生物化学实验常用试剂、缓冲溶液的配制

1、生物化学实验常用试剂、缓冲溶液的配制方法http:/vok-1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 组份浓度 0.5mol/L配制量 2L配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。2.用去离子水溶解并稀释至2L。2、0.5mol/L盐酸溶液 组份浓度 0.5mol/L配制量 2L配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。2.用去离子水稀释至2L。4、0.2葡萄糖标准溶液 组份浓度 0.2配制量 1L配置方法 1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中，在70干燥2小时。2.干燥器中冷却至室温，重复干燥，冷却至恒重。3.准确称取葡萄糖2.000g。4.用去离子水溶解并定容至1L5.于4保存。5、250g/mL牛血清

2、 组份浓度 250g/mL白蛋白标准液 配制量 2L配置方法 1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。3.4保存。6、Folin试剂甲配置方法 1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中，加入50g无水碳酸钠，溶解，待用。2.称取0.5g酒石酸钾钠，溶于80mL去离子水中，加入0.25g硫酸铜5水，溶解。3.将1：2：去离子水按20：4：1的比例混合即可。4. 4保存，可用一周。7、Folin试剂乙配置方法1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠2水25.0359g，钼酸钠2水6.2526g，去离子水175mL，85磷酸12

3、.5mL，浓盐酸25mL，充分混合。2.回流10小时，再加硫酸锂37.5g，去离子水12.5mL及数滴溴。3.然后开口沸腾15min，以驱除过量的溴，冷却后定容到250mL。4.于棕色瓶中保存，可使用多年注意：上述制备地Folin试剂乙地贮备液浓度一般在2mol/L左 右，几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的 浓度作为应用液，我们这时是把贮备液于使用前稀释18 倍，使之浓度为0.1mol/L略高。这种稀释18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的“应用液”。Folin试剂乙贮备 液浓度的标定，一般是以酚酞为指示剂。用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液，

4、当溶液颜色由红变为紫灰，再突然变成墨绿即为终点，如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙，终点不太好掌握，溶液地颜色是由浅黄变为浅绿，再变为灰紫色为终点。8、DNS试剂配置方法 1.取3，5-二硝基水杨酸10g,加入2mol/L氢氧化钠溶液200mL。 （3，5-二硝基水杨酸试剂）2.将3，5-二硝基水杨酸溶解，然后加入酒石酸钾钠300g。3. 待其完全溶解，用去离子水稀释至2000mL，棕色瓶保存。9、5蔗糖溶液 组份浓度 5配制量 1L配置方法 称取蔗糖50g，用去离子水溶解定容至1L。10、0.1mol/L蔗糖溶液 组份浓度 0.1mol/L配制量 1L配置方法 称取蔗糖34.230g，用去

5、离子水溶解并定容至1L。 11、20乙酸溶液 组份浓度 20配制量 1.2L配置方法 量取冰乙酸300mL，用去离子水稀释至1200mL。12、30（W/V）Acrylamide组份浓度 30（W/V）Acrylamide 0.05配制量 1L配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中Acrylamide 290gBIS 10g2.向烧杯中加入约600mL的去离子水，充分搅拌溶解3.加入去离子水将溶液定容至1L，用0.45m滤膜滤去杂质。4.于棕色瓶中4保存。注意：丙稀铣胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量

6、的未聚合成份。13、40（W/V）Acrylamide组份浓度 40（W/V）Acrylamide 0.05配制量 1L配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中Acrylamide 380gBIS 20g2.向烧杯中加入约600mL的去离子水，充分搅拌溶解3.加入去离子水将溶液定容至1L，用0.45m滤膜滤去杂质。4.于棕色瓶中4保存。注意：丙稀铣胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收， 其作用有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无 毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。 14、10（W/V）过硫酸铵组份浓度 10（W/V）过硫酸铵配制量 10mL配置方法 1.称取1g过硫酸

7、铵。2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。3.贮存于4。注意：10过硫酸胺溶液在4保存时间可使用2周左右，超过期限会失去催化作用。15、考马斯亮蓝R-250染色液组份浓度 0.1（W/V）考马斯亮蓝R-250，25%（V/V）异丙醇， 10（V/V）冰醋酸 配制量 1L配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。3.加入100mL的冰乙醋酸，均匀搅拌。4.加入650mL的去离子水，均匀搅拌。5.用滤纸出去颗粒物质后，室温保存。16、考马斯亮蓝染色脱色液组份浓度 10（V/V）醋酸，5（V/V）乙醇配制量 1L配置方法 1.量取

8、下列溶液，置于1L烧杯中。醋酸 100mL乙醇 50mLdH2O 850mL2.充分混合后使用。17、凝胶固定液组份浓度 50（V/V）甲醇，10（V/V）醋酸(SDS-PAGE银氨染色用) 配制量 100L配置方法 1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。甲醇 500mL醋酸 100mLdH2O 400mL2.均匀混合后室温保存。18、凝胶处理液组份浓度 50（V/V）甲醇，10（V/V）戊二醛(SDS-PAGE银氨染色用) 配制量 1L配置方法 1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。甲醇 50mL戊二醛 10mLdH2O 40mL2. 均匀混合后室温保存。19、凝胶染色液组份浓度 0.4（W/V）硝

9、酸银，1（V/V）浓氨水，(SDS-PAGE银氨染色用) 0.04（W/V）氢氧化钠配制量 100L配置方法 1.量取下列试剂，加入100200mL试剂瓶中。 20硝酸银 2mL浓氨水 1mL4氢氧化钠 1mLdH2O 96mL2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈现混浊状，此时应补加浓氨水，直至透明。3.本染色液应现用现配，不宜保存。20、显影液组份浓度 0.005（V/V）柠檬酸，0.02（V/V）甲醛(SDS-PAGE银氨染色用) 配制量 1L配置方法 1.称取下列试剂，置于1L试剂瓶中。 柠檬酸 50mg 甲醛 0.2mL2.加入1L去离子水后，摇动混合后溶解。3

10、.室温保存。21、45乙醇溶液 组份浓度 45配制量 1L配置方法 量取无水乙醇450mL，加入去离子水550mL，混匀。 22、5的十二烷基硫酸钠溶液 组份浓度 5（W/V） 配制量 0.1L配置方法:称取5.0g十二烷基硫酸钠,溶于100mL4的乙醇溶液中。23、三氯甲烷-异戊醇混合试剂配置方法 取500mL三氯甲烷试剂，加入21mL异戊醇试剂，混匀。 24、1.6乙醛溶液 组份浓度 1.6配制量 0.1L配置方法 取47乙醛3.4mL，用去离子水定容至100mL。25、二苯胺试剂配置方法 1.称取二苯胺试剂0.8g，溶解于180mL冰乙酸中，2.再加入8mL高氯酸混匀。3. 临用前加入0

11、.8mL 1.6乙醛溶液。注意：配制完成后试剂应为无色。26、15三氯乙酸溶液 组份浓度 15配制量 2L配置方法 称取三氯乙酸300g，用去离子水溶解定容至2000mL。 27、1谷氨酸溶液 组份浓度 1配制量 0.5L配置方法 1.称取5g谷氨酸，先用适量得用去离子水溶解。2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。3. 最后用去离子水定容至0.5L。28、1丙酮酸溶液 组份浓度 1配制量 0.5L配置方法 1.称取5g丙氨酸，先用适量得用去离子水溶解。2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。3. 最后用去离子水定容至0.5L。29、0.1的碳酸氢钾溶液 组份浓度 0.1配制量 0.5L配置方法 称取碳酸

12、氢钾0.5g，用去离子水溶解定容至0.5L。 30、0.05的碘乙酸溶液 组份浓度 0.05配制量 0.25L配置方法 称取0.125g碘乙酸，用去离子水溶解定容至0.25L。31、Locke氏溶液 配制量 2L配置方法 称取18g氯化钠,0.84g氯化钾, 48g氯化钙,0.3g碳酸氢钠，2g葡萄糖，用去离子水溶解定容至2000mL。32、0.2mol/L的丁酸溶液 组份浓度 0.2mol/L配制量 1L配置方法 1.量取18mL正丁酸试剂。2.用1mol/L的氢氧化钠中和。3.再用去离子水定容至1L。33、0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液 组份浓度 0.1mol/L配制量 10L配置方法

13、称248.17g硫代硫酸钠，用去离子水溶解并定至10L。34、0.1mol/L的碘溶液 组份浓度 0.1mol/L配制量 1L配置方法 1.称取碘12.7g和碘化钾25g。2.用去离子水溶解并定容至1L。3.用0.1mol/L的硫代硫酸钠标定。35、10氢氧化钠溶液 组份浓度 10配制量 2L配置方法 称取200g氢氧化钠，用去离子水溶解并定容至2L。36、10盐酸溶液 组份浓度 10配制量 0.2L配置方法 量取浓盐酸49.3mL，用去离子水定至0.2mL。37、0.1标准丙氨酸溶液 组份浓度 0.1配制量 0.5L配置方法 称取丙氨酸0.5g，用去离子水溶解并定容至0.5mL。38、0.1

14、标准谷氨酸溶液 组份浓度 0.1配制量 0.5L配置方法 称取谷氨酸0.5g，用去离子水溶解并定容至500mL。39、0.1水合茚三酮乙醇溶液 组份浓度 0.1配制量 1L配置方法 称取1g水合茚三酮试剂，溶于1000mL无水乙醇中。40、酚溶液配置方法 在大烧杯中加入80mL去离子水，再加入300g 苯酚，在水 浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗内，轻轻振荡混合，使其成为乳状液。静止710小时，乳状液变成两层透明溶液，下层为被水饱和的酚溶液，放出下层，贮存于棕色瓶中备用。41、0.5淀粉溶液 组份浓度 0.5配制量 0.1L配置方法 称

15、取淀粉0.5g，用去离子水溶解定容至0.1L。42、对羟基联苯试剂配置方法 称取对羟基联苯1.5g，溶于100mL0.5氢氧化钠溶液中，配制成1.5的溶液。若对羟基联苯颜色较深，应用丙酮或 无水乙醇重结晶，放置时间较长后，会出项针状结晶，应摇匀后使用。1、0.2 mol/L 磷酸缓冲液 组份浓度 0.2mol/L（pH 6.0） 配制量 1L配置方法 1. 称取磷酸氢二钠12水 8.82 g。2. 称取磷酸二氢钠2水 27.34g。3. 用去离子水溶解并定容至1L。室温保存。注意：此为母液，使用时稀释40倍使用。2、洗脱液 组份浓度 0.15mol/L（含0.15mol/L氯 配制量 10L化

16、钠的0.005mol/L 配置方法 1.称取氯化钠87.66g。pH 6.0的磷酸缓冲液） 2. 用0.2mol/L pH6.0的磷酸缓冲液250mL溶解。3. 用去离子水稀释至10 L。室温保存。3、0.3mol/L磷酸缓冲液 组份浓度 0.3mol/L（pH7.8） 配制量 0.5L配置方法 1.准确称取磷酸氢二钠12水49.150g。2.磷酸二氢钠2水2.000g。3. 用去离子水溶解并定容至0.5L。室温保存。注意：此为母液，使用时稀释10倍使用。4、0.2mol/L乙酸缓冲液 组份浓度 0.2mol/L（pH4.6） 配制量 2L配置方法 1.准确称取乙酸钠3水54.44g。2. 加

17、入23mL冰乙酸，溶解。3. 用去离子水溶解并定容至2L。4保存。5、0.2mol/L磷酸-柠檬酸 组份浓度 0.2mol/L缓冲液 配制量 各1L（pH 2.6、4.6、6.6）配置方法 1. 母液A（0.2mol/L的Na2HPO4溶液）：称取Na2HPO412水143.256g， 用去离子水定容至2L。2. 母液B（0.1mol/L的柠檬酸溶液）：称取柠檬酸1水42.028g 用去离子水溶解定容至2L。3. pH2.6、4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制：pH值 A（mL） B（mL）2.6 109.0 891.04.6 467.5 532.56.6 727.5 272.54. 按上表

18、混匀后，4保存。6、20×SSC 缓冲液 配制量 1L（pH7.0） 配置方法 1.准确称取175.2g氯化钠。2.准确称取88.2g柠檬酸钠2水。3.溶解于800mL去离子水中。4.加入数滴10mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。5.加去离子水定容至1L。注意：按实验需要可分装后高压灭菌。10×SSC、5×SSC、1×SSC可由20×SSC做相应稀释得到。7、0.15mol/L氯化钠- 组份浓度 0.15mol/L乙二胺四乙酸二钠 配制量 1L缓冲液 配置方法 1.准确称取氯化钠8.77g。（pH8.0） 2. 称取乙二胺四乙酸二钠37.2g。3. 溶于800mL去离子水中。4.用固体的氢氧化钠调pH值为8.0。5.加去离子水定容至1L。8、1/15mol/L的磷酸盐 组份浓度 0.15mol/L缓冲液 配制量 1L（pH7.6）配置方法1.溶液甲（1/15mol/L