第七章确认及验证

1、第七章 确认与验证o确认证明厂房、设施、设备和检验仪器能正确运行并可达到预期结果的一系列活动。o验证证明任何操作规程（或方法）、检验方法、生产工艺或系统能达到预期结果的一系列活动。验证与确认的关系o验证和确认本质上是相同的概念o确认通常用于厂房、设施、设备和检验仪器o验证则用于操作规程（或方法）、生产工艺或系统第一节 验证的概念和分类o一、验证的概念o20世纪50年代，美国出现输液导致败血症的事故，到了70年代，该类案件进一步增多。o1972年，英国发生德旺波特事故。o美国FDA检查后发现，药厂在生产过程中和质量控制过程中明显达不到GMP规定。o70年代，美国友FDA现场检验发展成为过程验证，

2、并逐步在制药业中得到了共识。o早期验证主要强调对灭菌工序的验证，1978年美国FDA公布药品工艺检查验收标准，提出工艺验证概念。o1987年，美国FDA发布药品生产工艺验证总则指南。o验证就是证明任何程序、生产过程、设备、物料、活动或系统确实能“达到预期”效果的有“文件证明”的一系列活动。o验证的是GMP的理论基础，验证的思想与GMP的中心思想是一致的。预期效果o预期的效果是一个定量值，而且是符合规定的通用标准值，而不是企业自己的标准。形成文件o验证过程中的各项活动要形成文件，包括验证计划、验证方案、测试记录、验证报告等。验证的意义o验证是药品生产企业实施GMP的基础。o验证可提高企业经济效益

3、。n及时纠正偏差，提高人员的安全保障n减少对半成品和成品的检验依赖性n减少废品、返工和投诉二、验证的分类o按验证方式（实施时间）：前验证、同步验证、回顾性验证、再验证。o按验证对象：厂房设施与设备的验证、产品工艺验证、分析方法验证、清洁验证。（一）前验证（一）前验证1设计确认设计确认2安装确认安装确认3运行确认运行确认4性能确认性能确认（二）同步验证o同步验证系指在系统或工艺等常规运行的同时进行的验证。也同步验证系指在系统或工艺等常规运行的同时进行的验证。也就是从活动进行过程中获得的数据作为分析和评价的依据，以就是从活动进行过程中获得的数据作为分析和评价的依据，以证明系统或活动达到预计要求的活

4、动。证明系统或活动达到预计要求的活动。o采用这种验证方式的先决条件为：采用这种验证方式的先决条件为：应有完善的取样计划，应有完善的取样计划，生产及工艺条件的监控比较充分，生产及工艺条件的监控比较充分，有经过验证的检验方法，有经过验证的检验方法，方法的灵敏度及选样性等比较好，方法的灵敏度及选样性等比较好，对所验证的产品或工艺已有相当的经验及把握。对所验证的产品或工艺已有相当的经验及把握。（三）回顾性验证o回顾验证系指利用对现有的历史数据进行统计分析，收集证据，回顾验证系指利用对现有的历史数据进行统计分析，收集证据，以证明程序、生产过程、设备、物料、活动或系统达到预期要以证明程序、生产过程、设备、

5、物料、活动或系统达到预期要求的行为。求的行为。o适用情况：适用情况：n关键质量属性和关键工艺参数均已确定；关键质量属性和关键工艺参数均已确定；n已确立了合适的中间控制和认可标准；已确立了合适的中间控制和认可标准；n从来没有因为除了操作人员失误或设备故障这些与设备适应从来没有因为除了操作人员失误或设备故障这些与设备适应性无关的因素之外的原因而造成值得注意的生产过程或产品的性无关的因素之外的原因而造成值得注意的生产过程或产品的不合格；不合格；n现有成品的杂质情况已确定。现有成品的杂质情况已确定。（四）再验证o再验证是指指工艺、程序、系统、设备经过再验证是指指工艺、程序、系统、设备经过验证并在使用一

6、个阶段以后，以及某些要素验证并在使用一个阶段以后，以及某些要素发生改变时所进行的验证。目的在于证实已发生改变时所进行的验证。目的在于证实已验证状态没有发生飘移而进行的验证。验证状态没有发生飘移而进行的验证。第二节 厂房设施与设备的验证o一、设计确认o企业根据药品生产的实际情况，对生产所用的设备设计和选型，从设备的价格、性能及设定的参数等方面加以考查，写出论证报告，经审核批准，选定供应厂商。二、安装确认o对设备性能参数、安装环境和安装过程进行确认，在设备安装后进行各种系统检查及技术资料的文件化工作。三、运行确认o通过单机试车和系统试车确定设备的运行是否符合设定标准。主要考察：nSOP草案的适用性

7、n设备运行参数的波动性n仪表可靠性n设备运行的稳定性四、性能确认o模拟实际生产情况，一般先用空白料进行试车，以确定设备的适用性。第三节 分析方法的验证o一、分析方法验证的概念o是指对药品生产过程中所使用的检测方与分析方法进行验证，证明这些方法确实能达到预期检验目的。二、分析方法验证的内容o1、准确度o准确度指用该方法检测结果与真实值或参考值接近的程度，一般以百分回收率表示。2、精密度o精密度指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。n重复性n中间精密度n重现性3、专属性o专属性指在其他成分可能存在的情况下，对被分析物进行准确可靠测定的能力。o如何排除杂质干扰？

8、o4、检测限度：样品中被测物能被检测出的最低量。o5、定量限度：样品中被测物能被测定的最低量。o6、线性性：指在给定范围内，检测结果与样品中被测物浓度呈正比的程度。o7、范围：测试方法适用的高低限浓度或量的区间。第四节 无菌工艺验证o注射剂的风险o风险1 - 微生物污染 o风险2 - 热原的污染o风险3 - 不溶性微粒o风险4 - 纯度 o其他风险：安全性（组织的刺激性，毒性发应）、渗透压、pH。一、无菌工艺验证概述o最终灭菌工艺n先将药品的各个部件（产品，容器和密封件）在符合要求的环境下组成最终的包装形式，最后让产品在其最终容器中进行灭菌处理。o无菌生产工艺n药品的各个部件（产品，容器和密封

9、件）分别经过灭菌处理，再在高洁净度的环境中组装最终产品，但产品装入其最终容器后不再进行灭菌处理。o相对于最终灭菌工艺，无菌生产工艺易受到多方面因素的影响，产品的无菌性非常脆弱，生产难度更高，且需承担的质量风险也更大。o无菌工艺验证是实现产品无菌保证的关键。无菌生产系统无菌生产系统28消毒剂消毒剂灭菌设备灭菌设备清洗清洗设备设备蒸汽蒸汽灭菌灭菌干热干热灭菌灭菌水预水预处理处理纯蒸汽纯蒸汽发生器发生器高风险操作区域高风险操作区域混合混合灌装灌装其他其他VHP,EOVHP,EO发生器发生器冻干机冻干机最终最终灭菌灭菌压缩空气压缩空气无菌检测无菌检测o无菌工艺验证是指证明按照预定的工艺规程使用的设备和

10、包装材料能够始终如一的生产出符合要求的无菌产品，从而确认无菌生产工艺系统的可靠性和适用性。o最为常用的无菌工艺验证方法是培养基灌装试验，即采用正常生产的灌装程序，用培养基代替产品灌封来模拟无菌灌装操作的无菌性。二、无菌工艺验证要点o1、培养基选择o无抑菌作用o较好的澄明度o易于灭菌2、最劣工况理念o最劣工况的目的是有意对工艺、系统、设备在更高的挑战条件下进行验证。储存时间o灌装设备、灌装部件、储罐、无菌物料、药液在实际灌装前能够放置的最长时间o例1: 用需要再灭菌前的灌装设备、灌装部件、储罐、无菌物料参与培养基灌装o例2:无菌过滤后存放在储罐内的培养基到实际生产时产品的最大储存时间后再灌装无菌

11、灌装时间 o在培养基灌装中模拟用时最长的瓶子满批量生产需要的时间，其中包括正常的干扰时间（换班、设备维修）。灌装速度和瓶子规格o最慢的速度，最大的瓶子规格o最小的瓶子规格，最快的速度人员o培养基灌装时模拟无菌区可能容纳最多的人数o无菌区工作人员至少每年参与一次培养基灌装操作干扰o正常的（灌装线装配，称量调节，加胶塞，处理倒瓶，取样，环境监测）。o 非正常的（设备故障，灌装线堵塞，轨道调节，拆卸/替换破损的部件）。o干扰的次数应该不少于正常生产时发生的次数。工艺气体o使用氮气的，因考虑其不利于微生物生长，以压缩空气代替。3、验证规模污染率低于0.1%计算公式：实际污染率 = (95%置信限值)/

12、(灌封容器数) 100%污染瓶数与95%置信限值间的关系污染瓶数01234567891095%置信限值34.746.37.759.1510.51 11.8413.1514.4315.7116.964、验证次数o初次验证，至少要连续成功灌封3个批次。o再验证，至少需要成功灌封1个批次。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长。 评价结果，确定实际生产中（如灌装前的调试、加入无菌原辅材料、无菌连接、灌装和密封）产品污染的可能性。 6、环境监测o空气净化系统的验证（温湿度，压差，空气流向，风速，高效过滤器泄漏测试）o环境性能测试（静态动态）n悬浮粒子和恢复速率测试 n微生物测试：空气浮游菌，

13、沉降菌，表面微生物o人员监测7、样品收集与培养o微生物浸泡法：n将铝盖去除;n倒置于菌悬液中4小时;n取出后消毒外表面;n20-25和30-35分别培养7天，共14天，每天观察生长情况。菌液待确认密封口支架培养基容器8、结果评价与失败调查l灌封量10000瓶时，若有1瓶污染，需彻底调查；若有两瓶污染，必须进行彻底调查，并重新验证（3批）。第五节 清洁验证o清洁验证就是指对厂房设施、设备仪器和容器具清洁所使用的规程，也称为清洁规程进行验证，确认其效果有效、稳定。n建立清洁标准n建立取样方法n建立检验方法n建立数据分析方法一、清洁验证工作阶段o开发阶段制定清洁规程；o方案准备阶段确定最难清除物质、

14、取样点、最大残留量标准等；o方案实施阶段开展试验、获得数据、评价结果、得出结论、确立规章；o监控及在验证阶段投入运行的清洁方法监控，有变更的实行表更管理，并确定在验证的周期。二、清洁方法的选定o1、清洁方式o手工清洁：人工持清洁工具，按预定的要求清洗设备，根据目测清洁的程度，直至清洁完成。o自动清洁：由自动化的专门设备按一定的程序自动完成整个清洁过程的方式。清洁方式选用o自动清洁：设备体积庞大、内表面光滑无死角，生产使用的物料或产品易溶，如大容量注射剂的配制系统。o手工清洁：设备死角较多，产品易粘结、易结块注射剂的罐装机、胶囊填充机及制粒机、压片机。2、清洁规程o清洁规程规定每台设备的清洗程序

15、，从而保证每个操作人员都能以可重复的方式对其进行清洗，并获得相同的清洁效果。清洁规程要点o拆卸o应规定清洁一台设备需要拆卸的程度。o如大容量注射剂的灌装机、一步制粒机在清洁前需要预先拆卸到一定程度。o小针的灌装机可以完全拆卸。预洗o预洗的目的是除去大量的（可见的）残余产品或原料，为此后的清洁创造一个基本一致的起始条件。o水质要求：饮用水清洗o用清洁剂以一定的程序除去设备上看不到的产品。o为提高清洗效率，可采用多步清洗的方式。o水质要求：饮用水、纯化水淋洗o用水淋洗设备表面，以除去设备上看不到的清洁剂。o水质要求：纯化水、注射用水。干燥o对于须暴露保存的设备，应进行干燥；对于经过验证的清洁程序，

16、如果设备淋洗后要进行灭菌处理，或是高温无菌的注射用水淋洗并保持密闭的设备可不进行干燥。检查o经清洁验证程序的清洗的设备，可通过目检方式进行检查，如目检发现残留物，向负责人汇报以采取纠偏措施。储存、装配o规定已清洁设备和部件的储存条件和最长储存时间，防止再次污染。规定被拆卸部件重新装配的各步操作。3、选用清洁剂原则o安全、无危害性、无毒性o溶解性好，易被纯水去除o低发泡的o经济实惠o成份明确o符合食品标准或相关法规清洁剂o水溶性清洁剂n水:水溶性制剂n碱性清洁剂，如NaOH溶液、表面活性剂:油性制剂n弱碱溶液，如Na2CO3、 NaHCO3 :弱酸性制剂n弱酸溶液:弱碱性制剂清洁剂o有机溶剂清洁

17、剂n乙醇n易挥发的溶剂三、清洁验证的合格标准o1、最难清洁物质o通常以各组分中最难溶解的物质作为最难清洁物质。n活性成分n溶解度非常小的辅料n溶解度最小的活性成分2、最难清洁部位和取样点o取样点选择原则：最难清洁的部位o流动为层流部位o设备内部死角o清洁剂不易接触的部位o容易吸附残留物的部位o压力、流速迅速变化处3、残留物限度的确定o确立残留物限度时隔复杂的问题，由于设备和产品差别太大，FDA无通用标准，但是，验证过程必须要求有明确的残留物限度。浓度限度（10ppm）o上一批产品的残留质全部溶解到下一批产品中所致的浓度不得高于10ppm o合理性：一般分析方法能检测，非高活性产品足够安全，适用

18、于液体制剂、原料。生物学活性限度MTDD/1000oMTDD为药品注册必备数据，经过多期临床验证o充分考虑了个体差异o符合GMP足够安全的理念o适用于各种复杂情况如特殊表面o特别适用于高活性物质举例A A 产品产品B B产品产品备备 注注 每日使用每日使用1-51-5片片每片每片5mg5mg最低日治疗剂量：最低日治疗剂量：5mg x 15mg x 1片片 = 5mg = 5mg 每日使用每日使用 2-62-6片片每片重每片重0.5g0.5g每日最多使用制每日最多使用制剂数为剂数为6 6 片，即片，即3g3g最低日剂量最低日剂量1/10001/1000计计算：算：5mg x 15mg x 1片片

19、x 1/1000 x 1/1000 = 5 g = 5 gA A产品为先加工产品，产品为先加工产品，5mg5mg是成品中主药的是成品中主药的含量含量 B B产品为后续加产品为后续加工产品工产品 应控制的限度：应控制的限度：5 g(A)/3g(B) = 5 g(A)/3g(B) = 1.7 g(A)/g(B)1.7 g(A)/g(B)肉眼观察限度o经验o定性标准o用于已验证设备的日常监控4、微生物含量限度o以满足生产和质量控制标准为出发点。o以大输液灭菌前带菌量限度100CFU/100ml为例：n最终淋洗液样品10CFU/100mln设备表面微生物限度Lm计算nLm=残留微生物总量M/总表面积S/安全因子FnM=100