生脉散对实验性高脂血症大鼠血液流变学及抗氧化作用的实验研究_

1、生脉散对实验性高脂血症大鼠血液流变学及抗氧化作用的实验研究廖泽云1,姜锦林2,刘 红1(1.湖北民族学院医学院,湖北恩施445000;2.湖北民族学院医学院附属医院,湖北恩施445000摘 要:目的:观察古方生脉散口服液对实验性高脂血症大鼠的血液流变学及抗氧化作用的影响。方法:将W istar 大鼠45只随机分为对照组、高脂血症模型组(以下简称模型组和生脉散组,喂饲法建立高脂血症大鼠模型,灌胃给药4周,测定每组大鼠血脂成分、血液流变指标和氧自由基的变化。结果:与对照组比较,模型组大鼠血中胆固醇(TC、甘油三酯(TG 、低密度脂蛋白(LDL -C升高,脂质过氧化物(M DA 含量增加、超氧化物歧

2、化酶(SOD 及谷光甘肽过氧化物酶(GS H -PX 活性明显降低,血液流变学异常;与模型组比较,生脉散组大鼠血浆中TC 、TG 值明显降低,高密度脂蛋白(HDL -C升高,M DA 含量减少,SOD 及G S H -PX 活性增强,血液黏度、红细胞和血小板聚集能力明显降低。结论:古方生脉散口服液能够调节高脂血症大鼠血脂代谢、改善血流状态、清除氧自由基,对高脂血症和心血管系统疾病有一定的治疗作用。关键词:生脉散;血液流变;氧自由基;高脂血症中图分类号:R 285.5 文献标识码:B 文章编号:1000-1719(200710-1478-02Effec ts of Traditional SHE

3、NG MAI SAN on Seru m L ipid and B lood R heology &Oxygen F ree Radical of Hyperli p ide m iaM ode lR atsL I AO Ze yun 1,JIAN G J i n lin 2,LIU H ong 1(1.M e d ical S chool of H ubei Instit u te for N ati onalities ,Enshi 445000,H ubei ,China ;2.The A ff ili a te d H osp it a l of M edica l Schoo

4、l of H ubei Ins titute for N ationalities ,E nshi 445000,H ubei ,ChinaAbstract :O bjective :T o study the preventi ve and hea lth e ffects o f S H EN G M A I SAN on hyperli p i de m i a .M ethod s :45W istarra ts w ere d i v i ded i n t o three groups :contro l group ,m ode l group and Shengm a i sa

5、n g roup .W i star ra ts were fed respec ti ve l y w ithstandard d i et ,15w eeks later ,to measure seru m lipi d ,blood rheo l ogy and oxyg en free radical i n rats .R esu lt :A t the end o f expe r i m ent ,the serum TC ,TG and LDL -C lev els of model groups w ere h i ghe r than the contro l g rou

6、ps ,the qua lity ofM DA w ere high e r ,the acti v ity o f SOD and G S H -PX w ere l ow er ,b l ood rheo logy w ere si gn ifi cantl y changed .the se ru m T C and TG levels of S H EN G M A I SAN g roup we re s i gnificantl y l ow er t han t he m ode l group ,HDL -C was higher ,t he qua li ty ofM DA

7、w ere l ow er ,the ac ti v iti es of S OD and GS H -PX we re hi gher ,blood v i scos i ty ,the ab ility o fRBC and plate l e t aggregati on w ere si gnificantly lo w er .Conclusion:S H EN G M A I SAN can regu l a te hyper lipi de m ia rats serum li p i d and li poprote i n ,i m prove he r mo rrheo l

8、ogy ,c l ean oxy gen free radica ,l there w ere preven tive and health e ffects o f T raditi ona l S H EN G M A I SAN on hyper lipi de m ia and cardiovascu lar d i sease .K eywords :S H EN G M A I SAN ;b l ood rheo l ogy ;oxygen free rad i ca ;l hyperli p i de m i a收稿日期:2007-05-24基金项目:湖北省卫生厅资助项目(J X

9、 I B120作者简介:廖泽云(1965-,男(土家族,湖北恩施人,副教授,硕士,主要从事中药药理基础研究。古方 生脉散 乃中医名方,功能主治:益气生津、养心补肺,临床上常用于治疗气阴两虚患者,有大补元气、固脱复脉的功效。主要由人参、麦冬、五味子组成,其有效成分为人参皂苷、麦冬皂苷、麦冬黄酮、五味子素等,有多种药理作用。有研究表明,生脉散可以改变动物血脂成分及脂蛋白组分,影响血液流变学指标,并且有一定的抗氧化能力1-3。本实验通过高脂血症大鼠动物模型,观察了生脉散口服液对脂质水平异常的动物个体在调节脂质代谢、抗脂质过氧化损伤及血液流变等方面的影响。1 材料与方法1.1 主要试剂和仪器 TC 、

10、TG 试剂盒由美国波音特提供;HDL-C 试剂盒由上海波亚提供;MDA 、SOD 及GSH -PX 试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供;二磷酸腺苷(ADP系S ig m a 公司产品;AEROSET 09D05-01全自动生化分析仪(美国,756型紫外分光光度计(上海分析仪器总厂,TL-16G 型高速冷冻离心机(上海实验仪器厂生产,全自动血液流变快速分析仪(重庆大学维多生物工程研究所产品。1.2 药品 生脉散由党参、麦冬、五味子组成,所有药物均来自湖北民族学院附属医院中药房,并由医学中药制剂室按传统方法煎制成含生药2g /mL 的水煎液备用。1.3 实验动物 W istar 大鼠45只,雄性

11、,离乳2周龄,体重3040g ,由湖北省实验动物中心提供。1.4 大鼠高脂血症模型3 平衡喂养1周后随机分为对照组、模型组、生脉散组。对照组喂以标准饲料(由湖北省医学科学院实验动物饲养中心提供,模型组、生脉散组均喂以在标准饲料中添加1.5%胆固醇、10%猪油、5%蛋黄和0.5%胆酸钠的高脂饲料,其中对照组、模型组饮用自来水,生脉散组饮用20%生脉散水,实验室温度为(202#。按上述要求持续喂养15周后,取血进行检测并镜下尸检观察主动脉粥样变化。1.5 测定指标和方法 (1血脂:TC采用胆固醇脂酶比色法测定,TG采用脂肪酶比色法测定,HDL-C 采用PEG6000沉淀法测定,LDL-C则由公式法

12、推出(LDL-C=TC-H DL-C-14/5TG。(2氧自由基:采用硫代巴比妥酸显色法检测MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD,二硫代二硝基苯甲酸法测定GS H-PX。(3血液流变学指标检测:取红细胞聚集指数(EA I,红细胞变行指数(ER I,纤维蛋白原(FI B,全血黏度(b 取高切值200s-1、低切值3s-1,血浆黏度(p ,在血液高速离心后高切变率下检测值做统计学处理。血小板聚集功能(PAG采用枸椽酸钠抗凝血剂取富含血小板血浆(PRP和贫血血浆(PPP,以ADP为诱聚剂按比浊法测定。1.6 数据分析 实验数据采用SPSS FOR W I N DOW S 10.0软件进行t检验统计处

13、理。2实验结果2.1 生脉散对模型大鼠体重的影响 15周饲养后,动物体重的变化主要表现在第10周以后,组间差异比较具有统计学意义。模型组和生脉散组大鼠体重与对照组比较均明显升高(P<0.01,而生脉散组大鼠体重又明显低于模型组且组间差异显著(P<0.01,见表1。表1 生脉散对模型大鼠体重的影响( xs,n=15组别1周(g9周(g11周(g15(g正常组393221112411330913模型组41425213*26914*34416*生脉散组43324212*24811*31914注:与对照组比较,*P<0.01;与模型组比较,P<0.01。2.2 生脉散对高脂血症

14、模型大鼠TG TC H DL-C及LDL-C的影响 15周饲养后,与对照组比较,模型组大鼠TC、TG和LDL-C明显升高(P<0.01;与模型组比较,生脉散组大鼠TC、TG、LDL-C的水平明显降低(P<0.05,HDL-C明显升高(P<0.01。见表2。表2生脉散对高脂血症模型大鼠TG TCHDL-C及LDL-C的影响(mmo l/L, xs,n=15组别TC T G HDL-C LDL-C模型组6.100.56*1.320.26*1.120.171.830.30*生脉散组5.050.300.930.141.390.171.520.27注:与对照组比较,*P<0.01

15、;与模型组比较,P<0.05,P<0.01。2.3 生脉散对模型大鼠SOD MDA及GS H-PX的影响 经过15周喂养后,与对照组比较,模型组MDA含量显著升高,SOD、GSH-PX活性明显降低(P< 0.01;与模型组比较,生脉散组MDA含量明显减少, SOD、GSH-PX活力明显增强(P<0.05。见表3。表3 生脉散对模型大鼠SOD M DA及GSH-PX的影响(n=15, xs模型组6.460.69*204.8033.68*62.6611.78*生脉散组5.510.48267.7032.0168.1011.91注:与对照组比较,*P<0.01;与模型组比

16、较,P<0.05,P<0.01。2.4 生脉散对高脂血症模型大鼠血液流变学的影响 模型组大鼠的全血黏度、血浆黏度、PAG、EA I、纤维蛋白原升高,ERI降低,与对照组比较组间差异显著;与模型组动物组比较,生脉散组均能不同程度恢复血液流变学的各项指标,且生脉散组和对照组组间比较没有显著差异性。见表4。表4 生脉散对模型大鼠血液流变学的影响( xs,n=15组别b(map!sH b L bp(mp a!sPAG(%FIB(g/LERI EA I正常组5.530.4311.081.38 1.870.4935.935.64 3.810.560.760.154.190.22模型组6.981

17、.16*14.281.83* 2.760.52*51.337.53* 4.670.89*0.530.21*5.060.65*生脉散组5.820.5611.422.07 2.120.3442.274.47 4.070.580.680.154.350.36 注:与对照组比较,*P<0.01;与模型组比较,P<0.01,P<0.05。3 讨 论对高脂血症动物模型组各项指标的测定表明,血TC、TG和LDL-C水平显著高于对照组,镜下观动脉粥样化(AS形成,说明动物模型的建立成功,用含高胆固醇高脂饲料饲养动物,已经造成了大鼠心血管系统组织细胞的损伤或代谢紊乱。生脉散组结果显示,药物降低

18、高脂饮食动物TC、TG及LDL-C,而使HDL -C升高。由于TC、TG的升高是形成高脂血症的重要因素5-6,血脂升高、血液流速缓慢,可引起血管内皮细胞损伤和灶状脱落,血管壁通透性升高,血浆脂蛋白得以进入内膜,引起巨噬细胞的清除反应和血管平滑肌细胞(S MC增生,导致AS形成,血流循环不畅,供血供养不足,直接造成心血管系统损伤7。实验结果显示,高脂血症模型组的血清和心肌组织中MDA明显升高, SOD、GS H-PX明显降低,这说明氧自由基在高脂血症中直接参与了对心血管系统损伤,生脉散能明显抑制因高脂血症导致的脂质过氧化,减少MDA含量,增强SOD 和GS H-PX活力,表现出强抗氧化能力。血液流变学异常导致正常血液循环紊乱,使血管内皮细胞与血液有形成分之间的相互作用方式发生了改变,尤其是在血液高黏度状态下,血小板、白细胞的黏附及聚集功能增强,血管壁受到的变力增强,内皮细胞易于损伤。生脉散能够降低高脂血症大鼠血黏度,对大鼠血液中红细胞、血小板的聚集有明显的抑制作用,表明生脉散能改善血液流变性,维持血细胞正常功能,增强血流速度,改善血液循环和微循环。综上所述,古方生脉散有其独特的药理和生理活性,能够调节血脂代谢,改善血液循环和微循环,提高机体缺氧耐力,对治疗高脂血症和心血管疾病有良好作用,为临床上利用中西医结