第二组伊利牌小布丁雪糕中还原糖的测定

1、伊利牌小布丁雪糕中还原糖的测定一、实验目的掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用直接滴定法测定还原糖的 方法。二、实验原理试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲基蓝作指示剂，滴 定标定过的碱性酒石酸溶液，根据样品液消耗体积计算还原糖含量。 三、仪器设备电热恒温水浴锅、调温电炉(带石棉板)、250ml锥形瓶、滴定管、 分析天平、容量瓶、移液管四、实验材料1、试剂(1)碱性酒石酸铜甲液： 称取15g硫酸铜(CuSO- 5H。及0.05g 亚甲基蓝，溶于蒸储水中并稀释到1000ml。(2)碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g NaOH溶于蒸储水中，再加入4g亚铁富化钾(Fe (CN 6，完全

2、溶解后，用蒸储水稀释到1000ml,贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。(3) 0.1 %葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经98100c干燥至恒重的无水葡萄糖，加蒸储水溶解后加入 5ml盐酸，并用水稀释 定容至1000ml。(4)乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌。吸取3ml冰醋酸，加水溶解定容到100ml(5) 10.6%亚铁富化钾溶液：称取10.6g亚铁富化钾，加水溶解定容到100ml。2、材料伊利牌小布丁雪糕(购于超市)五、样品预处理准确称取2.5-5g雪糕，置于250ml容量瓶中，加水50ml,摇匀后 慢慢加入5ml乙酸锌及5ml亚铁富化钾溶液，并加水至刻度，摇匀， 静置30分钟。过滤，弃去初滤

3、液，收集续滤液备用。六、检测步骤1、斐林试剂的标定准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各 5.00ml ,置于250ml锥形瓶 中，加蒸储水10ml,加玻璃珠3粒。从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准 溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s,趁热以每2s 1滴的速 度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。 记录消 耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作 3次，取其平均值，按下式计 算：F=cV式中：F10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mgC 葡萄糖标准溶液的浓度，mg/ml;V标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml。2、样品测定(1)样品溶液预测定：吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各

4、5.00ml,置于250ml锥形瓶中，加蒸储水10ml,加玻璃珠3粒，加热使其在2min 内沸腾，准确沸腾30s,趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样 品溶液，滴定时要保持溶液呈沸腾状态。待溶液由蓝色变浅时，以每2s 1滴的速度滴定，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点。记录 样品溶液消耗的体积。 样品溶液测定：吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00ml,置于锥形瓶中，加玻璃珠3粒，从滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总 体积少1ml的样品溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s, 趁热以每2s 1滴的速度滴定，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积，同法平行 3次，取平均值。七、结

5、果计算还原糖(以葡萄糖计，%=FX 100/m x (V/250) x 1000 式中：m样品质量，g;F10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mgV测定时平均消耗样品溶液的体积，ml;250样品溶液的总体积，ml;注：还原糖含量n 10g/100g时，计算结果保留三位有效数字； 还原糖含量 10g/100g,计算结果保留两位有效数字。八、数据记录表(1)斐林试剂的标定测定次数123葡萄糖标准溶液浓度（mg/ml）标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积（ml）F (mg（2）样品的测定测定次数123标定碱性酒石酸铜溶液所消耗的葡萄糖标准溶液的体积/mlF （10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量）/mg测定时消耗样品溶液的量/ml平均消耗样品溶液的量/ml样品还原糖的含量（为九、注意事项（1）滴定必须是在沸腾条件下进行，其原因一是加快还原糖与CL2十的反应速度；二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的，还原型的 亚甲基蓝遇空气中的氧时会再被氧化为氧化型。止匕外，氧化亚 铜也极不稳定，易被空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防 止空气进入，避免亚甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。（2）滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来 滴定，以防止空气进入反应溶液中。