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文档简介
1、石荠苎总黄酮抗炎作用及其机制研究 作者:聂犇 余陈欢 王芳芳 熊耀康 白冰冰【摘要】 目的观察石荠苎总黄酮抗炎作用并对其机制进行初步研究。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀,冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加,角叉菜胶致小鼠足跖肿胀及大鼠气囊炎等炎症模型,观察石荠苎总黄酮对不同炎症模型的抗炎作用,并测定蛋白质、前列腺素 ( ),一氧化氮(),丙二醛()含量及超氧化物歧化酶()活性。结果石荠苎总黄酮能显着降低小鼠
2、毛细血管通透性,抑制小鼠二甲苯致耳肿胀,减轻小鼠足跖肿胀,降低炎症组织 含量, 抑制角叉菜胶致大鼠气囊炎模型中渗出液总蛋白质含量,降低血浆, 含量,增强血浆 活性。结论石荠苎总黄酮具有明显的抗炎作用,其抗炎作用可能与其降低血管通透性、抑制 , 等炎症介质生成及增强清除氧自由基、抗脂质过氧化能力有关。 【关键词】 石荠苎 总黄酮 抗炎 作用机制Abstract:Objective the Mosla hangzhowensis .Methods edema , edema , s A Mosla hangzhowensis were obseved in , , ( ), (), (
3、) superoxide dismuitase() were determinedResults Mosla hangzhowensis inhibit , , , increase Conclusion s mm Mosla hangzhowensis , mediators oxygen free radical seavengirg capacity Key words:Mosla hangzhowensis ; ; ; 石荠苎Mosla hangzhowensis 为唇形科草本植物,为江浙民间常用中草药,具有清热
4、解毒,理气化湿之功效,主治夏日感冒、腹痛泄泻、湿疹、疖肿、外伤出血、跌打损伤、疮毒和慢性支气管炎等1。现代药理研究表明,石荠苎含有, 桉叶油素、侧柏酮、石竹烯、香荆芥酚、百里香酚、黄酮类化合物及脂肪酸等成分2,3。本课题组前期研究发现,石荠苎中总黄酮类成分具有明显的抗菌、抗流感病毒作用,能明显改善流感病毒感染小鼠肺组织炎症4,5。本实验进一步对其抗炎作用及其机制进行系统研究,以期为石荠苎的临床应用和新药开发提供实验依据。 器材 动物 小鼠,体重 ;健康 大鼠,清洁级,体重 。均由中国科学院上海实验动物中心上海斯莱克实验动物有限公司提供,动物合格证号:(浙)
5、。 药品与试剂石荠苎总黄酮(),由资源鉴定教研室提供。地塞米松片(批号:),浙江仙居制药厂。阿司匹林肠溶片(批号:),南京白敬宇制药有限责任公司。氢化可的松(批号:),山东新华制药股份有限公司。角叉菜胶(批号: ), 公司。伊文思蓝(批号:,进口分装),国药集团化学试剂有限公司。 检测试剂盒(批号:), 检测试剂盒(批号:), 测定试剂盒(批号:),总蛋白液体试剂盒(批号:),均购自南京建成生物工程研究所。其他试剂均为分析纯。 仪器 双光束紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司。 电子天平,北京赛多利斯公司。微量移液器, 。 方法与结果
6、 对冰醋酸致小鼠毛细血管通透性的影响6取小鼠 只,雌雄各半,随机分成 组,分组及给药剂量见表(模型组给予同体积生理盐水)。每日灌胃给药, 次,连续 ,末次给药后 ,尾静脉注射伊文思蓝生理盐水溶液 ,并同时腹腔注射醋酸溶液 , 后处死,用 生理盐水冲洗腹腔,洗液离心 ( ),取上清液在分光光度计 处,测定值。表1 TFS对小鼠毛细血管通透性的影响(略)与模型组相比,*P0.05,*P0.01;n=10 由表 结果可知, 能显着抑制冰醋酸致小鼠毛细血管通透性,其中 , 剂量组与模型组相比较有显着意义。 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响6取小鼠 只,雌雄各半
7、,随机分为 组,分组及给药剂量见表(模型组给予同体积生理盐水)。每日灌胃给药, 次,连续 ,末次给药 后,于小鼠右耳两面涂二甲苯 致炎,左耳不涂为正常耳; 后处死小鼠,沿耳廓基线剪下双耳,用直径 打孔器在同一部位取下耳片,称重,以左右耳片重量差值表示炎性肿胀程度。由表 结果可知, 能显着抑制二甲苯致小鼠耳肿胀,其中, 剂量组与模型组相比较有显着意义。 由表 结果可知, 能显着抑制二甲苯致小鼠耳肿胀,其中, 剂量组与模型组相比较有显着意义。表2 TFS对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(略)与模型组相比,*P0.05,*P0.01;n=10 对角叉菜胶引起
8、足跖肿胀及炎症组织中 的影响7取小鼠 只,雌雄各半,随机分为 组,分组及给药剂量见表(模型组给予同体积生理盐水)。每日灌胃给药, 次,连续 ,末次给药后 ,于每只小鼠左后肢足跖注射角叉菜胶 , 后颈椎脱臼处死小鼠,于踝关节处剪下左右后肢,称重,以左右后肢重量之差作为炎症肿胀程度。将剪下上述致炎足,剥皮,剪碎放入 生理盐水中浸泡 ,离心,取上清液 ,加 甲醇溶液 ,在下异构化 ,用甲醇稀释至 ,于 处测定OD 值,以每克炎症组织相当的OD 值表示 的含量。 桶3 TFS勤苤扷逋
9、嚽笫梠挚朒痌郪眽PGE2漪讲腔荌砒谨迵耀倰郪眈掀*P0.05*P0.01n=10 蚕桶 赋别褫眭? 夔珆翍眚秶褒脱粕蝶祡苤扷逋硅笫梠挚葱腴朒痌郪眽? 漪讲?笢? 撙讲郪迵耀倰郪眈掀诞捡衄珆翍砩砱 勤褒脱粕蝶祡湮扷?党朒腔荌砒?6?湮扷60硐偌极笭呴侬煦峈 郪诺哑郪耀倰郪栠俶勤桽郪挚坒媵锣軞酴耵询笢腴撙讲郪壶诺哑郪睿耀倰郪跤軑肮胀汜烩敆厄俋藩郪雄昜歙蟀哿嫩庛跤狻衾跤狻绞毞婓湮扷掖窒潜輷?狟蛁?诺?庵 毞挚庵 毞婬棒蛁?诺?跪 峎厥?党腔坝梠仅甜婓蔺棒跤狻缀婓湮扷掖窒?党啭蛁? 褒脱粕蝶 袀楷朒痌诺哑郪蛁?眈茼极当汜烩敆厄 ? 缀婬跤狻 棒衾祡朒 ?缀镑郳陑婄?
10、悛 怅湔浑聆? 漪讲挚? 魂俶揭侚雄昜?党啭蛁?梨汜烩敆厄漪裕匼 ?辆俴嫩炴彶摩嫩炴珘聆隅軞粥哑漪讲赋别獗桶 桶4 勤湮扷?党朒耀倰笢汆堤珘軞粥哑漪讲腔荌砒谨迵耀倰郪眈掀*P0.05*P0.01n=8 蚕桶 赋别褫眭褒脱粕蝶祡朒缀? 夔珆翍葱腴朒痌赓窐汆堤?笢 撙讲郪歙夔葱腴湮扷?党汆堤珘笢軞粥哑漪讲葱腴悛莲笢? 漪讲崝? 魂俶迵耀倰郪眈掀捡衄珆翍俶船祑枑尨? 捡衄珆翍腔蕨朒钎蚚桶5 勤湮扷?党朒耀倰笢悛莲SOD魂俶NOMDA漪讲腔荌砒谨迵耀倰郪眈掀*P0.05*P0.01n=8 枒蹦 朒痌岆婓祡朒
11、秪匼钎蚚狟蚕朒痌牉婉挚?庋温腔朒痌赓窐统迵竘?腔珨炵蹈瓷烩汜烩彻最婓朒痌毁茼笢祡朒秪匼竘?祷牉悛夺孺桲籵芵俶崝楼笢俶薜牉婉?赵蚔軗祫朒痌毁茼婜庋温朒痌赓窐统迵朒痌毁茼?89?甜楷汜网柲惟楷莉汜?胀魂俶欬赻蚕价涴虳欬赻蚕价祥躺夔崝楼悛夺籵芵俶 奥?驯僻汜昜胪避眲笢腔嗣掳祥悼睿眲沟呫竘?眲窐彻欬赵婖伧汜昜胪囷夼蚧?眲窐彻欬赵莉昜? 冯俶载?夔辆珨祭楼笭朒痌毁茼奥极啭赻蚕价?壶撙? 褫籵彻?壶赻蚕价眚秶眲窐彻欬赵毁茼? 钎峈珨笱朒痌秪赽湔婓衾朒痌郪眽笢褫迵遣慾踽哑?洬胀朒痌赓窐?衪肮钎蚚竘?悛夺孺桲楼?郪健睿遣慾踽汔询悛夺籵芵俶腔钎蚚籵彻眚秶?腔磁伧褫眕熬?朒痌毁茼?1011? 岆珨笱笭猁腔陓妏昜窐
12、肮奀珩岆珨笱笭猁腔朒痌赓窐婓朒痌毁茼腔勍嗣远诽楷闺葩娸腔覃诽钎蚚?棻朒痌毁茼妇嬷棻辆悛夺孺桲崝?悛夺籵芵俶慾魂?蹈甮匼磁伧绘胀旃噶?峈摹鞣俶朒痌腔楷汜歙迵 衄寿炵?12?挂妗桄赋别珆尨坒媵锣軞酴耵褫陇珆眚秶媪枞扫祡苤扷嫉笫梠睿褒脱粕蝶祡苤扷逋硅笫梠葱腴朒痌郪眽? 漪讲葱腴梨棚呫祡苤扷祷牉悛夺籵芵俶熬屾褒脱粕蝶祡湮扷?党朒耀倰笢汆堤珘軞粥哑窐漪讲葱腴悛莲? 漪讲崝?悛莲? 魂俶枑尨坒媵锣軞酴耵捡衄珆翍腔蕨朒钎蚚?蕨朒钎蚚褫夔迵?葱腴悛夺籵芵俶眚秶? 胀朒痌赓窐汜伧挚崝?壶欬赻蚕价蕨眲窐彻欬赵夔薯衄寿统蕉恅瓬 ?1? 涳蔬吽怹汜拥涳蔬镙洁都蚚翌狻庵 摩?獐笣涳蔬?镙堤唳扦?2? 蔬劼陔瓟悝埏笢狻湮枣萎?奻漆奻漆褪悝撮扲堤唳扦?3? 挔港?挔弊钇麻躇迶胀坒媵锣侪蚐腔 煦昴挚?眚历魂俶腔旃噶?眵昜訧埭迵远噫悝惆 ?4? 岽窀栻挔?瘀最陲?坒眅瑏劼笣媵锣祥肮枑?昜极俋眚历钎蚚腔掀诞旃噶?笢弊笢瓟狻褪撮 ?5? 挔窀谴挔?瘀麻 俦涳蔬莉坒媵锣扽眵昜旃噶辆桯?涳蔬笢瓟悝埏悝惆 ?6? 麻 ?笢狻狻烩悝妗桄?奻漆奻漆褪悝撮扲堤
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