血管内皮生长因子-C表达与临床Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结转移和化

1、血管内皮生长因子-C表达与临床期非小细胞肺癌淋巴结转移和化疗的关系         11-01-05 11:20:00     作者：王耀鹏 朱晓峰 王洲    编辑：studa20【摘要】  目的探讨临床I期(cI期)非小细胞肺癌(NSCLC)中血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达、微淋巴管密度(MLVD)、淋巴结转移及其与化疗的关系。方法应用免疫组化SP法检测cI期NSCLC癌组织、癌旁组织及正常肺组织中VEGF-C的

2、表达，计数MLVD，检测血清VEGF-C蛋白含量，并结合病理淋巴结转移情况和化疗前、后VEGF-C蛋白含量的变化进行统计学分析。结果在NSCLC中，VEGF-C呈过度表达，与癌旁组织和正常肺组织相比差异有统计学意义(P<0.01);在癌组织中淋巴结阳性组和淋巴结阴性组的VEGF-C阳性表达率(91.9% vs. 76.7%)、MLVD(20.0±4.8) vs. (10.6±2.2)差异有统计学意义(P<0.01);血清VEGF-C蛋白含量与组织检测VEGF-C具有较好的相关性(r=0.848, P<0.01)，化疗患者化疗前血清VEGF-C蛋白含量(23

3、7±72.3)ng/mL较化疗后(178±69.2)ng/mL变化明显(P<0.01)。结论VEGF-C在cI期NSCLC中过度表达与淋巴结转移密切相关;血清VEGF-C蛋白含量测定是一种有效的VEGF-C检测方法;化疗前、后血清VEGF-C蛋白含量的变化可以预测化疗效果。 【关键词】  非小细胞肺癌;血管内皮生长因子;微淋巴管密度;淋巴结转移ABSTRACT: ObjectiveTo study the correlation of vascular endothelial growth factor-C (VEGF-C) expression and l

4、ymphatic microvessel density (MLVD) with lymphatic metastasis and sensitivity of chemotherapy in non-small cell lung cancer (NSCLC) of clinical stage .MethodsVEGF-C expression and MLVD were detected in cancer tissues, para-cancer tissues of clinical stage I NSCLC and normal lung tissues. The clinico

5、-pathological results of lymphatic metastasis and VEGF-C protein changes after chemotherapy were analyzed statistically.ResultsIn cancer tissues of NSCLC, the over-expression of VEGF-C was significantly higher than that in para-cancer tissues and normal lung tissues (P<0.01). The positive rates o

6、f VEGF-C expression (91.9% vs. 76.7%) and MLVD (20.0±4.8)vs. (10.6±2.2) in lymphatic metastasis group were significantly higher than those in groups without lymphatic metastasis (P<0.01). The detection of VEGF-C in serum had a close correlation with VEGF-C protein in tissues (r=0.848, P

7、<0.01). The level of VEGF-C protein in serum before chemotherapy (237±72.3)ng/mL was significantly reduced after chemotherapy(178±69.2)ng/mL, P<0.01).ConclusionOver-expression of VEGF-C is closely related to lymphatic metastasis in NSCLC of clinical stage . The detection of VEGF-C in

8、 serum is helpful in clinical stage; changes of VEGF-C protein in serum before and after chemotherapy can predict the results of chemotherapy.KEY WORDS: non-small cell lung cancer (NSCLC); vascular endothelial growth factor-C (VEGF-C); lymphatic microvessel density; lymphatic metastasis肺癌的发病率在逐年增高，其

9、中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)是其主要类型，淋巴结转移是影响NSCLC的主要因素之一。本研究通过检测67例临床期(c期)NSCLC患者的癌组织、癌旁组织和20例正常肺组织中的血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C)表达，计数微淋巴管密度(MLVD)，探讨其与淋巴结转移的关系;检测相关血清VEGF-C的蛋白含量，分析血清VEGF-C检测的意义，并通过化疗前、后血清VEGF-C的变化推测化疗的敏感性。1材料与方法1.1研究对象选取青岛大学医学院附属医院胸外科2008年1月20

10、08年7月间的全部手术患者。入组条件为：手术前没有施行放疗和化疗;术前临床分期(结合强化CT、PET-CT、纵隔镜检查等)为c期;手术施行了根治性肺叶切除、系统性淋巴结清扫;随访资料确实;术后常规病理确诊为NSCLC的患者。共67例患者入组。手术中取标本癌组织、癌旁肺组织(为距肿块边缘3cm以上肺组织)，以同期20例行良性肿瘤肺叶切除术患者的正常肺组织作为对照。淋巴结清扫范围参考MD-ATSmap1肺癌区域淋巴结图谱。37例术后病理有淋巴结转移患者，在术后行顺铂与长春瑞宾两药联合标准化疗方案治疗。采取全部患者术前、化疗患者化疗前和化疗后(即第3周期化疗前)空腹血5mL，离心保留血清，置于-70

11、冰箱保存。1.2试剂和设备克隆抗体VEGF-C、单克隆抗体D2-40购自北京中杉金桥生物技术有限公司;ELISA试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;BIO-TEK ELX808酶标仪等。1.3标本处理方法术中取新鲜标本组织，直径约为0.5cm，常规石蜡固定，4m连续切片，取中间3张，1张行HE染色，1张行VEGF-C免疫组化染色，1张行D2-40染色。ELISA操作按照试剂盒说明进行，检测波长为450nm，全部标本双管检测，取平均值，差距超过50pg/L时重新操作。1.4结果判定结果由3位病理科医师独立单盲阅片，结果差距超过30%者，交换阅片，取其平均值。VEGF-C和D2-40的阳性免疫产物是位于细胞质内的棕黄色颗粒。VEGF-C：基本不着色为0分，着淡黄色为1分，着色适中为2分，着色深黄为3分;着色细胞占总细胞数<5%为0分，5%25%为1分，26%50%为2分，>50%为3分。将每张切片的着色程度得分和着色细胞数得分相乘为最后得分：01分为阴性(-)，23分为弱阳性(+)，45分为阳性()，69分为强阳性()。D2-40：凡染成棕黄色颗粒状，