应用ADME成药性评价与非临床药动学研究

1、1ADMEADME早期成药性评价早期成药性评价与非临床药代动力学研究与非临床药代动力学研究Productivity trend during and . The clinical rate of success is depicted as percentage surviving at each clinical phase based on attrition observed during and .Ish KhannaDrug discovery in pharmaceutical industry: productivity challenges and trendsDrug Dis

2、covery Today Volume 17, Issues 19?20 1088 - 1102High cost high failure新药发现、开发的风险新药发现、开发的风险2NDA：new drug applicationIND: investigational new drugShifting paradigm in drug failures during the past two decades. The clinical phase (I-III) failure of drugs is divided based on reasons of failure in the ye

3、ars 1991 (a) and 2000 (b) . Abbreviation : DMPK: drug .Ish KhannaDrug discovery in pharmaceutical industry: productivity challenges and trendsDrug Discovery Today Volume 17, Issues 19?20 1088 - 1102DMPK在新药开发中的重要性在新药开发中的重要性新药在临床被淘汰的原因比较新药在临床被淘汰的原因比较3v早期药效成药性评价早期药效成药性评价v早期毒理成药性评价早期毒理成药性评价v 早期早期ADME成药性

4、评价成药性评价v适宜的半衰期适宜的半衰期v较好的生物利用度口服较好的生物利用度口服v靶部位浓度较高靶部位浓度较高v 较小代谢性药物互相作用酶、转运体较小代谢性药物互相作用酶、转运体45未被吸收 nonabsorption)外排 (active efflux)肠道代谢(intestinal metabolism)肝脏代谢 (hepatic metabolism)胆汁排泄 (biliary excretion)药物损失drug loss)F: 进入体循环的药物量fa: 从小肠肠腔吸收的药物量fg: 小肠代谢后剩余的药物量fh: 肝脏代谢后剩余的药物量6Transwell System将待考察物参加

5、AP侧，孵育后测定 BL侧药物，计算Papp APBL将待考察物参加BL侧，孵育后测定AP侧药物，计算Papp BLAP 计算Papp BLAP /Papp APBL 考察给予转运体抑制剂时 Papp / inhibitor)透过性大小的判断根据：透过性大小的判断根据：Papp cm/sl1010-6 , 吸收良好 普萘洛尔Papp AB为 510-6cm/s荧光黄Papp AB 1Likely1I/Ki 0.1Possible0.1I/KiRemote预测根据预测根据FDA指南指南20CYP（底物）（底物）JS-001IC50（mol/L）阳性对照阳性对照对照药浓度（mol/L）抑制率%CY

6、P1A2（非那西丁）（非那西丁）23.4呋拉茶碱2.572.2CYP3A4（咪达唑仑）（咪达唑仑）0.393酮康唑0.02567.5CYP3A4（睾酮）（睾酮）0.256酮康唑0.01082.0CYP2C8 （紫杉醇）（紫杉醇）2.17槲皮素5.027.5CYP2C9（甲苯磺丁脲）（甲苯磺丁脲）0.420磺胺苯吡唑0.5050.8CYP2C19（奥美拉唑）（奥美拉唑）18.1噻氯匹啶1047.1CYP2D6 （右美沙芬）（右美沙芬）2.37奎尼丁0.05071.1JS-001对重组人对重组人CYP酶的抑制作用酶的抑制作用21药物浓度（药物浓度（mol/L）Papp(10-6cm/s)APBLB

7、LAPEfflux RatioAS-001020.300.034.60.0715.440.400.025.10.0112.680.800.035.40.36.7普萘洛尔普萘洛尔1013.611.30.83荧光黄荧光黄450.160.08 AS-0010在培养21天的单层Caco-2细胞转运22MDCK-mockMDCK-MDR10.00.51.01.5AS-0010-1mol/L+verapamil+elacridar*#uptake(nmol/mg protein)MDCK-mockMDCK-MDR101234AS-0010-2mol/L+verapamil+elacridar*# upta

8、ke(nmol/mg protein)AS-0010在MDCK-mock及MDCK-MDR1中的积聚及Verapamil100mol/L及elacridar20mol/L对积聚的影响LLC-PK1LLC-PK1-BCRP0.00.51.01.5AS-0010-1mol/L+cyclosporin A+ elacridar#*#uptake(nmol/mg protein)LLC-PK1LLC-PK1-BCRP01234AS-0010-2mol/L+cyclosporin A+ elacridar#*#uptake(nmol/mg protein)AS-0010在LLC-PK1及LLC-PK1-

9、BCRP中的积聚及cyclosporin A100mol/L及elacridar20mol/L对积聚的影响23024680.000.050.100.150.200.25制剂 1 (1:2.5); n=8制剂 2 (1:5); n=7Time(h)Concentration ( g/mL)IV 5mg/kg0123450510152025Time(h)Concentration ( g/mL)雄性大鼠口服雄性大鼠口服SWK-002制剂制剂及制剂及制剂后血浆后血浆中中SWK-002浓度浓度-时间变化曲线时间变化曲线雄性大鼠静脉注射雄性大鼠静脉注射SWK-002 5 mg/kg后血后血浆中浆中SWK

10、-002浓度浓度-时间变化曲线时间变化曲线GroupF(AUC0-t)oral/doseoral/(AUC0-t)inj/doseinj(100%)F(AUC0-t)oral/doseoral/(AUC0-)inj/doseinj(100%)制剂I0.8691.182制剂II1.3141.554240510152025051015T1/2=5.49 h; Tmax=0.313 h;Cmax=10.66 g/mL;F=80.9%Time(h)Concentration(g/ml)大鼠口服大鼠口服XHT-0X 50mg/kg后的血浆药物浓度后的血浆药物浓度-时间曲线时间曲线meanSD, n=4p

11、lasmabrainliverkidneyspleen051015200.5h6h20hConcentration（ g/g）大鼠灌胃大鼠灌胃50 mg/kg XHT-0X后组织中后组织中药物药物浓度浓度25CYP亚型亚型新黄酮抑制率新黄酮抑制率（%）阳性对照阳性对照抑制剂浓度(M)抑制率% 1A214.80.96呋拉茶碱*furafylline0.7711.81.3 2A6-毛果芸香碱pilocarpine524.30.51 2C833.93.5槲皮素quercetin1080.73.0 2C934.63.4磺胺苯吡唑sulfaphenazole0.519.21.5 2C1929.42.7努

12、特卡酮nootkatone0.59.261.5 2D614.71.5奎尼丁quinidine0.473.40.82 2E117.60.67二乙基二硫代氨基磺酸盐diethyldithiocarbamate2012.62.4 3A4/5(testosterone)26.92.1酮康唑ketoconazole0.279.10.54 3A4/5(midazolam)12.70.29酮康唑ketoconazole0.270.50.47 XWT-0X10M及阳性抑制剂对及阳性抑制剂对CYP亚型的抑制亚型的抑制 meanSD, n=326A06012018024004080120Time(min)% of

13、 initial concentrationYP128在大鼠血浆中37(A)的稳定性Phase I MetabolismCP20CP102CP94CN106CN116CN128CN136CN206CN228CN236051015202530Iron chelator elimination ratio (%)化合物(100 mol/L) 在混合的正常人肝微粒体1.0 mg protein/mL中孵育60 min后的I相代谢消除率(mean)化合物(100 mol/L) 在混合的正常人肝微粒体1.0 mg protein/mL中孵育4 h后的II相代谢消除率(mean)2705101520048

14、12T1/2=3.82 h; Tmax=1 hCmax=10.6 g/mLF=95.2%Time(h)Concentration ( g/mL)plasmaheartliverspleenkidney040801200.5h4hConcentration（ g/g） 大鼠灌胃67 mg/kg YP128后平均血浆药物浓度-时间曲线大鼠灌胃67 mg/kg YP128后组织中YP128的浓度28创新药物非临床药代动力学研究创新药物非临床药代动力学研究12非创新药物动物生物利用度与生物等效性评价非创新药物动物生物利用度与生物等效性评价3特殊注射剂的非临床药代动力学研究特殊注射剂的非临床药代动力学研

15、究29药物非临床药代动力学研究药物非临床药代动力学研究技术指导原那么技术指导原那么 (第二稿第二稿)二二0一三年四月一三年四月30v通过动物体内、外和人体外的研究方法，提醒新药在体内的动态通过动物体内、外和人体外的研究方法，提醒新药在体内的动态变化规律变化规律v获得新药的根本药代动力学参数获得新药的根本药代动力学参数, , 说明药物的吸收、分布、代说明药物的吸收、分布、代谢和排泄的过程和特点谢和排泄的过程和特点v说明药效或毒性大小的根底，和提供药物对靶器官的效应说明药效或毒性大小的根底，和提供药物对靶器官的效应药效或毒性的根据药效或毒性的根据 v提供评价药物制剂特性和质量的重要根据；提供评价药

16、物制剂特性和质量的重要根据；v为设计和优化临床研究给药方案提供有关信息为设计和优化临床研究给药方案提供有关信息v为药物构造改造和设计提供构造与动力学关系的信息为药物构造改造和设计提供构造与动力学关系的信息31非临床药代动力学研究，要遵循以下根本原那么：非临床药代动力学研究，要遵循以下根本原那么：试验目的明确试验目的明确分析方法可靠分析方法可靠试验设计合理试验设计合理所得参数全面，满足评价要求所得参数全面，满足评价要求对试验结果进展综合分析与评价对试验结果进展综合分析与评价详细问题详细分析详细问题详细分析32试验药品试验药品v 应提供受试药物的名称、剂型、批号、来源、纯度应提供受试药物的名称、剂

17、型、批号、来源、纯度v 保存条件及配制方法保存条件及配制方法 v 使用的受试药物及剂型应尽量与药效学或毒理学研究使用的一致使用的受试药物及剂型应尽量与药效学或毒理学研究使用的一致 v 研制单位应提供质检报告研制单位应提供质检报告 33试验动物试验动物 一般采用成年和安康的动物。常用动物种属有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、一般采用成年和安康的动物。常用动物种属有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型猪和猴等。选择动物的原那么如下犬、小型猪和猴等。选择动物的原那么如下: :首选动物：尽可能与药效学和毒理学研究一致首选动物：尽可能与药效学和毒理学研究一致尽量在清醒状态下试验，动力学研究最好从同一动物屡次采样尽量在清

18、醒状态下试验，动力学研究最好从同一动物屡次采样创新药应选用两种或两种以上的动物，其中一种为啮齿类动物；另一种为非创新药应选用两种或两种以上的动物，其中一种为啮齿类动物；另一种为非啮齿类动物如犬、小型猪或猴等。其它类型的药物，可选用一种动物，啮齿类动物如犬、小型猪或猴等。其它类型的药物，可选用一种动物，建议首选非啮齿类动物建议首选非啮齿类动物 经口给药不宜选用兔等食草类动物经口给药不宜选用兔等食草类动物试验设计的总体要求试验设计的总体要求-2药动学实验前先进展体外挑选，选择与人代谢情况比较接近的动物进展体内药动学实验343536 试验剂量试验剂量动物体内药代动力学研究应设置至少三个剂量组，其高动

19、物体内药代动力学研究应设置至少三个剂量组，其高剂量最好接近最大耐受剂量，中、小剂量根据动物有效剂量最好接近最大耐受剂量，中、小剂量根据动物有效剂量的上下限范围选取。剂量的上下限范围选取。主要考察在所试剂量范围内，药物的体内的动力学过程主要考察在所试剂量范围内，药物的体内的动力学过程是属于线性还是非线性，以所得结果有利于解释药效学是属于线性还是非线性，以所得结果有利于解释药效学和毒理学研究中的发现，并为新药的进一步开发和研究和毒理学研究中的发现，并为新药的进一步开发和研究提供信息提供信息 尽可能与临床用药一致尽可能与临床用药一致 给药途径给药途径试验设计的总体要求试验设计的总体要求-337v 血

20、药浓度血药浓度- -时间曲线时间曲线 v 药物的吸收药物的吸收 v 药物的分布药物的分布 v 药物的排泄物质平衡药物的排泄物质平衡 v 药物与血浆蛋白的结合药物与血浆蛋白的结合v 药物的生物转化药物的生物转化v 对药物代谢酶活性的影响对药物代谢酶活性的影响 v 药代动力学与毒代动力学药代动力学与毒代动力学 38 受试动物数 以血药浓度-时间曲线的每个时间点有不少于6个数据为限计算所需动物数。最好从同一动物屡次取样。如由多只动物的数据共同构成一条血药浓度-时间曲线，应相应增加动物数，以反映个体差异对试验结果的影响。 建议受试动物采用雌雄各半，如发现动力学存在明显的性别差异，应增加动物数以便认识试

21、验药物的药代动力学的性别差异。 单一性别用药，可选择与临床用药一致的性别39给药前需采血作为为空白样品给药前需采血作为为空白样品给药后的一个完好的血药浓度给药后的一个完好的血药浓度-时间曲线，采样时间点的设计应兼顾药物时间曲线，采样时间点的设计应兼顾药物的吸收相、平衡相或峰浓度附近和消除相的吸收相、平衡相或峰浓度附近和消除相一般在吸收相至少需要一般在吸收相至少需要2-3个采样点，平衡相在峰浓度附近至少需个采样点，平衡相在峰浓度附近至少需要要3个采样点，消除相需要个采样点，消除相需要4-6个采样点。对于吸收快的药物，应个采样点。对于吸收快的药物，应尽量防止第一个点是尽量防止第一个点是Cmax整个

22、采样时间至少应持续到整个采样时间至少应持续到3-5个半衰期，或持续到血药浓度为个半衰期，或持续到血药浓度为Cmax的的1/10-1/20正式试验前，选择正式试验前，选择2-3只动物进展预试验以确定合理的采血点只动物进展预试验以确定合理的采血点 采样点确实定口服给药：一般在给药前应禁食12小时以上，以排除食物对药物吸收的影响。在试验中应注意根据详细情况统一给药后禁食时间，以防止由此带来的数据波动及食物的影响40 将试验中测得的各受试动物的血药浓度将试验中测得的各受试动物的血药浓度-时间数据分别进展药代时间数据分别进展药代动力学参数的估算，求得受试物的主要药代动力学参数。动力学参数的估算，求得受试

23、物的主要药代动力学参数。 静脉注射给药，应提供静脉注射给药，应提供t1/2消除半衰期、消除半衰期、Vd表观分布容积、表观分布容积、AUC血药浓度血药浓度-时间曲线下面积、时间曲线下面积、CL或或CL/f去除率等参数值；去除率等参数值； 血管外给药，血管外给药， 除提供上述参数外除提供上述参数外, 尚应提供尚应提供Cmax和和Tmax等参数，等参数，以反映药物吸收的规律。以反映药物吸收的规律。 提供一些统计矩参数，如提供一些统计矩参数，如:MRT、AUC(0-t)和和AUC(0-)等，对于描绘药等，对于描绘药物药代动力学特征的描绘也有意义物药代动力学特征的描绘也有意义 一般需要一般需要AUC(0

24、-t) 80%AUC(0-)41v 单次给药单次给药 v 各个和各组受试动物的血药浓度各个和各组受试动物的血药浓度-时间数据列表及曲线和其平均时间数据列表及曲线和其平均值、标准差。值、标准差。 v 各个和各组受试动物的主要药代动力学参数及平均值、标准差。各个和各组受试动物的主要药代动力学参数及平均值、标准差。 v 对受试物单次给药非临床药代动力学的规律和特点进展讨论和评价。对受试物单次给药非临床药代动力学的规律和特点进展讨论和评价。 v 屡次给药屡次给药 v 各个和各组受试动物首次给药后的血药浓度各个和各组受试动物首次给药后的血药浓度-时间数据及曲线和主要药时间数据及曲线和主要药代动力学参数代

25、动力学参数 v 各个和各组受试动物的各个和各组受试动物的3次稳态谷浓度数据及平均值、标准差次稳态谷浓度数据及平均值、标准差 v 各个和各组受试动物血药浓度达稳态后末次给药的血药浓度各个和各组受试动物血药浓度达稳态后末次给药的血药浓度-时间数据和曲时间数据和曲线，及其平均值、标准差和曲线线，及其平均值、标准差和曲线 v 比较首次与末次给药的血药浓度比较首次与末次给药的血药浓度-时间曲线和有关参数时间曲线和有关参数 v 各个和各组各个和各组 平均稳态血药浓度及标准差平均稳态血药浓度及标准差 42大鼠灌胃不同剂量的菊花提取物后后血浆中大鼠灌胃不同剂量的菊花提取物后后血浆中Luteolin及及Apig

26、enin的浓度的浓度-时间曲线时间曲线中国药学杂志，,46(3)：214-218.43v 对于经口给药的新药，应进展整体动物试验，尽可能同时对于经口给药的新药，应进展整体动物试验，尽可能同时进展血管内给药的试验，提供绝对生物利用度进展血管内给药的试验，提供绝对生物利用度v 如有必要，可进展体外吸收模型如如有必要，可进展体外吸收模型如Caco-2Caco-2细胞模型、细胞模型、在体或离体肠道吸收试验以阐述药物吸收特性在体或离体肠道吸收试验以阐述药物吸收特性v 对于其它血管外给药的药物及某些改变剂型的药物，应根据对于其它血管外给药的药物及某些改变剂型的药物，应根据立题目的，尽可能提供绝对生物利用度

27、立题目的，尽可能提供绝对生物利用度 44v 选用大鼠或小鼠做组织分布试验较为方便选用大鼠或小鼠做组织分布试验较为方便v 选择一个剂量一般有效剂量给药后，至少测定药物在心、肝、脾、选择一个剂量一般有效剂量给药后，至少测定药物在心、肝、脾、肺、肾、胃肠道、生殖腺、脑、体脂、骨骼肌等组织的浓度，以理解肺、肾、胃肠道、生殖腺、脑、体脂、骨骼肌等组织的浓度，以理解药物在体内的主要分布组织药物在体内的主要分布组织 v 特别注意药物浓度高、蓄积时间长的组织和器官，以及在药效或毒性靶器官的特别注意药物浓度高、蓄积时间长的组织和器官，以及在药效或毒性靶器官的分布如对造血系统有影响的药物，应考察在骨髓的分布分布如

28、对造血系统有影响的药物，应考察在骨髓的分布v 参考血药浓度参考血药浓度- -时间曲线的变化趋势，选择至少时间曲线的变化趋势，选择至少3 3个时间点分别代表吸收相、个时间点分别代表吸收相、平衡相和消除相的药物分布平衡相和消除相的药物分布v 假设某组织的药物浓度较高，应增加观测点，进一步研究该组织中药假设某组织的药物浓度较高，应增加观测点，进一步研究该组织中药物消除的情况物消除的情况v 每个时间点，至少应有每个时间点，至少应有5 5个动物的数据个动物的数据抗肿瘤药物的组织分布研究中，药物在肿瘤组织内的分布研究也非常必要45v 做组织分布试验，必须注意取样的代表性和一致性做组织分布试验，必须注意取样

29、的代表性和一致性v 同位素标记物的组织分布试验，应提供标记药物的放化纯度、同位素标记物的组织分布试验，应提供标记药物的放化纯度、标记率比活性、标记位置、给药剂量等参数；提供放射标记率比活性、标记位置、给药剂量等参数；提供放射性测定所采用的详细方法，如分析仪器、本底计数、计数效性测定所采用的详细方法，如分析仪器、本底计数、计数效率、校正因子、样品制备过程等；提供采用放射性示踪生物率、校正因子、样品制备过程等；提供采用放射性示踪生物学试验的详细过程，以及对生物样品测定时对放射性衰变所学试验的详细过程，以及对生物样品测定时对放射性衰变所进展的校正方程等进展的校正方程等v 尽可能提供给药后不同时相的整

30、体放射自显影图像尽可能提供给药后不同时相的整体放射自显影图像46v 尿和粪的药物排泄：一般采用小鼠或大鼠，将动物放入代谢笼内，尿和粪的药物排泄：一般采用小鼠或大鼠，将动物放入代谢笼内，选定一个有效剂量给药后，按一定的时间间隔分段搜集尿或粪的选定一个有效剂量给药后，按一定的时间间隔分段搜集尿或粪的全部样品，测定药物浓度全部样品，测定药物浓度v 粪样品按一定比例制成匀浆，记录总体积，取部分样品进展粪样品按一定比例制成匀浆，记录总体积，取部分样品进展药物含量测定药物含量测定v 计算药物经此途径排泄的速率及排泄量，直至搜集到的样品测定不计算药物经此途径排泄的速率及排泄量，直至搜集到的样品测定不到药物为

31、止到药物为止v 每个时间点至少有每个时间点至少有5 5只动物的试验数据只动物的试验数据注意：搜集过程中需考虑是否采用一定措施以免药物或代谢物降解47v 应采集给药前尿及粪样，并参考预试验的结果，设计给药应采集给药前尿及粪样，并参考预试验的结果，设计给药后搜集样品的时间点，包括药物从尿或粪中开场排泄、排后搜集样品的时间点，包括药物从尿或粪中开场排泄、排泄顶峰及排泄根本完毕的全过程泄顶峰及排泄根本完毕的全过程v 胆汁排泄：一般用大鼠在乙醚麻醉下作胆管插管引流，待胆汁排泄：一般用大鼠在乙醚麻醉下作胆管插管引流，待动物清醒后给药，并以适宜的时间间隔分段搜集胆汁总动物清醒后给药，并以适宜的时间间隔分段搜

32、集胆汁总时长一般不超过三天，进展药物测定时长一般不超过三天，进展药物测定记录药物自粪、尿、胆汁排出的速度及总排出量占总给药量的百分比，提供物质平衡的数据 48排泄研究实例排泄研究实例-1GlycineATPCoAKidney如何在尿液中发现p-FBA，p-FHA？49排泄研究排泄研究Cumulative excretion of p-FHA and both metabolites in urine after iv administration of fluorapacin(12.5mg/kg) in rats (n=6, mean meanS.E.)Mean cumulative excr

33、etion of metabolites equivalents in bile after iv administration of fluorapacin (12.5mg/kg) in rats (n=6, mean meanS.E.)50应用LC-MS 检测到的 粪便+尿液总排泄率50%是否有简便、快捷的方法考察排泄率？51v 研究药物与血浆蛋白结合试验可采用多种方法，如平衡透析法、研究药物与血浆蛋白结合试验可采用多种方法，如平衡透析法、超过滤法、分配平衡法、凝胶过滤法、光谱法等超过滤法、分配平衡法、凝胶过滤法、光谱法等v 根据药物的理化性质及试验室条件，可选择使用一种方法根据药物的理化

34、性质及试验室条件，可选择使用一种方法进展至少进展至少3 3个浓度包括有效浓度的血浆蛋白结合试验个浓度包括有效浓度的血浆蛋白结合试验v 每个浓度至少重复试验三次，以理解药物的血浆蛋白结合率每个浓度至少重复试验三次，以理解药物的血浆蛋白结合率是否有浓度依赖性。是否有浓度依赖性。52v 一般情况下，只有游离型药物才能通过脂膜向组织扩散，被肾一般情况下，只有游离型药物才能通过脂膜向组织扩散，被肾小管滤过或被肝脏代谢，因此药物与蛋白的结合会明显影响药小管滤过或被肝脏代谢，因此药物与蛋白的结合会明显影响药物分布与消除的动力学过程并降低药物在靶部位的作用强度物分布与消除的动力学过程并降低药物在靶部位的作用强

35、度v 建议根据药理毒理研究所采用的动物种属，进展动物与人血建议根据药理毒理研究所采用的动物种属，进展动物与人血浆蛋白结合率比较试验，以预测和解释动物与人在药效和毒浆蛋白结合率比较试验，以预测和解释动物与人在药效和毒性反响方面的相关性性反响方面的相关性v 对蛋白结合率高于对蛋白结合率高于90%90%以上的药物，建议开展体外药物竞争结以上的药物，建议开展体外药物竞争结合试验，即选择临床上有可能合并使用的高蛋白结合率药物，合试验，即选择临床上有可能合并使用的高蛋白结合率药物，考察对所研究药物蛋白结合率的影响考察对所研究药物蛋白结合率的影响53v 对于创新性的药物，尚需理解在体内的生物转化情况，包括转

36、化类型、主要转化对于创新性的药物，尚需理解在体内的生物转化情况，包括转化类型、主要转化途径及其可能涉及的代谢酶途径及其可能涉及的代谢酶v 对于新的前体药物对于新的前体药物, 除对其代谢途径和主要活性代谢物构造进展研究除对其代谢途径和主要活性代谢物构造进展研究外外, 尚应对原形药和活性代谢物进展系统尚应对原形药和活性代谢物进展系统 的药代动力学研究的药代动力学研究;v 对主要在体内以代谢消除为主的药物对主要在体内以代谢消除为主的药物(原形药排泄原形药排泄50%)，生物转化研究那，生物转化研究那么可分为两个阶段：么可分为两个阶段：v 临床前可先采用色谱方法或放射性核素标记方法分析和别离可能存在的临

37、床前可先采用色谱方法或放射性核素标记方法分析和别离可能存在的代谢产物，并用色谱代谢产物，并用色谱-质谱联用等方法初步推测其构造质谱联用等方法初步推测其构造;v 假如假如II期临床研究提示其在有效性和平安性方面有开发前景，在申报期临床研究提示其在有效性和平安性方面有开发前景，在申报消费前进一步研究并说明主要代谢产物的可能代谢途径、构造及代消费前进一步研究并说明主要代谢产物的可能代谢途径、构造及代谢酶。但当多种迹象提示可能存在有较强活性的代谢产物时，应尽谢酶。但当多种迹象提示可能存在有较强活性的代谢产物时，应尽早开展活性代谢产物的研究，以确定开展代谢产物动力学试验的必早开展活性代谢产物的研究，以确

38、定开展代谢产物动力学试验的必要性要性 吉非替尼代谢产物及主要代谢酶确实定吉非替尼代谢产物及主要代谢酶确实定 鸡尾酒探针底物法体外挑选吉非替尼对主要鸡尾酒探针底物法体外挑选吉非替尼对主要CYP酶的抑制作用酶的抑制作用 吉非替尼对吉非替尼对CYP2D6底物美托洛尔药代动力学的影响底物美托洛尔药代动力学的影响 CYP3A4抑制剂和诱导剂对吉非替尼药代动力学的影响抑制剂和诱导剂对吉非替尼药代动力学的影响54抗肿瘤药吉非替尼的代谢及药物抗肿瘤药吉非替尼的代谢及药物- -药物互相作用研究药物互相作用研究吉非替尼对药物代谢酶的影响对药物代谢酶的影响5514C-吉非替尼与人肝微粒体及重组吉非替尼与人肝微粒体及

39、重组CYP3A4 孵育后的代表性孵育后的代表性HPLC图谱图谱 生成数个生成数个一相一相代谢产物代谢产物CYP3A4为参与吉非替尼代谢的主要为参与吉非替尼代谢的主要CYP酶酶结论结论56吉非替尼吉非替尼（mol/L）非那西丁非那西丁O-脱乙基化脱乙基化(CYP1A2)甲苯磺丁脲甲苯磺丁脲4-羟基化羟基化(CYP2C9)S-美芬妥因美芬妥因4-羟基化羟基化(CYP2C19)右美沙芬右美沙芬O-脱甲基化脱甲基化(CYP2D6)睾酮睾酮6-羟基化羟基化(CYP3A4)0.00410610089991080.0210599781091080.1111210083811040.5698101838910

40、42.24108101808710511.210591765793吉非替尼对人肝微粒体主要吉非替尼对人肝微粒体主要CYP酶活性的影响酶活性的影响注：表中数据为未加吉非替尼时的酶活性的百分比p临床应用中，吉非替尼在人体的血药浓度小于，为患者以250mg/d进展治疗时稳态浓度的10倍p引起代谢性药物互相作用的可能性不大57肿瘤患者单独及与吉非替尼合用美托洛尔肿瘤患者单独及与吉非替尼合用美托洛尔CYP2D6底物时，美托洛尔的血底物时，美托洛尔的血药浓度药浓度-时间曲线时间曲线结论：结论：吉非替尼与CYP2D6底物药物合用时，对合用药物未产生显著的药代动力学影响58单用及与利福平(CYP3A4诱导剂合

41、用时，安康志愿者口服500mg吉非替尼后的平均血药浓度-时间曲线参数统计方法吉非替尼（口服500mg）单用与利福平合用AUC0- (ng.h/mL)Gmean (RSD%)5044 (88)840 (71)Cmax (ng/mL)Gmean (RSD%)167.5 (53)58.8 (68)Tmax (h)中位数（范围）3.0 (3.0-7.0)3.0 (1.0-5.0)t1/2 (h)平均值 (SD)31(14)21(8)单用及与利福平合用时，安康志愿者口服500mg吉非替尼后的药代动力学参数59 吉非替尼单用及与伊曲康唑合用时的平均血药浓度-时间曲线参数统计方法吉非替尼（口服250mg）吉

42、非替尼（口服500mg）单用（n=24）合用（n=24）单用（n=23）合用（n=24）AUC0- （ng.h/mL）Gmean(CV%)2968(45)5348(54)6921(30)10919(44)Cmax(ng/mL)Gmean(CV%)103.3(39)155.8(43)227.8(61)301.8(56)Tmax(h)中位数（范围） 5.0(3.0-7.0)5.0(3.0-7.0)5.0(3.0-24.2)5.0(3.0-7.0)t1/2 (h)平均值 (SD)31(10)38(11)35(8)43(12)吉非替尼单用及与伊曲康唑合用时的药代动力学参数60v 剂型特征、详细制剂所使

43、用的辅料、制备工艺等也是重要的影响因素。制剂研究剂型特征、详细制剂所使用的辅料、制备工艺等也是重要的影响因素。制剂研究时，必须结合药代动力学研究结果，利用或避开药物的某些性质时，必须结合药代动力学研究结果，利用或避开药物的某些性质v 药物的理化性质包括溶解度、油水分配系数、酸碱度、粒度、晶型、浸药物的理化性质包括溶解度、油水分配系数、酸碱度、粒度、晶型、浸透性以及药物在胃肠道中的稳定性等，剂型因素包括剂型、辅料和制备透性以及药物在胃肠道中的稳定性等，剂型因素包括剂型、辅料和制备工艺以及不同剂型制剂的给药途径等工艺以及不同剂型制剂的给药途径等v 新的给药系统在不断开展，如脂质体、纳米给药系统、透

44、皮给药系新的给药系统在不断开展，如脂质体、纳米给药系统、透皮给药系统、部分定位给药系统、脉冲给药系统等。研究者可根据不同的用统、部分定位给药系统、脉冲给药系统等。研究者可根据不同的用药需要，结合药物及其制剂的特点，制订合理、可行的药代动力学药需要，结合药物及其制剂的特点，制订合理、可行的药代动力学研究方案研究方案v 对于新的复方制剂，应通过复方与单药药代动力学的比较，研究其互相对于新的复方制剂，应通过复方与单药药代动力学的比较，研究其互相作用，以考察组方的合理性作用，以考察组方的合理性 61v 对于临床需长期给药且有蓄积倾向的药物，应考虑进展屡次给药的药代动力学研究v 屡次给药试验时, 一般可

45、选用一个剂量(有效剂量)。 根据单次给药药代试验结果求得的消除半衰期(t1/2)并参考药效学数据, 确定药物剂量、给药间隔和给药天数 62 以下情况可考虑进展屡次给药后的特定组织的药物浓度研究：药物/代谢物在组织中的半衰期明显超过其血浆消除半衰期，并超过毒性研究给药间隔的两倍在短期毒性研究、单次给药的组织分布研究或其它药理学研究中观察到未意料的，而且对平安性评价有重要意义的组织病理学改变定位靶向释放的药物63v 在进展药代动力学研究时，除了体内研究外，还可配合体外研究，在进展药代动力学研究时，除了体内研究外，还可配合体外研究，如观察动物和人肝等组织匀浆、细胞悬液、微粒体或灌流器官对如观察动物和

46、人肝等组织匀浆、细胞悬液、微粒体或灌流器官对药物的代谢作用药物的代谢作用v 体外研究代谢途径和动力学特点比较方便，节省动物，可以体外研究代谢途径和动力学特点比较方便，节省动物，可以获得更多的信息，例如分析代谢形式、代谢酶对药物作用的获得更多的信息，例如分析代谢形式、代谢酶对药物作用的动力学参数、药物及其代谢物与蛋白、动力学参数、药物及其代谢物与蛋白、DNADNA等靶分子的亲和力等靶分子的亲和力等等64v 对于改变酸根、晶型的药物，应根据药物的特点、改变的详对于改变酸根、晶型的药物，应根据药物的特点、改变的详细情况和立题根据，考虑是否应进展与改变前药物比较的药细情况和立题根据，考虑是否应进展与改

47、变前药物比较的药代动力学研究代动力学研究v 考察其生物利用度的变化考察其生物利用度的变化65v 对映异构体具有几乎一样的物理性质旋光性除外对映异构体具有几乎一样的物理性质旋光性除外和化学性质在手性环境中除外，通常需要特殊的和化学性质在手性环境中除外，通常需要特殊的手性技术对它们进展鉴定、表征、别离和测定，但生手性技术对它们进展鉴定、表征、别离和测定，但生物系统常常很容易区分它们手性环境物系统常常很容易区分它们手性环境v 手性可能导致不同的药代动力学性质吸收、分布、代谢、手性可能导致不同的药代动力学性质吸收、分布、代谢、排泄，以及药理学、毒理学效应的量或质的区别排泄，以及药理学、毒理学效应的量或

48、质的区别v 消旋体及消旋体及2个对映体可看成不同的个对映体可看成不同的3个化学实体个化学实体66v 为评价单一对映体或对映体混合物的药代动力学，研究者应为评价单一对映体或对映体混合物的药代动力学，研究者应在药物开发前期，建立适用于体内样品对映体选择性分析的在药物开发前期，建立适用于体内样品对映体选择性分析的定量方法，估计对映体之间互相转化的可能性以及各自的吸定量方法，估计对映体之间互相转化的可能性以及各自的吸收、分布、代谢和排泄收、分布、代谢和排泄v 假如外消旋体已经上市，研究者希望开发单一对映体，那么应测假如外消旋体已经上市，研究者希望开发单一对映体，那么应测定该对映体转化为另一对映体的程度

49、是否显著，以及该对映体单定该对映体转化为另一对映体的程度是否显著，以及该对映体单独用药是否与其作为外消旋体组分时的药代动力学性质一致独用药是否与其作为外消旋体组分时的药代动力学性质一致v 为检测对映异构体在体内的互相转化和处置，应获得单一对映体为检测对映异构体在体内的互相转化和处置，应获得单一对映体在动物体内的药代动力学曲线，并与其后在临床在动物体内的药代动力学曲线，并与其后在临床I I期试验中获得的期试验中获得的药代动力学曲线相比较药代动力学曲线相比较 67生物等效性研究生物等效性研究68v 生物等效性生物等效性BE：是指药学等效制剂或可交换药物在：是指药学等效制剂或可交换药物在一样试验条件

50、下，服用一样剂量，其活性成分吸收程度一样试验条件下，服用一样剂量，其活性成分吸收程度和速度的差异无统计学意义和速度的差异无统计学意义v 通常意义的通常意义的BE 研究是指用研究是指用BA 研究方法，以药代动力学参研究方法，以药代动力学参数为终点指标，根据预先确定的等效标准和限度进展的比数为终点指标，根据预先确定的等效标准和限度进展的比较研究较研究v 在药代动力学方法确实不可行时在药代动力学方法确实不可行时, 也可以考虑以临床综合疗也可以考虑以临床综合疗效、药效学指标或体外试验指标等进展比较性研究，但需效、药效学指标或体外试验指标等进展比较性研究，但需充分证实所采用的方法具有科学性和可行性充分证

51、实所采用的方法具有科学性和可行性69v BA BA 和和BE BE 均是评价制剂质量的重要指标均是评价制剂质量的重要指标v BA BA 强调反映药物活性成分到达体内循环的相对量和速度，强调反映药物活性成分到达体内循环的相对量和速度，是新药研究过程中选择适宜给药途径和确定用药方案是新药研究过程中选择适宜给药途径和确定用药方案( (如如给药剂量和给药间隔给药剂量和给药间隔) )的重要根据之一的重要根据之一v BE BE 重点在于以预先确定的等效标准和限度进展的比较，是保重点在于以预先确定的等效标准和限度进展的比较，是保证含同一药物活性成分的不同制剂体内行为一致性的根据，是证含同一药物活性成分的不同

52、制剂体内行为一致性的根据，是判断后研发产品是否可交换已上市药品使用的根据判断后研发产品是否可交换已上市药品使用的根据70v BA 和和BE 研究在药品研发的不同阶段有不同作用：研究在药品研发的不同阶段有不同作用：v 在新药研究阶段，为了确定新药处方、工艺合理性，通常需要比较改变上述因素后在新药研究阶段，为了确定新药处方、工艺合理性，通常需要比较改变上述因素后制剂是否能到达预期的生物利用度；开发了新剂型，要对拟上市剂型进展生物利用制剂是否能到达预期的生物利用度；开发了新剂型，要对拟上市剂型进展生物利用度研究以确定剂型的合理性，通过与原剂型比较的度研究以确定剂型的合理性，通过与原剂型比较的BA 研

53、究来确定新剂型的给药剂研究来确定新剂型的给药剂量，也可通过量，也可通过BE 研究来证实新剂型与原剂型是否等效；研究来证实新剂型与原剂型是否等效；v 在临床试验过程中，可通过在临床试验过程中，可通过BE 研究来验证同一药物的不同时期产品的前后一研究来验证同一药物的不同时期产品的前后一致性，如：早期和晚期的临床试验用药品，临床试验用药品尤其是用于确定致性，如：早期和晚期的临床试验用药品，临床试验用药品尤其是用于确定剂量的试验药和拟上市药品等。剂量的试验药和拟上市药品等。v 在仿制消费已有国家标准药品时，可通过在仿制消费已有国家标准药品时，可通过BE 研究来证明仿制产品与原研究来证明仿制产品与原创药

54、是否具有生物等效性，是否可与原创药交换使用。创药是否具有生物等效性，是否可与原创药交换使用。v 药品批准上市后，如处方组成成分、比例以及工艺等出现一定程度的变更药品批准上市后，如处方组成成分、比例以及工艺等出现一定程度的变更时，研究者需要根据产品变化的程度来确定是否进展时，研究者需要根据产品变化的程度来确定是否进展BE 研究，以考察变更研究，以考察变更后和变更前产品是否具有生物等效性。以进步生物利用度为目的研发的新后和变更前产品是否具有生物等效性。以进步生物利用度为目的研发的新制剂，需要进展制剂，需要进展BA 研究，理解变更前后生物利用度的变化研究，理解变更前后生物利用度的变化71v 药学等效

55、性药学等效性 (Pharmaceutical equivalence)：假如两制剂含等量的一样活性成分，具：假如两制剂含等量的一样活性成分，具有一样的剂型，符合同样的或可比较的质量标准，那么可以认为他们是药学等效的。有一样的剂型，符合同样的或可比较的质量标准，那么可以认为他们是药学等效的。药学等效不一定意味着生物等效，因为辅料的不同或消费工艺差异等可能会导致药药学等效不一定意味着生物等效，因为辅料的不同或消费工艺差异等可能会导致药物溶出或吸收行为的改变物溶出或吸收行为的改变v 治疗等效性治疗等效性 (Therapeutic equivalence)：假如两制剂含有一样活性成分，且临床：假如两制

56、剂含有一样活性成分，且临床上显示具有一样的平安性和有效性，可以认为两制剂具有治疗等效性。假如两上显示具有一样的平安性和有效性，可以认为两制剂具有治疗等效性。假如两制剂中所用辅料本身并不会导致有效性和平安性问题，生物等效性研究是证实制剂中所用辅料本身并不会导致有效性和平安性问题，生物等效性研究是证实两制剂治疗等效性最适宜的方法。假如药物吸收速度与临床疗效无关两制剂治疗等效性最适宜的方法。假如药物吸收速度与临床疗效无关,吸收程度吸收程度一样但吸收速度不同的药物也可能到达治疗等效。而含有一样的活性成分只是一样但吸收速度不同的药物也可能到达治疗等效。而含有一样的活性成分只是活性成分化学形式不同如某一化

57、合物的盐、酯等或剂型不同如片剂和胶活性成分化学形式不同如某一化合物的盐、酯等或剂型不同如片剂和胶囊剂的药物制剂也可能治疗等效囊剂的药物制剂也可能治疗等效72v 实验动物：通常为实验动物：通常为Beagle犬，犬，6只或适当增加只或适当增加 v 给药次数：通常单次给药？给药次数：通常单次给药？v 实验设计：双周期双穿插试验设计方案，获得受试制剂在实验设计：双周期双穿插试验设计方案，获得受试制剂在Beagle犬体内的药犬体内的药动学特征，与参比制剂比较进展相对生物利用度计算及生物等效性评价动学特征，与参比制剂比较进展相对生物利用度计算及生物等效性评价v 给药间隔：至少给药间隔：至少10个半衰期个半

58、衰期v 假如是缓释制剂，还要考察其药动学特征是否符合缓释制剂要求假如是缓释制剂，还要考察其药动学特征是否符合缓释制剂要求v 参考指南参考指南SFDAv 化学药物非临床药代动力学化学药物非临床药代动力学v 化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原那么化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原那么7374体内和体外研究方法体内和体外研究方法体内方法按方法的优先考虑程度从高到低体内方法按方法的优先考虑程度从高到低药代动力学研究方法药代动力学研究方法药效动力学研究方法药效动力学研究方法临床比较试验方法临床比较试验方法体外研究方法体外研究方法 一般不提倡用体外的方法来确定生物等效性

59、，因一般不提倡用体外的方法来确定生物等效性，因为体外并不能完全代替体内行为，但在某些情况为体外并不能完全代替体内行为，但在某些情况下，如能提供充分根据，也可以采用体外的方法下，如能提供充分根据，也可以采用体外的方法来证实生物等效性来证实生物等效性75v 药物浓度药物浓度-时间曲线时间曲线Concentration-Time curve,C-T来反映药物从制剂中释来反映药物从制剂中释放吸收到体循环中的动态过程。放吸收到体循环中的动态过程。v 药动学参数药动学参数v AUC、Cmax、Tmax、t1/2、CL、Vd、 v FAUCTAUCR100v 统计比较上述参数，判断两制剂是否生物等效统计比较

60、上述参数，判断两制剂是否生物等效v 对于屡次给药的对于屡次给药的 BA 和和BE 研究，提供受试制剂和参比制剂的三次谷浓度数研究，提供受试制剂和参比制剂的三次谷浓度数据据Cmin，达稳态后的，达稳态后的AUCss、Css-max、Css-min 、T ss-max、t1/2 、F等参数。当受试制剂与参比制剂剂量相等时，等参数。当受试制剂与参比制剂剂量相等时，F 值按下式计算：值按下式计算：FAUCss TAUCss R100式中式中AUCss T 和和AUCss R 分别为分别为T test) 和和R (reference) 稳态条件下的稳态条件下的AUC76v 普遍采用主要药代参数经对数转换