植物化学保护试验指导

1、农药学 植物化学保护实验指导骆焱平杨叶华南热带农业大学植物保护学 院二OO三年十一月、八前言本实验指导是在九七年编写的?植物化 学保护实验指导?的根底上，根据华南热带 农业大学二 OO 二年制定的专业课程教学计 划和实验课程教学大纲的要求进行修订的。 该书在原实验指导的根底上，经过增加实验 工程、补充并修改局部内容后完成。全书共 分为三大局部：第一局部介绍农药方面的基 本知识，要求学生掌握常见农药的配制方法 和鉴别方法；第二局部介绍农药的室内生物 测定技术，即利用有害生物 或称靶标生物， 如昆虫、螨类、病菌、线虫、杂草、鼠类等 对农药的反响来测定农药的毒力和药效的基 本方法；第三局部介绍农药的

2、田间药效试验。 本书以?农药学? 、?植物化学保护?为理论 根底，是植物保护专业的必修课程，也是一 门实用性强的技术课程。通过实验，可验证、 稳固和充实理论教学，加深学生对理论知识 的理解，增强学生对病虫方面的实践操作能 力，以便在生产和科研上合理利用不同的测 定方法，开发新农药，新剂型，新的施药方 法。 本书可作为?农药学?、?植物化学保护?、?农 药生物测定技术? 、?农药剂型与加工?等课 程的实验指导。因此更名为?农药实验指导?。 本实验指导的任务是：1、采取实验教学的方法， 加深学生对理论 课的理解，掌握实验中的一般技术。2、注意与有关学科的配合， 如昆虫学、 病 理学、生物学、化学、

3、统计学等学科的衔接。3、突出学生的创新能力。 尽管我们付出了许多汗水， 但由于时间仓促， 加上编者水平有限，难免会出现一些缺点和 错误，希望大家批评指正，并提出珍贵的意 见和建议，以便逐步完善。化保教研组二OO三年十一月验知1第 一 部 分 农 药 的 基 本 知识 实 验 一 波 尔 多 液 的 配制2实 验 二 石 硫 合 剂 的 配 制3第 二 部 分 农 药 室 内 生 物 测 定 技术 实 验 三 孢 子 萌 发 试 验法4实 验 四抑 制 菌 圈法6实 验 五 生 长 速 率 测 定8实验六 抑制菌丝产生孢子囊及释放游动孢子试验10实验七 杀菌剂保护作用和治疗作用的测定离体叶片法1

4、0实验八 新杀菌剂防治橡胶炭疽病的田间药效试验13实 验 九 杀虫 剂 触 杀作用 毒 力 测疋实 验 十 杀 虫 剂 熏 蒸 作 用 的 测疋 17实 验十 一 杀虫 剂 胃毒 作 用 毒力 测 定18实 验 十 二 杀 虫 剂 内 吸 作 用 的 测 疋21实验十三 有机磷杀虫剂对胆碱酯酶活性的抑制22实 验十 四 杀虫 剂 对螨 类 的 毒力 测 定 25实验十五 杀虫剂对植物的药害试验植株 施药法26实 验十 六 杀虫 剂 的田 间 药 效试 验 28 实 验十 七 几种 有 机农 药 的 鉴定 方 法28第 三 部 分 农 药 田 间 药 效 试 验参考文 献实验须知本实验课程是以化

5、学、植物病理学、昆 虫学、杂草学、生物统计学等学科为根底， 以昆虫、病菌、杂草、农药等为研究对象， 是一门试验性很强的课程。本书主要以?农 药学?、?植物化学保护?为理论根底，是植 物保护专业的必修课程。学生在实验中必须 努力培养自己的独立工作能力，掌握根本操 作技术，通过实验加深对理论的理解，并运 用所学到的根本理论和根本技能为我国农业 现代化效劳。凡参加实验的学生必须严格遵守以下规 那么：1、凡参加实验的学生必须严格遵守 ?学生 实验手册?。2、实验前，学生必须预习实验指导书及相 关专业教材，了解每次实验的原理、实验方 法和具体操作步骤。3、学生在实验时应该独立思考，认真操 作，不许大声喧

6、哗。4、要保护仪器，节省药品、试剂等。5、损坏仪器设备， 必须登记， 并按照情节 轻重酌情赔偿。6、实验室内不准放置食物、吃东西或吸 烟。7、实验中要注意平安。 农药对高等动物均 有毒性，许多试剂也有定的毒性。且未经 允许不准任意携出实验室外，用过的废物一 律倒入指定的缸内，不准随便乱丢。实验中， 如发现药物中毒现象席报告教师， 以便急救。8、按时完成实验报告。 实验完成后， 按教 师要求 48 或 72 小时来检查结果，按时交实 验报告，实验成绩以 5 分制计。实验四 常见农药质量的简易鉴别 实验目的 ：掌握常见农药质量的简易鉴别方法。 实验器材 ：量筒、烧杯、移液管、滴管、药勺。实验药品:

7、敌敌畏EC乐果EC马拉硫磷EC功夫EC 保得EC乙草胺EC百菌清 WP多菌灵 WP硫磺粉、特 克多悬浮剂等 鉴别方法 :一 粉剂的鉴别1 外观 粉剂的外观应为疏松的细粉 无团块。 但凡 流动性差，结成快状物，或手捏成团，不易散开，说明这 些粉剂大多是存放时间过长或存放不当，造成减效或者失效。2 吸湿性 取药粉前，先查看粉剂包装袋外面有没有 潮湿的情况，如果有，是吸湿性大的表现。然后从袋里取 出一点药粉倒在一张白纸上，拿起白纸，用拇指和食指在 纸外面捏一下，如果粘成一片，说明这种药粉已吸潮；如 果仍旧是松散的细粉，说明是好的喷粉药剂。3 悬浮法 取 1g 农药参加到 100ml 水中， 搅拌 1

8、0min后，静置片刻，然后慢慢倒去上层90%左右的溶液，将剩下的溶液用重量的滤纸过滤，再将纸和沉淀物晒干或 烘干，称其重量，求出悬浮率。悬浮率 %=样品重 -沉淀物重 /样品重 *100 悬浮率在 30%以上为良好，证明可以使用。二 可湿性粉剂的鉴别1 外观 可湿性粉剂应为很细的疏松粉末，无团块。2 湿润法 称取被检验的农药样品1g ，轻轻撒在200ml 水面上，如果在 1min 内农药能够全局部散进入水中， 即为有效农药。如果长时间不能润湿而漂浮在水面上，那么 证明农药已经失效。3 悬浮法 取清水 1 杯，参加 1g 被检验的农药样品， 充分摇匀，静置 20-30min ，观察药品悬浮情况。

9、未变质农 药，粉粒极细，沉淀慢而少，整个药液浊而不清；如果杯 中少局部水清澈，大局部浑浊，那么还可使用；如果样品沉 淀快，而杯中大局部药液呈现半透明状，那么不能使用。4、 沉淀法 取 5g 药剂， 倒入杯中， 参加少量水， 调成 糊状，再加水搅拌，未变质的农药粉粒细，悬浮性好，沉 淀慢而少，已变质农药悬浮性不好，沉淀快而多。三、乳油的鉴别1、振荡法 首先看清瓶子内有无分层现象，如有分层 现象，说明乳化性能已经降低，可用力振荡均匀，静置一 小时，如果仍然分层，说明农药已经变质。2、兑水法 取清水 200ml 放在玻璃瓶中， 轻轻参加 1ml 待检验的乳油农药，乳化性能好的呈放射状向四周扩散， 静

10、置后，水面无浮油，水底无沉淀，呈乳白色液体，且均 匀一致，那么为正常乳油。如果外表有乳油或瓶底有沉淀， 那么说明药剂已变质。3、加热法 先把有沉淀的乳剂农药，连瓶放在50-55 C 的热水中，水浴 1h 后，沉淀能慢慢溶解，溶液均匀一致， 药效一般不减，说明农药可以使用；如果农药的沉淀物不 溶解，那么说明农药已经变质失效。四、悬浮剂的鉴别 悬浮剂应为略带粘稠的、 可流动的悬浮液， 其粘度非常小， 均匀。假设因长时间存放出现分层，经手摇动可恢复均匀状 态的，仍可视为合格产品。如果不能重新变成均匀的悬浮 液，底部沉淀物摇不起来，悬浮性能就不好。上述各种方法可简便地鉴别各农药剂型是否变质失 效，如要

11、进一步了解各农药制剂的真实含量有效成份 那么需将样品送到农药专门研究机构或农药检测机构进行分 析鉴定。 此外，用上述简易法鉴别农药的时候，千万注意农药的毒 性，不要把农药弄到手上，如果弄到手上或皮肤上，要立 即用水冲洗，对于粉剂农药，先用水冲洗后，再用肥皂洗 净，对于乳油农药要特别小心，赶快用清水冲洗，再用碱 水洗，最后用肥皂洗净。如果碰到农药，不久后感觉恶心， 要及时去医院请医生检查。盛过农药的器具要妥善处理， 不要再做其他用途。五、实验作业按要求完成老师布置的农药鉴别任务，记录实验过程中所观察的现象。判断哪些剂型是合格的。第二局部杀虫剂生物测定实验六杀虫剂触杀作用con tactactio

12、n 毒力测定根本原理是将一定浓度或剂量的杀虫剂施于虫体 的全部或局部适宜部位，使其虫体充分接触药剂而发挥 触杀作用。根据试虫及药剂剂特点，已被公认而普通应用 的方法有：1喷雾法及喷粉法；2 点滴法；3浸渍 法；4药膜法等。一、喷粉及喷雾喷雾器图9喷雾器测试方法：将盛 有目标昆虫的 喷射盒，喷射笼 或垫有湿滤纸 的培养皿，置于 液体喷布器底 部或喷粉罩底 盘上，定量的药液或粉剂均匀地直接喷撒到目标昆虫体上，待药液稍干或 虫体粘粉较稳定后，将喷过药的目标昆虫移入干净的容器 内或培养皿内，用通气盖盖好，置于适合于目标昆虫生育 的温湿度及通气良好的环境中恢复，1-2h后，放入无药的新鲜饲料，在规定时间

13、内12、24、48h,观察目标昆虫 中毒和死亡情况。常见装置有Potter喷雾器，真空喷粉器等。二、点滴法：根本原理:将一定量的药液点滴到供试目标昆虫体壁的一 定部位，来测定杀虫剂穿透表皮而引起昆虫中毒致死的触 杀毒力。每个试虫的某一部位都接受相同容积的药液，因 而同一处理的每个试虫实际接受的剂量相同。此法是杀虫 剂触杀毒力测定中最准确的方法。也是目前普遍采用的一 种测试技术。试虫范围:除了螨类等小型昆虫外，可应用于大多数目标昆虫的触杀毒力测定，如蚜虫、叶蜂、二化螟、玉米螟、 菜青虫、粘虫等。实验材料:微量注射1支、培养皿15cm6个、剪刀1把、 棉花、蜡笔等、无水乙醚供试药剂;95%敌百虫结

14、晶使用浓度:10; 2.5 ; 0.625 ; 0.156 ; 0.039ug/ M 丙酮 液供试方法:荔枝蝽蟓成虫，24头实验方法:用无水乙醇将试虫麻醉4min，使试虫处于麻醉状态，每头虫称重，并放在培养皿中编号培养皿用厚 纸皮十字交叉格开，每皿放4头，然后用微量注射器吸丙 酮药液点滴于试虫触角上，5微升/头虫，从低t高，对照 用丙酮，4头虫/浓度，自然枯燥后，经 1小时10min，观 察每头的死活情况用真实死亡表示或正常饲养24小时后观察实际死亡情况。结果的计算：先按 ug/g体重大小顺序排列5个小组 合并计算然后区分：厂生存组r生存局部致毒反响死亡咅中间组死亡组a中间组活虫剂量a中间组死

15、活虫剂量A=中间组活虫总数B=中间组活中总数LDso= A+E /2 单位：mg/g 体重或 ug/g 体重三、浸渍法immersion methord 浸渍法是一种测定杀虫药剂触杀毒力的室内测试技术。因 方法简单快速，不需要特殊仪器设备，常用于有效化合物 的筛选试验，被联合国食农组织FAO 推荐为蚜虫抗药性的标准测定方法。根本原理：用浸沾方法直接将供试杀虫剂施于昆虫体表， 测定药液穿透表皮引起昆虫中毒致死的触杀毒力。测试方法：将试虫如粘虫、家蚕直接浸入药液中， 或将试虫放在钢纱笼中，再浸渍；将试虫如蚜虫放 入附有铜网底的指形管中 直径2.5cm，长3cm然后浸入 药液中；蚜虫、红蜘蛛以及介壳

16、虫等，可以连同植物寄 主一起浸入药液。红蜘蛛有吐丝成球现象，药液不易均匀 沾湿体表影响结果。 可先将带有红蜘蛛的叶片置于豆苗 3 5 cm 高 上，待叶片枯萎时， 红蜘蛛自行迁移至豆叶片， 然后进行浸液。浸液一定时间后取出晾干，或用吸水纸吸 去多余药液，再移入干净器皿中大型昆虫，如粘虫、家 蚕等需放入新鲜饲料 ，置于适宜的温湿度及通气良好的环 境中，隔一定时间12h, 24h、48h观察记载死亡情况， 计算死亡率或校正死亡率求得致死中浓度。幼虫，对 杀虫剂较敏感，常用此法进行大量化合物初筛，或用来进 行杀虫剂残留量的生物分析。四、药膜法： 根本原理：将一定量的杀虫药剂，采用浸沾、点滴、喷洒 等

17、方法施于物体外表上，形成一个均匀的药膜，然后放入 一定量的供试目标昆虫，让其爬行接触一定时间后，再移 至正常的环境条件下，在规定时间内观察试虫的中毒死亡 反响，计算击倒率或死亡率。亦可让试虫和药膜长时间接 触而观察试虫的击倒时间、直到全部试虫被击倒，求出击 倒率，比拟毒力。还可将形成的药膜，放置不同时间，经 受光照、雨淋等处理，然后再让试虫接触，这样可测得残 效结果。制做药膜的方法有蜡膜法，滤纸药膜法及玻璃药 膜法。4.1 、蜡纸药膜法：实验材料：药剂： 6六六六粉，用滑石粉稀释成所需浓度。试虫：赤拟谷盗或粘虫幼虫用具：培养皿 9cm15个，蜡纸$ cm30片方法：将 6六六六粉剂用滑石粉稀释成 3%， 1.5%， 0.7%， 0.38%六六六粉，各称取100mg倒在蜡纸正面中央， 两手执 边使药粉在中间移动数次，均匀分布在蜡纸上，然后将多余药粉倒回原处，再轻轻地弹动反面23下，即成蜡纸药膜，对照用滑石粉制药膜，每处理重复三次，取试虫2030 头同时放在药膜上， 用培养皿盖好，培养皿盖也放一张 蜡纸药膜，待虫爬行一定时间 30 60min 后，观察击 倒数，计算平均击倒率。4.2 、滤纸药膜法：实验材料：药剂： 50%杀螟松