不同产地布渣叶总黄酮含量及其清除自由基活性研究

1、不同产地布渣叶总黄酮含量及其清除自由基活性研究 作者：潘天玲，李坤平，林赞菲，黄碧玲【摘要】 目的 测定13个不同产地布渣叶样品中总黄酮含量及其清除自由基活性。方法 采用Al(NO3)3NaNO2NaOH体系比色法测定总黄酮含量，采用1,1二苯基2苦基肼自由基（DPPH）、羟自由基（OH）和超氧自由基（O2-）等模型测定布渣叶总黄酮清除自由基活性。结果 各产地总黄酮含量差异较大，其中以广西来宾样品含量最高，达到了55.22 mgg-1，平均为27.06 mgg-1。各产地总黄酮样品均具有清除DPPH活性，其自由基清除率随供试品总黄酮浓度的增大而提高，呈现一定的量效关系；但其清除OH和O2-活性

2、与总黄酮浓度关系不明显。结论 不同产地布渣叶总黄酮含量差异较大；各产地布渣叶总黄酮均具有较好的自由基清除活性。 【关键词】 布渣叶；总黄酮；自由基；清除活性Abstract:Objective To analyze the contents of total flavonoids in Microcos paniculata L. from different habitats and the radicalscavenging activity of total flavonoids. Methods Contents of total flavonoids in the extracts

3、were analyzed by spectrophotometry based on Al(NO3)3NaNO2NaOH reaction system, and the radicalscavenging activity towards 1, 1diphenyl2picryhydrazyl （DPPH) radical, hydroxyl radical（OH）and superoxide anion radical（O2-）, were determined in vitro. Results Contents of total flavonoids in Microcos panic

4、ulata L. varied with habitats and 55. 22 mgg-1 was the highest. The average content was 27.06 mgg-1. All the samples had radicalscavenging activity against DPPH, OH and O2-. There was a clear doseeffect relationship between the radicalscavenging activity against DPPH and the concentration of flavono

5、ids, but no this relationship was found when againstOH and O2-. Conclusion Contents of total flavonoids in Microcos paniculata L. varied with habitats, and all the plants have radicalscavenging activity.Key words:Microcos paniculata L.；total flavoniods；radicalscavenging activity自由基是生物体内化学性质极其活跃的物质，其

6、大量存在会对生物膜、蛋白质、核酸等生物大分子造成危害。研究表明，肿瘤、衰老、心脑血管等疾病的发生与其有着密切的 联系 1,2。黄酮类化合物是 自然 界广泛存在的一类天然产物，具有抗氧化、抗突变、抗衰老等多种生物活性，其自由基清除活性是当前的研究 热点 之一1-3。 布渣叶，椴树科植物破布树（Microcos paniculata L.）的叶，主要分布于我国广东、广西、海南等地，富含黄酮类成分4-7，但未见有关其抗氧化和清除自由基活性的报道。本文对不同产地布渣叶总黄酮含量进行了分析，并选择了DPPH、OH和O2-等体外模型对其自由基清除活性进行了考察，旨在为其进一步的开发利用提供 科学 依据。

7、1 仪器与试药 数控超声波清洗机（KH400 KDB型，昆山禾创超声仪器有限公司，40 kHz，320 W），RE52AA旋转蒸发器（河南巩义英峪予华仪器公司），TU1810型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。 D101大孔吸附树脂（天津市海光化工有限公司）；芦丁（ 中国 药品生物制品鉴定所，批号：050923）；1,1二苯基2苦基肼（DPPH，Sigma公司）；氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、乙醇、甲醇、水杨酸、双氧水、硫酸亚铁、三羟甲基氨基甲烷、邻苯三酚、盐酸均为市售分析纯。布渣叶，2008年7月9月采自广东广州、阳江、化州、顺德、中山、沙坪、阳春、龙口、电白；广西来宾、玉林

8、、武鸣；海南儋州等地，由广州中医药大学中药学院李卫民教授鉴定为椴树科植物破布树（Microcos paniculata L.）的叶，干燥，粉碎，备用；药材存放在广东药学院制药工程教研室。 2 方 法 2.1 供试品溶液的制备6，7 精密称取不同产地布渣叶各2.500 g，加入体积分数70%乙醇50 mL，于30 下超声提取2次，第1次30 min，第2次20 min；合并两次滤液，减压回收至无醇味，加水至100 mL，静置，过滤，将滤液倒入已放有10 g预处理好的D101树脂的锥形瓶中，振荡吸附12 h后过滤，分别用50 mL去离子水、30 mL体积分数20乙醇和30 mL体积分数95乙醇洗脱

9、；收集体积分数95乙醇洗脱液，减压蒸干后用甲醇溶解并定容至25 mL，即得。2.2 标准曲线的制备5 精密称取120 干燥至恒重的芦丁对照品10.2 mg，置50 mL容量瓶内，用体积分数70%乙醇溶解并稀释至刻度，即得芦丁对照品溶液。精确吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.5、3.0 mL芦丁对照品溶液于10 mL量瓶中，分别补加体积分数70乙醇至5 mL；然后顺次加入质量分数5%NaNO2溶液0.3 mL，放置6 min，质量分数10%Al(NO3)3溶液0.3 mL，放置6 min，质量分数4%NaOH溶液4 mL，再加入体积分数70%乙醇溶液至刻度，摇匀，静置15 min后于510 nm处测定吸光度值。以吸光度A对芦丁质量（m）进行线性回归，得到回归方程：A=1.33175 m-0.00449（r=0.9989）。在0.08160.604 mg范围内，线性关系良好。23 总黄酮含量的测定方法 取各待测样0.1mL，按上述标准曲线显色方法显色后在510 nm处测定吸光度值A，根据上述标准曲线方程 计算 总黄酮质量。2.4 清除DPPH活性测定1，2 精密称取DPPH 2.74 mg，用95乙醇溶解并定容至10