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文档简介

1、小麦根部内生细菌的分离及其作用研究(居中,黑体3号,段前段后2行行距) 王 兵(宋体小4号) (生命科学学院2007级生物工程专业 开封 475004)(宋体5号) 摘 要:(楷体小4号加粗)通过常规表面消毒法,从取自不同地区的健康小麦根中分离出222株内生细菌通用WK-1-9同时有助于小麦抗盐和碱。(内容用宋体5号,1.5倍行距)关键词:(楷体小4号加粗)小麦;内生细菌;分离;盐碱;拮抗作用 (宋体5号)1 前言(黑体3号,段前段后1行行距)1.1内生菌的由来(黑体小3号,段前段后0.5行行距)植物内生细菌是能够定殖在植物细胞间隙或细胞内,并与寄主植物建立和谐联合关系的一类微生物1 (参考文

2、献序号采用右上角标注)。(正文内容-宋体小四号字体 1.5倍行距)1.2内生菌的进展及现状 (黑体小3号,段前段后0.5行行距)对植物内生细菌的研究工作早已开始。Allen E.K., Burick.E.等人认为植物组织内部 1.3内生菌对植物的益生作用尽管内生菌在植物体中的生物量似乎微不足道,但现有研究认为内生菌可通过自身1.3.1促进宿主植物生长(黑体4号,段前段后0.5行行距)感染内生菌的植物一般具有比未感染植株生长快速的特点。内生菌的这种促植物生也有所提高。增加宿主对环境胁迫的抗性(黑体4号,段前段后0.5行行距)2 材料与方法 (黑体3号,段前段后1行行距)2.1供试材料(黑体小3号

3、,段前段后0.5行行距)小麦品种(黑体4号,段前段后0.5行行距)矮早781、科十,由河南大学生物工程研究所提供。植物病原真菌 小麦叶枯病原菌(Pyrenophora tritici);小麦全蚀病原菌(Gaeumannomyces graminis var tritici);(正文里的英文和数字采用Times New Roman,大小按具体要求而定,正文小4,表格中5号)2.2方法小麦内生细菌的分离(1)材料处理与细菌培养将各地采集的健康小麦取其根部用自来水冲洗干净并凉干;小麦抗盐碱实验(1)预实验的设置(四级标题,宋体四号加粗)小麦的催芽及浸种a.催芽:挑选籽粒饱满的麦种用自来水冲洗除去杂质

4、后浸入0.1拮抗试验(1)拮抗菌的筛选 初筛:复筛:(2)拮抗系数的测定 真菌养5天(如图2)。213312 注:1、PDA平板;2、病原真菌;3、内生细菌 注:1、PDA平板;2、病原真菌;3、内生细菌;(宋小5)图 1 示平板法拮抗菌筛选试验 图 2 示平板法测定拮抗系数(楷体5号)3 结果与分析3.1小麦内生细菌的分离培养基的选择比较经表面消毒小麦测观察,根据所分离的内生菌的大小、形状、颜色的不同共分离出222种小麦根部内生细菌。表面消毒对照小麦根表麦其根部内生细菌的种类较多,而处于拔节期的分离出内生细菌的数量较少。3.2盐碱实验供试小麦品种的选择用科十和矮早781两个小麦品种同时进行催

5、芽,24小时后观察结果表明矮早781无论在出芽率还是在芽的长势上都比科十要好,即选用矮早781品种做供试小麦。预实验结果一周后把盐、碱各MC处理的小麦在根数、变化趋势一致。盐碱实验结果将放入25恒温光照培养的小麦取出洗去沙子,通过测量小麦的根长、地上部分长度、根(1cm以上)的总数和称量小麦的质量等指标对其进行统计,统计分析结果如下: 图 3 内生细菌对健康自然生长小麦生长量(质量)作用(楷体5号)3.3拮抗实验拮抗菌的筛选通过平板对峙法从分离到的内生作用。如图10(B)示:ABA:对峙法测拮抗系数 B:拮抗菌筛选(宋体小5)图9 拮抗菌的筛选及拮抗系数的测定(楷体5)拮抗系数的测定分别测量真

6、菌受抑制侧宽度(a)和对照侧宽度(b)如上页图7(A),拮抗系数=(b-a)/b测量结果如下表:表1拮抗细菌与病原真菌平板对峙试验中对应拮抗系数(楷体5号)内生细菌抑菌率(拮抗系数)(宋体5号)小麦叶枯菌西瓜枯萎病菌小麦全蚀菌玉米弯孢菌WN-1-50.74 0.52 0.72 0.62 WK-4-340.75 0.83 0.54 WK-6-210.54 0.70 0.50 WK-N0.33 0.36 0.64 0.48 WK-3-70.37 0.71 0.48 WK-1-160.67 0.46 0.58 0.46 WK-4-310.44 WK-1-90.57 0.45 (Times New R

7、oman 5号)0.76 0.43 WN-1-200.64 0.39 0.58 0.42 WK-4-300.35 WN-1-10.68 0.48 0.82 注:表中“”表示平板对峙试验中无明显抑制现象(宋体小5) (表格采用三线格,上下表格线用1磅黑线,其余用0.5磅黑线)4 讨论(黑体3号,段前段后1行行距)在研究内生细菌的过程中,特别是在研究方法和手段方面仍存在一些问题:a 内生文所论述的研究内容对发展可持续发展农业、绿色农业有着重要意义,加强这方面的研究势在必行、意义重大。参考文献(黑体3号,段前段后1行行距)1 Bowman R A, Cole C V,. An exploratory

8、 method for fractionation of organic phosphorus from grassland soil. Soil Science, 1978, 125: 95-101.2 邹文欣, 谭仁祥,李梅月等. 植物内生菌研究新近展. 植物学报, 2001, 43(9): 881-892.4 孔庆科, 丁爱云. 内生细菌作为生防因子的研究进展. 山东农业大学学报(自然科学版), 2001,32(2): 256-260.9 李志强. 食品营养学. 北京:中国轻工出版社, 2005, 22-24.10 Gamalero E, Linguag G, Berta G, et a

9、l. Methods for studying root colonization by introduced beneficial bacteria. Agronomie, 2003, 23: 407-418. (参考文献请按写作要求认真书写,汉字为宋体5号,英文用Times New Roman 5号,行距1.5倍)Isolation of wheat root endophytic bacteria and its function(Times New Roman 小二)Abstract(4号加粗): 222 endophytic bacteria strains were isolate

10、d from the roots of the healthy wheat in the different areas by surface disinfection, pairing the endophytic bacteria with 4 plant pathogenic fungi respectively, 37 endophytic bacteria strains found have antagonism to the Alternia sp, Gaeumannomyces graminis var. tritici , Fusarium oxysporum f. sp.n

11、iveum and Curvularia.Lunata (Wakker) Boed. Antagonism coefficient,the bacteriostasis matter and the suppression of the growth of the fungus hypha were measured and the results showed that more of the antagonism coefficient are around 0.5, and some are up to 0.7, bacterias being antagonism have the i

12、nhibition such as destroy action to the growth of the fungus hypha. Which suggested that the bacteriostasis materials may be some enzymes. Through determining the action of the anti- salt ,the anti-alkali and promotion of 67 endophytic bacteria strains, we found that the strains of WK-1-12 and WK-1-16 are potential to the anti-alkali of wheat and the strains of WN-2-H, WK-2-6 and WK-2-31 are potential to the anti-salt and promotion to the wheat, WK-1-9 is potential to the anti-salt and anti

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