清洁分析方法(TOC)验证方案

1、清洁验证分析方法(TOC)验证方案方案批准审批公司/职务姓名签名日期编写人审核人批准人版本日期 修订原因 00新制订目录1.介绍42.目的43.范围43.1范围内43.2范围外44.职责44.1奥星职责44.2名称药业职责55.缩略语66.法规指南76.1法规76.2指南77.参考文件88.方法描述98.1测定方法描述98.2规程108.3限度119.验证设计129.1验证不确定性控制措施129.2潜在风险清单129.3试验设计1310.文件管理规范1511.测试项目列表1712.测试描述和可接受标准1812.1人员确认1812.2仪器/设备确认和校准确认1812.3文件确认1912.4标准品

2、/试剂确认1912.5样品确认2012.6系统适用性确认2012.7专属性确认2112.8精密度确认2112.8.1方法重复性确认2112.9准确度测试2212.10溶液稳定性确认2312.11耐用性确认2413.偏差处理2514.变更控制2515.验证报告2516.附件清单2517.支持性附件清单2518.测试报告251. 介绍名称 生物工程有限公司（以下简称“名称”）是名称生物制药集团的核心企业。公司重点发展名称 药物。在名称车间所有工艺设备、HVAC系统、水系统及公用系统等完成性能确认后，将进行名称产品的清洁验证。在进行清洁验证前，必须完成清洗验证相关的分析方法验证。名称规定对于清洁残留

3、物质使用TOC方法进行检测和控制。本方案为名称清洁验证方案（方案编号：名称，版本：名称）的支持方案，目的是建立文件记录证明清洁验证总有机碳（TOC）分析方法符合残留物质测定的预期要求。2. 目的本清洁验证方案的目的是为了确认和记录用于清洁验证的TOC检测方法符合预期要求, 证明TOC方法用于清洁后残留物质分析的可重复性及可信赖性。3. 范围3.1 范围内本方案适用于清洁验证后表面残留物质的TOC测定方法。3.2 范围外 微生物残留测定不包含在本方案内。 取样方法回收率验证不包含在本方案内。4. 职责4.1 奥星职责 编制验证方案4.2 名称药业职责 执行前审核和批准本方案 提供在方案执行中所需

4、仪器的校准证书 标准品/试剂/物料/样品确认 方案的实施，数据的收集 针对不一致项界定解决方法 偏差报告的编写 最终报告的编写 审核和批准报告5. 缩略语在下面的表格中规定了本方案中使用的缩略语。缩略语定义ICHThe International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use 人用药药品注册国际技术要求FDAFood and Drug Administration 美国食品药品监督管理局RSDRelative Stan

5、dard Deviation 相对标准偏差COACertificate of Analysis 检验报告单MSDSMaterial Safety Data Sheet 化学安全数据说明书SDStandard Deviation 标准偏差TOCTotal Organic Carbon总有机碳PIC/SPharmaceutical Inspection Co-operation Scheme 药品监管公约SOPStandard Operation Procedure 标准操作规程TLCTotal inorganic Carbon 总无机碳NLTNot More Than 不多于6. 法规指南为了编

6、写本方案，参考了以下文件：6.1 法规 国家食品药品监督管理局（SFDA），中国，药品生产质量管理规范（2010年修订），2011 年03月 国家药典委员会，中国，中国药典（CP）2010年版，2010年01月 美国药典委员会，美国，美国药典（USP）第36版，2013年6.2 指南 人用药药品注册国际技术要求 质量部分：分析方法验证 美国食品药品监督管理局，美国，清洁工艺验证检查指南(1993年7月) PDA技术报告29-清洁验证考虑因素7. 参考文件为编写本方案，参考了以下文件：文件名称文件编号版本生效日期验证总计划文件管理SOP偏差处理SOP变更控制SOPTOC总有机碳分析仪操作、维护保

7、养标准操作规程分析方法验证管理程序8. 方法描述8.1 限度描述 总有机碳可接受限度的计算参照 名称SOP(文件编号：名称，版本：名称), 计算 总有机碳可接受限度结果为数量 ppm。产品使用设备TOC（ppm）擦拭法淋洗法名称名称数量数量（最终淋洗水）8.2 方法描述 标准品溶液制备描述样品溶液制备描述仪器操作参数描述参数数值 样品体积 酸试剂体积 过硫酸钠试剂体积 TIC 反应时间 TIC 检测时间 TOC 反应时间 TOC 检测时间每次重复之间的清洗次数每个样品之间的清洗次数清洗体积可接受标准描述9. 前期准备9.1 材料准备9.1.1 玻璃器具用含氢氧化剂的碱性清洁剂严格清洗后，然后用

8、检查用水清洗至少3次。清洗后器具应在24小时内使用，使用前使用样品溶液润洗至少1次。9.2 总有机碳检查用水 取TOC0.10 mg/L，电导率1.0 S/cm（25 ）纯化水或超纯水即可。9.3 溶液制备9.3.1 蔗糖标准品溶液：取经105C干燥至恒重的蔗糖标准品适量，精密称定，加总有机碳检查用水溶解并稀释制成每升中约含1.2 m g 的溶液 (含碳0.50mg/ L )。9.3.2 系统适用性溶液：取1 , 4 - 对苯醌标准品适量，精密称定，加总有机碳检查用水溶解并稀释制成每升中含0. 75mg的溶液(含碳0.50mg/ L )。9.3.3 过硫酸钠氧化剂溶液：精密称定100 克过硫酸

9、钠（Na2S2O8）溶于1 升检查用水，混匀。9.3.4 磷酸溶液：在总有机碳检查用水中混合100 ml的磷酸（85 %），然后使用总有机碳检查用水稀释至500ml，混匀。9.3.5 标准品储备溶液：参照指定方法，准确称量定量的标准品溶于检查用水，获得标准品浓度为1mg/ml的溶液。9.3.6 标准品工作储备溶液：按照规定的方法，用检查用水稀释储备溶液，配制成一个工作储备溶液（数量 g/ml 的标准品）。通过稀释这个工作储备溶液，得到一系列样品。9.3.7 其它控制溶液：准备溶剂空白溶液或其它指定溶液以建立设备基线。9.4 分析仪器适用性9.4.1 分别取总有机碳检查用水，蔗糖标准品溶液和系统

10、适用性溶液依法检测，记录响应值。按照下式计算系统适用性溶液相应效率： 其中：Rw: 总有机碳检查用水的响应值Rs: 蔗糖标准品溶液的响应值Rss: 1，4-对苯醌标准品溶液的响应值 如果1，4-对苯醌的响应效率值应在85%115%则说明系统适用。10. 验证设计10.1 验证不确定性控制措施 如果没有其它要求，下列操作和条件应被控制在要求的限度内，以控制验证不确定性。操作/条件限度称重10%内容量瓶，刻度移液管符合要求级别，容量不确定性可忽略刻度吸管或tip头使用容量应大于满容量的10%温度2内pH0.05 单位内时间5%内10.2 试验设计 进行方法验证的标准品应与工艺实际残留物质的性质接近

11、。标准品的碳含量应明确。本TOC 检验方法将用于检测A制剂生产设备表面残留的总有机碳含量，为低浓度杂质定量方法。参照ICH Q2B验证参数包括：系统适用性，线性，准确度，精密度，检测限，定量限，残留效应。验证测试项目设计如下： 验证参数可接受标准表格系统适用性响应值的RSD2%表格5线性R2应0.97表格6检测限和定量限检测限和定量限均应低于残留可接受限度值表格7重复性6个测得碳浓度值的RSD5%表格8准确性回收率应为85%-115%表格9残留效应两条回归曲线的相关系数的差异小于2%表格1011. 文件管理规范记录用笔： 使用黑色签字笔记录。签名： 被授权的人员才能签署文件。 应签全名，除非文

12、件另有规定。 签名应始终一致。填写栏目： 所有栏目必须填写。 填写内容与上面栏目相同也应重新填写。 填写栏目内容，应按照实际测试情况，对测试结果使用对勾“”填写，只能选择一种测试结果填写。 如下： 文件名称是否完整可读高效液相色谱方法验证方案 是 否 若有单个栏目不需要填入内容，则在空白处填写英文字母“不适用”的简写“N/A”，表示无此项内容。 若有多个栏目不需要填入内容，应用斜线划掉，斜线上方填写“N/A” ，下方签名并注明日期。 如下：N/A签名 日期更改错误： 在错误处划线，填入正确的内容，签名并注明更改日期，确保原先信息仍清晰可识别。 如：2012年01月02日 修改人签名和修改日期

13、2012年01月01日 记录日期： 年用4位数表示，日和月用2位数表示如：2012年09月01日书面语及名称： 使用规范的书面语及名称。- 文件前后名称要一致。12. 测试项目列表在下面的表格列出了本方案将要执行的测试。编号名称12.1人员确认12.2仪器/设备确认和校准确认12.3文件确认12.4标准品/试剂确认12.5系统适用性确认12.6线性和范围确认12.7检测限和定量限确认12.8重复性确认12.9中间精密度确认12.10准确性确认12.11残留效应确认12.12溶液稳定性确认13. 测试描述和可接受标准13.1 人员确认 目的确认所有执行本方案的人员符合要求。 程序l 列出所有执行

14、本方案的人员（姓名、部门、职位）。l 在验证程序开始前，对所有参与测试的人员进行方案和相关技能培训，培训应该有记录。l 执行方案人员本人在签名处使用黑色签字笔书写本人签名以及日期。 可接受标准l 所有执行本方案人员本人使用黑色签字笔正确书写本人签名及日期。l 所有执行本方案的人员（已经过方案和相关技能培训并已记录。 测试报告测试结果填写在测试报告1人员确认表内。13.2 仪器/设备确认和校准确认 目的保证使用的仪器/设备都已经过验证和校准，并有文件记录。 程序l 列出所有设备清单（仪器类型，检测器，柱型号等）和设备参数（流速，温度，运行时间等）。l 在测试报告2仪器/设备确认和校准确认中对每一

15、台测试所用的仪器仪表应标识出仪器/设备名称、编号、型号、用途、确认文件编号、校准日期、下次校准日期。l 复印检查过的校准证书，签上姓名和日期，附在报告中。 可接受标准l 测试使用仪器仪表均经过确认和校准，且在有效期内。l 用于校准的计量标准应该能够追溯到中国国家计量基准或相当的国际标准。l 所有确认和校准有文件记录。 测试报告测试结果填写在测试报告2测试仪器仪表校准确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。 13.3 文件确认 目的确认验证相关的SOP和验证方案是否完成及其状态。 程序l 在测试报告3文件确认中记录验证所需要文件名称、文件编号、版本，存放位置和文件状态。l 检查本验证方案的批准状态。

16、 可接受标准l 文件放置在相应操作现场适当的区域；l 文件已经过批准，并且是现行版本，以保证准确性。l 本验证方案已经批准。 测试报告测试结果填写在测试报告 3文件确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。 13.4 标准品/试剂确认 目的确认使用的标准品、试剂和物料的适用性。 程序l 列出试剂及纯度清单。 内部或修饰过的试剂应包含制备说明，明确不稳定或有害试剂，具备化学品安全数据说明书（MSDS）。l 检查标准品的来源/批号/有效期/保存条件，非官方标准品提供检验报告单。 可接受标准所有标准品/试剂来源可靠，存放在需要的条件下，可提供标准品证书，化学品安全数据说明书和检验报告单，均在有效期内。 测

17、试报告测试结果填写在测试报告 4标准品/试剂确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。 13.5 系统适用性确认 目的确认测试系统的适用性。 程序制备浓度为100%可接受限度的标准品溶液重复进样6次，记录响应值、碳浓度(ppm），计算响应值的RSD。 可接受标准6次响应值的RSD2%。 测试报告测试结果填写在测试报告5 系统适用性确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。13.6 线性和范围确认 目的 确认方法在给定范围内检测结果与样品中碳浓度呈比例关系的能力。 程序制备定量限至200%计算限度的6份标准品溶液(定量限，25%, 50%，100%，150% 和 200%可接受限度)，制备空白样品（仅包含检

18、查用水），依法检测。空白溶液进样3次，标准溶液每个浓度进样6次。将检测所得总有机碳响应值与其对应的碳浓度进行线性拟合，计算R2值。 可接受标准 各个浓度响应值的RSD应不超过3%。 R2应0.97。 测试报告测试结果填写在测试报告6线性和范围确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。13.7 检测限和定量限确认 目的基于适当数量的空白的响应值标准偏差和标准曲线的斜率，确认测试系统的适用检测限和定量限的测定。 程序将10个已清洁玻璃小瓶中灌满检查用水，每个小瓶依法测试2次，记录响应值。取2个结果平均值。计算10个空白小瓶的平均测定值的标准偏差。检测限计算公式： 定量限计算公式： 其中，: 空白响应值的

19、标准偏差 可接受标准 检测限和定量限均应低于计算限度值。 测试报告测试结果填写在测试报告7检测限和定量限确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。13.8 重复性确认 目的确认同样操作条件下，较短时间间隔的精密度。 程序重复制备6份浓度为100%可接受残留限度的标准品溶液，每份溶液进样1次，记录响应值、碳浓度，计算测得碳浓度值的RSD。 可接受标准6个测得碳浓度值的RSD5%。 测试报告测试结果填写在测试报告8重复性确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。13.9 中间精密度确认 目的该测试用以确认方法在不同试验者，不同测试日期和不同仪器时的变异。 程序不同操作者重复制备6份浓度为100%可接受残留限度

20、的标准品溶液，在不同天并采用不同TOC仪进行检测，计算测得碳浓度值及测得碳浓度值之间的RSD，并与方法重现性测得碳浓度值结果进行比较。 中间精密度测试条件参数变化重复性中间精密度分析日期2013/1/202013/1/21实验者TOC仪 可接受标准中间精密度测得6份样品的测得碳浓度的RSD应2.0%，中间精密度与方法重现性测得结果的差别应5%。 测试报告测试结果填写在测试报告9中间精密度确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。13.10 准确性确认 目的该测试用以确认方法测定值与真实值的接近程度。 程序空白（检查用水）以及定量限、50%、100%、150%可接受限度的标准品溶液，每个浓度制备3份，

21、每份溶液进样3次，记录响应值、理论碳浓度。计算回收率及平均回收率。 计算：其中： 测量碳浓度：测得碳浓度；加样碳浓度: 制备碳浓度（理论碳浓度）。 可接受标准 回收率均为85%115%；平均回收率应为85%115%。 测试报告测试结果填写在测试报告10准确性确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。13.11 残留效应确认 目的确认样品残留对方法影响的程度。 程序使用线性试验一组样品（包含检查用水）每份溶液测量1次，样品首先以从低 到高浓度的顺序分析，然后以从高到低浓度的顺序分析，记录响应值，计算测得碳浓度，并分别计算2个序列下测得碳浓度与加样碳浓度的回归曲线。 碳浓度计算公式： 可接受标准两条回归

22、曲线的相关系数的差异小于2%。 测试报告测试结果填写在测试报告11残留效应测试表内，如有偏差记录在偏差报告中。13.12 溶液稳定性确认 目的 确认供试品溶液在测试环境下一定时间内的稳定性。 程序将清洁验证的供试品溶液在要求的环境下放置12、24、36小时后进样检测，记录谱图并与0小时的结果进行比较。测试时间应包含通常的测试运行周期。 可接受标准 4个测试时间下，测得碳浓度RSD应不高于2%。 测试报告 测试结果填写在测试报告 12溶液稳定性确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。14. 偏差处理如验证执行过程中出现任何偏差，需按照名称 SOP，文件编号名称，版本：名称处理。对验证中出现每个偏差都

23、要给予一个唯一的编号并记录在偏差报告里。在偏差清单（测试报告名称）中汇总所有的偏差，并注明解决日期。如有需要可复印偏差报告。15. 变更控制如验证过程中存在变更，需按照名称SOP文件，文件编号：名称，版本：名称进行控制并提交报告，变更控制表将被收集。16. 验证报告执行本方案并完成了纠正措施之后，将生成一份最终报告。将编写对所获得结果的总结，并根据这些结果得出结论。由负责验证的审核人及批准人做出正式的接受/拒绝验证结果的决定。报告将包括签批页、测试结果总结、偏差处理、变更控制、验证结论和建议、测试记录、附件清单和支持性附录清单组成。17. 附件清单在附件清单中记录所有附在本方案中的测试报告，注

24、明附件编号、测试报告号、名称和页数。18. 支持性附件清单在支持性附录清单中记录所有对测试报告数据进行支持的各类文件，如：培训记录、校准证书、各种图表等文件。应注明附录编号、名称和页数。附录编号可遵循附录所属附件号码，即所属附件1的附录即为附录1。如附件中仅有一个附录，则以附录所属附件编号表示，例如：附录1，附录4。如一个附件中包含多个附录，可按顺序进行编号，例如：附录1-1，附录1-2。名称为此附录的名称。页数为此项附录所包含所有页数。19. 测试报告按照本方案中的测试项目设置，测试报告为：测试报告1人员确认目的确认所有执行本方案的人员符合要求。程序列出所有执行本方案的人员（姓名、签名、/部

25、门、职位）。在验证程序开始前，对所有参与测试的人员进行方案和相关技能培训，培训应该有记录。执行方案人员本人在签名处使用黑色签字笔书写本人姓名。可接受标准所有执行本方案人员本人使用黑色签字笔正确书写本人签名及日期。所有执行本方案的人员已经过方案和相关技能培训并已记录。序号姓名签名部门职位是否经过培训培训记录日期1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11.12.测试报告2 仪器/设备确认和校准确认目的保证使用的仪器/设备都已经过验证和校准，并有文件记录。程序列出所有设备清单（仪器类型，检测器，柱型号等）和设备参数（流速，温度，运行时间等）。在测试报告2仪器/设备确认和校准确认中对每一台测试所用

26、的仪器仪表应标识出仪器/设备名称、编号、型号、用途、确认文件编号、校准日期、下次校准日期。复印检查过的校准证书，签上姓名和日期，附在报告中。可接受标准测试使用仪器仪表均经过确认和校准，且在有效期内。用于校准的计量标准应该能够追溯到中国国家计量基准或相当的国际标准。所有确认和校准有文件记录。序号仪器/设备名称编号型号用途确认文件编号确认有效期校准日期下次校准日期结果确认人签字/日期1.合格 不合格2.合格 不合格3.合格 不合格备注/偏差/支持性文件：结论：合格 不合格执行人签字/日期审核人签字/日期测试报告3 文件确认目的确认验证相关的SOP和验证方案是否完成及其状态。程序在测试报告3文件确认

27、中记录验证所需要文件名称、文件编号、版本，存放位置和文件状态。检查本验证方案的批准状态。可接受标准文件放置在相应操作现场适当的区域；文件已经过批准，并且是现行版本，以保证准确性。本验证方案已经批准。序号文件名称文件编号版本存放位置文件状态确认人签字/日期1. 批准 未批准2. 批准 未批准3. 批准 未批准4. 批准 未批准备注/偏差/支持性文件：结论：合格 不合格执行人签字/日期审核人签字/日期测试报告4标准品/试剂确认目的确认使用的标准品和试剂的适用性。程序列出试剂及纯度清单。 内部或修饰过的试剂应包含制备说明，明确不稳定或有害试剂，具备化学品安全数据说明书（MSDS）。检查标准品的来源/

28、批号/有效期/保存条件，非官方标准品提供检验报告单。可接受标准所有标准品/试剂来源可靠，存放在需要的条件下，可提供标准品证书，化学品安全数据说明书和检验报告单，均在有效期内。序号名称来源批号纯度有效期保存条件证书/检验报告安全数据说明书确认人签字/日期1. 合格 不合格 合格 不合格2. 合格 不合格 合格 不合格3. 合格 不合格 合格 不合格4. 合格 不合格 合格 不合格5. 合格 不合格 合格 不合格6. 合格 不合格 合格 不合格备注/偏差/支持性文件：结论：合格 不合格执行人签字/日期审核人签字/日期测试报告5 系统适用性确认目的确认测试系统的适用性。程序制备浓度为100%可接受限

29、度的标准品溶液重复进样6次，记录响应值、碳浓度（ppm），计算响应值的RSD。可接受标准响应值的RSD2%响应值的RSD2%。总有机碳检查用水检测结果名称12平均值要求结论确认人签字/日期电导率（s/cm）1.0 S/cm（25 ） 合格 不合格 总有机碳（mg/L）0.10 mg/L 合格 不合格 系统适用性检测结果溶液123均值结果要求合格/不合格确认人签字/日期rss响应效率值应在85%115%合格不合格 rw合格不合格rs合格不合格 系统适用性检测结果样品123456响应值平均值标准偏差RSD相对标准偏差(%)备注/偏差/支持性文件：结论：合格 不合格执行人签字/日期审核人签字/日期测

30、试报告6线性和范围确认目的确认方法在给定范围内检测结果与样品中碳浓度呈比例关系的能力。程序制备定量限至200%计算限度的6份标准溶液(定量限，25%, 50%，100%，150% 和 200%可接受限度)，制备空白样品（仅包含检查用水），依法检测。空白溶液进样2次，标准溶液每个浓度进样6次。将检测所得总有机碳响应值与其对应的碳浓度进行线性拟合，计算R2值可接受标准各个浓度响应值的RSD应不超过3%；R2应0.97。线性检测结果序号名称对照品浓度(ppm/ppb)理论碳浓度（ppm/ppb）响应值平均值RSD (%)确认人签字/日期检测用水定量限25%50%100%150%200%线性公式R2线

31、性曲线图范围结论方法在碳浓度 范围内与响应值呈线性正相关。备注/偏差/支持性文件：结论：合格 不合格执行人签字/日期审核人签字/日期测试报告7检测限和定量限确认目的基于适当数量的空白的响应值标准偏差和标准曲线的斜率，确认测试系统的适用检测限和定量限的测定。程序将10个已清洁玻璃小瓶中灌满检查用水，每个小瓶依法测试2次，记录响应值。取2个结果平均值。计算10个空白小瓶的平均测定值的标准偏差。根据公式计算检测限和定量限。可接受标准检测限和定量限均应低于计算限度值。线性检测结果序号样品理论碳浓度（ppm/ppb）响应值平均相对标准偏差（RSD ）检测限（LOD）定量限（LOQ）确认人签字/日期123

32、45678910备注/偏差/支持性文件：结论：合格 不合格执行人签字/日期审核人签字/日期测试报告8重复性确认目的确认同样操作条件下，较短时间间隔的精密度。程序重复制备8份浓度为100%可接受残留限度的标准品溶液，每份溶液进样1次，记录响应值值、碳浓度，计算测得碳浓度值的RSD。可接受标准6个测得碳浓度值的RSD5%。重复性检测结果序号样品理论碳浓度（ppm）响应值测得碳浓度（ppm）平均值标准偏差（SD）相对标准偏差（RSD）确认人签字/日期备注/偏差/支持性文件：结论：合格 不合格执行人签字/日期审核人签字/日期测试报告9中间精密度确认目的该测试用以确认方法在不同试验者，不同测试日期和不同仪器时的变异。程序不同操作者重复制备6份浓度为100%可接受残留限度的标准品溶液，在不同天并采用不同TOC仪进行检测，计算测得碳浓度值及测得碳浓度值之间的RSD，并与方法重现性测得碳浓度值结果进行比较。可接受标准中间精密度测得6份样品的测得