淫羊藿总黄酮的提取工艺及含量分布

1、淫羊藿总黄酮的提取工艺及含量分布         08-05-28 16:15:00     编辑：studa20         作者：刘敏，周芳，黄少伟，池汝安， 吴元欣， 王存文， 巨修练， 郭嘉， 黄齐茂 【关键词】  淫羊藿；,提取；,总黄酮；,正交设计摘要：目的研究淫羊藿总黄酮的提取工艺及产地不同的淫羊藿植株总黄酮在各部位的含量分布。方法用乙醇和水回流提取淫羊藿总黄酮；选取湖

2、北恩施及福建三明淫羊藿为原料，做单因素实验，再以淫羊藿总黄酮提取率为考察指标，作正交实验设计；采用紫外分光光度法测定淫羊藿总黄酮含量。结果以乙醇和水作为提取剂的提取率分别为70.5、31.1；恩施与三明所产的箭叶淫羊藿其淫羊藿总黄酮含量分别为：叶3.24，1.02；茎0.91，0.14；根2.47，0.61。结论湖北恩施所产的箭叶淫羊藿比福建三明所产的箭叶淫羊藿中总黄酮含量高；乙醇作提取剂的提取率明显高于水，影响淫羊藿总黄酮提取效果的主次因素为：溶剂浓度回流时间提取次数液固比。淫羊藿总黄酮的优化提取工艺为：液固比为121，以60%乙醇提取3次，1.5 h/次，优化工艺的总黄酮提取率达77.5。

3、关键词：淫羊藿；  提取；  总黄酮；  正交设计The Extraction Technology for Total Flavone and its Content Distribution in Herba EpimediumAbstract：ObjectiveTo study an extraction Technology for total flavone and to determine the content distribution in Herba Epimedium. MethodsThe extraction rate was compar

4、ed between ethanol extract and water extract. The optimum extractive conditions were investigated by orthogonal design and one-factor experiment. ResultsThe extraction rates with ethanol and water as extractants were 65.2%, 26.6%, respectively. The contents of Epimedium flavonoids from Enshi in root

5、, stalk and leaf were 3.24，0.91 and 2.43，respectively, while the ones from Sanming were 1.02, 0.14, 0.61, respectively. ConclusionThe factors which influence extraction rate are sorted as follows: ACDB, where A, B, C and D stands for the concentration of ethanol, the dosage of ethanol, extract time

6、and times of leaching, respectively. The optimum technology of extraction is as follows: 60% ethanol, twelve-fold leachant, 3 times extraction and 1.5 hours. The extraction rate is up to 77.5%. Key words：Epimedium；  Extraction；  Flavonoid；  Orthogonal design    淫羊藿Herba

7、 Epimdium为小檗科淫羊藿属植物，具有温心阳、通心脉、化淤血等功效1，其中主要有效成分是淫羊藿总黄酮（包括淫羊藿苷、淫羊藿次苷等），现代研究认为该总黄酮具有促进雄性激素分泌、降血压、扩张血管、增加冠脉流量、增强免疫功能和抗肿瘤等多种药理作用2。湖北恩施和福建三明地区淫羊藿资源丰富，但未见以该地区淫羊藿为原料的提取及测定方法研究，且文献3，4多报道淫羊藿叶中有效成分（以淫羊藿总黄酮计）含量最高，茎其次，根中最低，因此大多数提取工艺只采用淫羊藿地上部分（包括叶和茎）作为原材料，导致大量的根被丢弃，造成了巨大的资源浪费。本文从资源有效利用的角度出发，比较了恩施及三明地区所产箭叶淫羊藿的叶、茎、

8、根中淫羊藿总黄酮的含量，并比较了醇提与水提的提取率，同时采用正交设计实验优化了醇提工艺。1  仪器与材料1.1   仪器UVVIS 8500 紫外/可见分光光度计，电子分析天平 (AL204)，数显无级恒速搅拌器，SHZD（III）循环水式真空泵。1.2   材料淫羊藿，购自湖北恩施和福建三明，经湖北中药研究院王克勤研究员鉴定为箭叶淫羊藿；淫羊藿苷对照品,批号110737200312，中国药品生物制品检定所提供；甲醇（分析纯），乙醇（工业纯），双蒸水（自制）。2  方法2.1   分析方法2.1.1  标

9、准曲线的绘制称取淫羊藿苷对照品15.2 mg，用甲醇溶解于250 ml容量瓶中，配制成60.8 g/ml对照品溶液。分别移取对照品溶液0.0 ，0.5 ，1.0，1.5 ，2.5，3.5，4.5 ml置于10 ml容量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀。对浓度为15.2 g/ml的对照品溶液进行全波长扫描，测得270 nm处有最大吸收，因此于270 nm下测定上述各标准液的吸光度。以浓度（C）与吸光度（A）进行线性回归，得回归方程为A0.037 3C0.001 8，r0.999 9，在027.45 g/ml范围内呈线性关系57。2.1.2   样品溶液的制备取粗提物25 mg于50

10、 ml容量瓶中，加入甲醇约40 ml，超声使溶解充分，定容至刻度；取部分溶液离心，准确吸取离心后的溶液1 ml至10 ml容量瓶中，用甲醇稀释，定容，作为样品溶液备用。2.1.3   重复性实验将同一样品溶液连续测定其吸光度（A）6次，计算相对标准偏差为0.096，重复性良好。2.1.4   加样回收率实验分别吸取已知含量的样品溶液1  ml（10份）至09 10个25 ml容量瓶中，分别加入1 ml对照品溶液，以甲醇溶解并定容，测定吸光度，计算09样品回收率。各样品回收率均在98.6101.7之间，平均回收率100.2，相对标准偏差为0.99

11、，精确度良好。2.2  提取方法2.2.1   索氏回流提取湖北恩施、福建三明地区箭叶淫羊藿叶、茎、根中总黄酮分别取50 g淫羊藿植株的叶、茎和根的粗粉（200目）于索氏提取器中，用乙醇回流提取，直至提取液无颜色为止，提取液过滤，减压浓缩，干燥至恒重。后续实验均以恩施淫羊藿为原料。2.2.2  提取工艺2.2.3   单因素实验分别考察温度、溶剂种类、溶剂用量及时间对提取率的影响。2.2.4  醇提工艺的正交设计根据单因素实验，结合文献8报道，作 L9（34）正交设计9，因素水平表见表1。表1  正交设计因素水平表（略）3  结果3.1  淫羊藿植株不同部位总黄酮含量分布由于研究淫羊藿不同部位的有效成分含量对指导工业提取和农业栽培都具有重要意义，测定了淫羊藿植株不同部位总黄酮含量，其分布见表2所示。表2  湖北恩施与福建三明地区箭叶淫羊藿不同部位的有效成分含量及质量分数（略）由上述结果可知，淫羊藿叶的提取量最大，但提取的杂质也较多，造成提取物中有效成分含量较低；根的提取量较小，但有效成分含量很高；茎的提取量最小，有效成分含量也最低。从表中数据发现