0.01, Compared to CTL-4; : P 0.01, Compared to CHF-4 group; : P 0.05, Compared to QH-4.芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究结结 果果 The changes of urinary volume in different groups rats during 4 week treatment 芪苈强心治疗芪苈强心治疗4 4周后，周后，QH-4QH-4组、组、QM-4QM-4组、组、QL-4QL-4组尿量较治疗组尿量较

13、治疗前显著升高，差异有统计学意义。前显著升高，差异有统计学意义。2825211713951bef ore时间（天）时间（天）26. 0024. 0022. 0020. 0018. 0016. 0014. 00尿尿量量（m lm l ）Q L-4Q M -4Q H -4C H F-4C TL-4分组芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR检测各组检测各组V2-RmRNAV2-RmRNA变化变化 结结 果果 Compared to CTL-4, : P 0.01; Compared to CHF-4 group, : P 0.05, : P

14、 0.01;Compared to QH-4,: P 0.05.00.511.522.53CTL-4CHF-4QH-4QM-4QL-4V2-R mRNA(% of control)芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR检测各组检测各组AQP-2mRNAAQP-2mRNA变化变化 结结 果果 Compared to CTL-4, : P 0.01; Compared to CHF-4 group, : P 0.05, : P 0.01;Compared to QH-4,: P 0.05.00.511.522.533.5CTL-4CHF-

15、4QH-4QM-4QL-4AQP2 mRNA(% of control)芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究结结 果果 29KD3645KD 1 2 3 4 5 Compared to CTL-4, : P 0.01; Compared to CHF-4 group, : P 0.01;Compared to QH-4,: P 0.05.注：注：1 1为为CTL-4CTL-4组组; 2; 2为为CHF-4CHF-4组组; 3; 3、4 4、5 5分别为分别为QH-4QH-4、QM-4QM-4、QL-4QL-4组组 00.511.522.53CTL-4CHF-4QH-4QM-4QL-4AQP2 protein expression(% of control)芪苈强心对慢性心力衰竭大鼠肾脏AQP2及心脏功能的影响基础研究肾脏水通道蛋白肾脏水通道蛋白2 2（AQP2AQP2）增加集合管对水的重吸收，对）增加集合管对水的重吸收，对CHFCHF时水潴留起着重要的作用时水潴留起着重要的作用各组大鼠肾脏髓质各组大鼠肾脏髓质AQP2AQP2免疫荧光表达，假手术组肾脏表达很少，免疫荧光表达，假