电刺激隐神经对大鼠脊髓cfos基因表达的影响

1、电刺激隐神经对大鼠脊髓cfos基因表达的影响         11-03-23 09:13:00     编辑：studa20            作者：杨宇，杨静玉，郭丽，商丽宏3，陈魁敏，吴敏范，韩清【摘要】  目的：观察躯体伤害性刺激能否引起脊髓神经元细胞内cfos基因表达的改变。方法：用免疫组化方法研究躯体伤害性电刺激隐神经后不同时间，脊髓神经元细

2、胞内cfos基因表达的变化。结果：伤害性电刺激隐神经能够引起脊髓神经元Fos蛋白表达的显著增加;伤害性电刺激隐神经后30min明显增加，60min增加最明显，120min后开始消退。结论：本研究证明伤害性电刺激隐神经能够引起脊髓神经元Fos蛋白表达的显著增加，这种表达呈时间依赖性。 【关键词】  cfos基因;脊髓;隐神经;躯体痛;免疫组化EffectofElectricallyStimulatingSaphenousNerve oncfosGeneExpression inSpinalCordNeuronsofRatsYANGYu1，YANGJingyu1，GUOLi2，SHANG

3、Lihong3，CHENKuimin3，WUMinfan4*，HAN Qing5(1.LifeScienceandBiopharmaceuticalCollege，ShenyangPharmaceuticalUniversity，Shenyang110015，China;2.ScientificExperimentalCenterofShenyangMedicalCollege;3.FunctionalExperimentalCenterofShenyangMedicalCollege;4.DepartmentofPhysiology，ShenyangMedicalCollege;5.Depa

4、rt of Hygiene,PLA 95979 Army)AbstractObjective：Toobservetheexpressionchangesofthecfosgeneinspinalcordneuronsbysomaticnoxiousstimulation.Methods：Theelectricalstimulationofsaphenousnerveatdifferenttimeswasstudied，thechangesofspinalcordneuronscfosgeneexpressionwereobservedbyimmunohistochemicaltechnique

5、.Results：SpinalcordFosproteinexpressioncouldleadtoasignificantincreasebyimmunohistochemicaltechnique，noxiouselectricalstimulationincreasedsignificantly30minutes，themostsignificantincrease60minutes，thenfadesafter120minutes.Conclusions：Thisstudyprovedthenoxiouselectricalstimulationofsaphenousnerve，the

6、spinalFosproteinexpressioncanleadtoasignificantincrease，thisexpressionistimedependent.Key wordscfosgene;spinalcord;saphenousnerve;somaticpain;immunohistochemistry痛觉是一种不愉快的感觉和情绪体验，伴有实际或潜在的组织损伤。疼痛是最普遍的临床症状之一，虽然治疗方法很多，但疗效均不尽人意，给患者带来巨大痛苦，是临床治疗一大难题。脊髓后角浅表层既是接受躯体伤害性信息传递的初级门户又是对伤害性信息处理的重要部位，是接受和调制痛觉信号的重要中枢

7、1，因此脊髓后角是探索躯体痛和镇痛机制首当其冲的研究部位2。cfos基因是编码核蛋白的基因，它既是一种原癌基因3，广泛存在于真核细胞基因组中的基因，又是即刻早期表达基因在中枢神经系统内的表达与痛觉密切相关4。研究发现，机体在受到外周伤害性刺激后，cfos基因被激活并表达Fos蛋白，是目前较为理想的中枢神经元对伤害性刺激反应的疼痛标志物。因此用cfos原癌基因及其编码的相关蛋白来判断、追踪伤害性刺激隐神经(saphenousnerve，SN)的信号在脊髓神经元细胞内信号传导通路，以确定与伤害性信息传递、中继或整合有关的表达区域5，6。1 材料与方法1.1 材料 健康雄性Wistar大鼠60只，体

8、重230270g，沈阳医学院实验动物中心提供;戊巴比妥钠(购自SIGMA，美国);cfos抗体(购自SantaCruzBiotechnology，Int.);ABC免疫组化试剂盒(购自北京中杉金桥生物技术有限公司)。1.2 方法2 结果2.1 正常大鼠脊髓后角神经元cfos基因的表达 正常大鼠脊髓内仅有少量Fos蛋白表达，主要分布于细胞核内，经DAB显色后，cfos阳性神经元的胞核染成棕褐色，大小不等，多为圆形或椭圆形，较大的细胞可见核仁透亮区，如图1所示。2.2 电刺激隐神经后不同时间大鼠脊髓后角神经元cfos基因的表达 与对照组相比，伤害性电刺激SN后30min，诱导脊髓神经元Fos蛋白表达显著增加，积分光密度和阳性细胞面积百分比显著增加(P<0.05);伤害性电刺激SN后60min，诱导脊髓神经元Fos蛋白表达增加达高峰，积分光密度和阳性细胞面积百分比显著增加(P<0.01);伤害性电刺激SN后120min，诱导脊髓神经元Fos蛋白表达显著增加，但开始消退，积分光密度和阳性细胞面积百分比显著增加(P<0.05)，见表1、图1、图2。因此，伤害性电刺激SN可诱导脊髓腰骶段神经元Fos蛋白的表达增强。这种表达呈时间依赖性，伤害性电刺