传代培养及细胞计数_第1页
传代培养及细胞计数_第2页
传代培养及细胞计数_第3页
传代培养及细胞计数_第4页
传代培养及细胞计数_第5页
已阅读5页，还剩11页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、整理ppt1动物细胞工程实验传代培养及细胞计数传代培养及细胞计数整理ppt2实验目的掌握传代培养的一般方法和步骤以及培养过程中的无菌操作技术。熟悉培养细胞的观察方法。学习血球计数板的计数方法。整理ppt3实验原理u细胞在培养皿长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。u传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分皿就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分皿。整理ppt4实验用品u仪器：培养箱（调整至37）、培养皿、超净工作台、倒置相差显微镜。u材料：卵巢癌细胞HO-8910。u试剂：164

2、0培养基（含血清10%）、0.25%胰蛋白酶、75%消毒酒精。整理ppt5实验步骤实验前将无血清培养基和含血清培养基分装并进行温育（37）。以温度计实际显示温度为准！整理ppt6实验步骤将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。整理ppt7实验步骤用不含血清1640培养基冲洗细胞。整理ppt8实验步骤将无血清培养基吸出，加入0.25胰蛋白酶溶液1ml，使细胞都浸入溶液中。整理ppt9实验步骤消化30-40s后，弃去胰酶，加入含血清1640培养基2ml，终止消化，并充分吹打。吹打后将悬浮起来的细胞转移到15ml离心管中，1000rpm离心5min。整理ppt10实验步骤离心后，弃上清，加含血清164

3、0重悬，混匀，取50ul用于细胞计数。整理ppt11整理ppt12实验步骤血球计数板的计数原理整理ppt13实验步骤根据细胞计数的结果，用含血清的培养基调整细胞浓度到1X105个/ml。分至两个培养皿中，做好标记，继续培养。整理ppt14实验完毕，将培养基瓶口迅速过酒精灯火焰消毒，拧紧后，封口膜密封。拿出超净台，放入冰箱。实验后，请将超净工作台内擦拭干净，酒精喷洒消毒，并将酒精擦干净，打开紫外灯灭菌。用过的离心管和血球计数板须清洗干净。各个实验小组的同学负责将垃圾带走，值日生打扫实验室卫生。实验步骤：9、实验后的整理工作整理ppt15实验报告试述传代培养的步骤和注意事项，并指出哪些是关键步骤。l传代培养时要注意严格的无菌操作，并防止细胞之间的交叉污染。l酶解消化要适度，消化过度会对细胞造成损害，消化不够则难于将细胞解离下来。l传代后第2-3天观察细胞生长情况，了解细胞是否健康生长：健康细胞的形态饱满，折光性好。l掌握好代传代时机：健康生长的细胞生长

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 辅导培训

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论