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文档简介

1、2021/6/71磺胺嘧啶钠在家兔体内的磺胺嘧啶钠在家兔体内的药物代谢动力学药物代谢动力学2021/6/72【实验目的】【实验目的】测定磺胺嘧啶钠测定磺胺嘧啶钠(SD-NA)(SD-NA)单次快速单次快速静脉注静脉注射后在家兔体内不同时间的血药浓度,并求算动力射后在家兔体内不同时间的血药浓度,并求算动力学参数。学参数。【实验原理】【实验原理】 SD-NA+NaNOSD-NA+NaNO2 2 重氮盐重氮盐+ +麝香草酚麝香草酚 偶氮化合物偶氮化合物 注意:注意:加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒!加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒!【实验器材】【实验器材】磺胺嘧啶钠注射液,三氯醋酸,麝香草磺

2、胺嘧啶钠注射液,三氯醋酸,麝香草酚之氢氧化钠溶液,亚硝酸钠溶液酚之氢氧化钠溶液,亚硝酸钠溶液, , 试管架,普通试管架,普通干燥试管,小漏斗,干燥试管,小漏斗,10ml10ml、5ml5ml、1ml1ml注射器,注射器,10ml10ml、5ml5ml移液管,滤纸,三棱针,移液管,滤纸,三棱针,721721分光光度计。分光光度计。【实验动物】【实验动物】家兔家兔 2 23kg3kgNaOH三氯醋酸三氯醋酸( (橙红色橙红色) )2021/6/73【实验方法】【实验方法】1.1.标记试管标记试管: :取取10ml10ml试管试管1818支,分为支,分为3 3排,每排排,每排6 6只,分别标记只,分

3、别标记0 05 5号。号。2.2.加三氯醋酸:在第加三氯醋酸:在第1 1排的试管各加排的试管各加7.8ml7.8ml。3.3.固定动物固定动物: :家兔称重,装入兔盒,固定其头部。被毛,家兔称重,装入兔盒,固定其头部。被毛,一侧给药,一侧给药,一侧取血。一侧取血。4.4.给药前取血给药前取血: : 0.2ml 0.2ml,取血前用,取血前用枸橼酸钠枸橼酸钠润洗注射器!使三棱针润洗注射器!使三棱针垂直于耳缘静脉刺破血管,血液自然流出,用垂直于耳缘静脉刺破血管,血液自然流出,用1ml1ml注射器注射器吸取血吸取血液液0.2ml0.2ml;注入加有;注入加有三氯醋酸三氯醋酸的第的第1 1排排0 0号

4、试管,充分摇匀,静置。号试管,充分摇匀,静置。5.5.给药给药: SD-NA : SD-NA 2ml/kg2ml/kg(0.4g/kg0.4g/kg),耳缘静脉,单次快速),耳缘静脉,单次快速, ,计时。计时。6.6.给药后取血给药后取血: : 药后药后5min5min、10min10min、15min15min、30min30min、45min45min,同同4 4法法取血。取血。7.7.过滤:待过滤:待0 05 5号试管液体分层后,分别过滤到对应编号的第号试管液体分层后,分别过滤到对应编号的第2 2排排试管。试管。2021/6/74【实验方法】【实验方法】8.8.显色:取滤液显色:取滤液4

5、.5ml4.5ml放入第放入第3 3排的试管,依次加排的试管,依次加亚硝酸钠亚硝酸钠0.5ml0.5ml,摇匀后加入摇匀后加入麝香草酚之氢氧化钠麝香草酚之氢氧化钠1ml1ml,摇匀后显橙红色。,摇匀后显橙红色。9.9.比色:用蒸馏水调零,于比色:用蒸馏水调零,于525nm525nm处检测处检测0 05 5号管的光密度。号管的光密度。1 15 5号管的实际号管的实际ODOD值为:值为:1 15 5号号ODOD值减去值减去0 0号管号管ODOD值值。10.10.查查标准曲线标准曲线读出各管的血药浓度。横坐标为读出各管的血药浓度。横坐标为1 15 5号管的实际号管的实际ODOD值,纵坐标为各管的血药

6、浓度。值,纵坐标为各管的血药浓度。11.11.计算,由计算,由t t、C C用统计学方法算出用统计学方法算出a a、b b、r r值,代入方程值,代入方程lgC=a+btlgC=a+bt,求算药动学参数。,求算药动学参数。2021/6/75 lgCt= lgC0 + -ket/2.303由由lgC对对t做直线回归,得方程做直线回归,得方程: lgC= a + bt a=lgC0 b= =-ke/2.303 r相关系数相关系数K=-2.303b C0 =10a (g/L) t1/2=0.693/K(min) Vd=X0/C0(L) CL=VdK(L/min) AUC=C0 /K(g.min/L)

7、2021/6/76【实验结果】1.绘制表格绘制表格表表1 SD-NA药动学参数测定结果药动学参数测定结果给药前给药前5min5min10min10min15min15min30min30min45min45min OD(值值)血药浓度血药浓度对数浓度对数浓度2.绘制曲线:绘制曲线: 以时间为横坐标,以时间为横坐标,浓度浓度/对数浓度对数浓度为纵坐标,绘制为纵坐标,绘制SD-NA的药时曲线,确定的药时曲线,确定其其药物代谢动力学类型药物代谢动力学类型。3.写出方程写出方程 以以lgC对对t做直线回归,得方程做直线回归,得方程: lgC=a+bt ,r=?4.计算药动学参数计算药动学参数 2021

8、/6/77【讨论】【讨论】【结论】【结论】【注意事项】【注意事项】 1.1.防止污染防止污染! ! 2. 2.取血量及各种试剂的量要准确!取血量及各种试剂的量要准确! 3.3.试管中加入血液及试剂要立即摇匀!试管中加入血液及试剂要立即摇匀!2021/6/78家兔捉持、称重、固定家兔捉持、称重、固定 给药前采血给药前采血0.2ml(枸橼酸钠润洗注射器)(枸橼酸钠润洗注射器)另一侧单次快速另一侧单次快速ivSD-Na2ml/kg给药后给药后5、10、15、30、45min采血采血0.2ml取上清取上清过滤过滤至第二排试管至第二排试管比色比色:(525nm)蒸馏水调零蒸馏水调零第一排试管加入三氯醋酸第一排试管加入三氯醋酸7.8ml+血样血样0.2ml,混匀,静置分层,混匀,静置分层显色:显色:至第

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