亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定

1、亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定作者：田芳 窦德强 迟玉新 吴阳 朱红 丘鹰昆 康廷国 董锋 【摘要】 目的建 立亚贡叶总黄酮、总酚酸的含量测定方法。方法利用分光光度计通过测定吸光 度计算总黄酮、总酚酸的含量。结果实验建立了总黄酮、总酚酸的标准曲线， 测得亚贡叶中总黄酮平均含量为 3.2%, RSD=1.4%(作者：田芳 窦德强 迟玉新 吴阳 朱红 丘鹰昆 康廷国 董锋 【摘要】 目的建立亚贡叶总黄酮、总酚酸的含量测定方法。方法利用分 光光度计通过测定吸光度计算总黄酮、总酚酸的含量。结果实验建立了总黄 酮、总酚酸的标准曲线，测得亚贡叶中总黄酮平均含量为 3.2%, RSD=1.4%(n=6);

2、总酚酸平均含量为4.5%, RSD=1.6%( n=6)。 结论建立了亚贡叶的 总黄酮、总酚酸含量测定方法，该法简单、快捷，重现性好，可用于亚贡叶的 质量控制和定量分析。关键词】 亚贡 总黄酮 总酚酸Abstract ： ObjectiveTo establish the determination methods of total flavonoids and total phenolic acid from leaf of Yacon. MethodsThe content of total flavonoids and total phenolic acid were determine

3、d by spectrophotometry. ResultsCalibration graphs were constructed for total flavonoids and total phenolic acid. The content of total flavonoids was 3.6% and the total phenolic acid was 4.4%. ConclusionThe methods are rapid, reliable, accurate and suitable for analysis of total flavonoids and total

4、phenolic acid and quality control in Smallanthus sonchifolius.Key words：Yacon;Total flavonoids;Total phenolic acid亚贡 Smallanthus sonchifolius (Poeppet End1 )HRobinson 为菊科向日葵属多年生草本植物，俗称“雪莲果”“雅龙果”，英文名为“YACO”N 。原产于南美洲安第斯山脉，是当地印第安人的传统根茎食品1。在我国云南地区有大面积种植，贵州、福建、湖南、台湾等地也均有种植。民间用亚贡叶 加工成茶，冲泡饮用，有降血糖、预防动脉粥样硬化的

5、功效。日本学者研究发 现，亚贡能有效地控制胆固醇增加 , 有减肥、防感冒、防骨质疏松、降低高血压 的功效, 对消化道和循环系统的疾病 ,以及结肠癌等 , 均具有一定的疗效 2。目前国内对于亚贡的文献报道较少，本文对亚贡叶中总黄酮及总酚酸含量进行 了测定，为其资源合理的开发利用及质量控制提供理论依据。1仪器与试药1.1 仪器UV-2100紫外分光光度计（上海UNICO） FA-1004分析天平（上海精科天平 厂）。1.2 试药芦丁对照品为自制，经 HPLC纯度检验为98.472%咖啡酸标准品购于中国药品生物制品检定所（批号110885-200102）。亚贡叶200509采自辽宁省鞍山市岫岩新甸镇

6、大山村，经辽宁中医药大学药学院康廷国教授鉴 定为菊科亚贡Smallanthus sonchifolius的叶。所用试剂（硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、三氯化铁六水合物、铁氰化钾、十二烷基磺酸钠、盐酸、甲醇）购于各试剂公司。2方法2.1 供试品的准备精密称取亚贡叶粉末约 2 g，加入石油醚100 ml，用 索氏提取器脱脂6 h。脱脂后粉末加入100 ml60%甲醇加热回流两次，各1.5 h。过滤，合并滤液，减压浓缩并定容至 25 ml容量瓶。精密吸取1 ml再定容 至25 ml容量瓶中备用。2.2 总黄酮含量测定3。2.2.1 芦丁对照品的准备精密称取芦丁对照品，用 60%的甲醇溶解后定 容，配成

7、浓度为95卩g/ml的芦丁对照品贮备液。精密吸取1 ml芦丁对照品溶 液，定容至10 ml，制成浓度为9.5卩g/ml的芦丁对照品溶液。2.2.2 标准曲线的绘制精密吸取浓度为 9.5卩g/ml芦丁对照品溶液0,1.0，4.0 ml 及 95 卩 g/ml 的芦丁对照品溶液 1.0，2.0，3.0，4.5 ml 于 7 只 10 ml具塞比色管中，分别加入 5% NaNO溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min后各加 入10% Al（NO3）3溶液0.3 ml，摇匀放置6 min。分别加入4%NaO溶液4.0 ml，用60%?醇稀释至刻度，摇匀，放置 10 min。在波长505 nm处测定吸光

8、度。回归方程：丫 = 1.193 7X - 0.001 1，r= 0.999 7。其中丫为吸光度，X为芦丁对照品溶液浓度（mg/ml）。结果表明：芦丁在0.0010.043 mg/ml的 范围内呈良好的线性关系。2.2.3 方法学考察精密度实验：精密吸取95卩g/ml芦丁对照品溶液1.0 ml置于10 ml具塞 比色管中，同“ 2.2.2 ”项下实验方法进行显色和测定，记录吸光度 A,吸光度 A 的 RSD为 0.51%（n=5）。重现性实验：精密称取 2 g 同一批药材 5份，按“ 2.1 供试品的制备”及 含量分析项下进行操作，制得 5份供试液，各取适量，同“ 2.2.2 ”项下实验方 法进行显色和测定，记录吸光度，吸光度 A的RSD为1.5%(n=5)。稳定性实验：精密吸取 95 项下实验方法进行显色，分别在 明样品在1560 min内稳定。卩g/ml芦丁对照品溶液15， 20， 30， 45， 6