加味四妙方抗痛风作用有效部位的药效学研究

1、加味四妙方抗痛风作用有效部位的药效学研究                     作者：胡新 时乐 徐立 尹莲【关键词】  四妙方；,有效部位；,药效学摘要：目的：观察加味四妙方（简称全方）各部位的抗炎、镇痛作用及对痛风性关节炎的影响，探讨全方治疗痛风作用的有效部位。方法：采用尿酸钠结晶致大鼠足肿胀法、化学刺激引起小鼠扭体反应、二甲苯致小

2、鼠耳肿胀，观察全方及各部位的抗炎、镇痛作用。结果：全方、有机酸能显著减少小鼠扭体次数(P<0.01)。全方、黄酮、生物碱、皂苷能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.01)，有机酸、水溶性成分，挥发油也有一定的抑制作用(P<0.05)。对由尿酸盐引起的大鼠足肿胀，全方和水溶性成份组在16 h内，均有抑制作用(P<0.01或P<0.05)，黄酮组大鼠足肿胀率均低于模型组，在 1，5 h和6 h有统计学的差异(P<0.01或P<0.05)，有机酸组在1、3和5 h对鼠足肿胀率也有一定的抑制作用(P<

3、0.05)。结论：有机酸体现出了抗炎、镇痛和抗痛风的综合作用。关键词：四妙方；  有效部位；  药效学对四种加味四妙方方剂进行了药理学比较， 实验结果表明：加用了土茯苓的四妙方具有明显的抗炎作用，而且起效快、作用维持时间长，无明显毒性反应。本实验采用分部位提取的方法分离出黄酮、皂苷、有机酸、挥发油、生物碱、水溶成分等1，在此基础上，拟对全方各部位开展进一步药效学研究，以期寻找出加味四妙方发挥作用的有效部位。1  实验材料1.1  动物昆明种小鼠，SD大鼠，雄性。由南京中医药大学实验动物中心提供，实验动物饲

4、养许可证号：SYXK(苏)20020012。1.2  药物全方，2.73 g生药/ml；生物碱，5 g生药/m1；黄酮，5 g生药/m1；有机酸，5 g生药/ml；皂苷，7.5 g生药/m1；水溶性部位，7.5 g生药/ml；挥发油，15 g生药/m1；批号:031016。微晶型尿酸钠(MSU)，批号：030328。以上药物由南京中医药大学中药化学教研室提供。吲哚美辛25 mg/片，广东华南制药厂，批号：020602；冰醋酸，上海试剂四厂，批号：020430；二甲苯，上海凌峰化学试剂有限公司，批

5、号：020402。1.3  仪器 9 mm打孔器；鼠足容积测定器，自制；JA1203上皿电子天平，上海天平仪器厂。2  实验方法2.1  对醋酸引起化学性刺激的镇痛作用2将小鼠随机分为模型组、阳性组、全方组、生物碱、黄酮、有机酸、皂苷、水溶性成分、挥发油等9组，分别灌给生理盐水、吲哚美辛、全方、生物碱、黄酮、有机酸、皂苷、水溶性成分、挥发油。给药后30 min腹腔注射0.7%醋酸0.2 ml/只，观察小鼠第1次因疼痛引起扭体的时间和20 min内扭体次数。结果见表1。结果表明，全方、有

6、机酸能明显减少小鼠扭体次数，与模型组相比，有显著性差异（P0.01)。2.2  加味四妙方对二甲苯所致的耳肿胀的抗炎作用3小鼠分组同上，分别灌胃给药，连续3 d。第3天给药后45 min，于小鼠右耳两面涂二甲苯0.025 ml/只致肿，左耳不涂为正常耳。45 min后脱颈椎处死小鼠，用9 mm打孔分别在相同部位打下圆片，电子天平称重，每鼠右耳重量左耳重量=肿胀度。结果见表2。结果表明，全方、黄酮、生物碱、皂苷对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用(P<0.01)，有机酸组、水溶性成分组、挥发油组也有一定的抑制作用（P0

7、.05）。2.3  加味四妙方对尿酸盐所致足肿胀的抗痛风作用4大鼠分组同上，分别灌胃给药，连续5 d。第5天灌胃后，用鼠足容积测定器测量大鼠右后足容积，记录。于右后足关节腔内注射MSU0.2 ml/只（100 mg/ml），1，2，3，4，5，6 h后分别测量大鼠右后足容积，计算足肿胀率。肿胀率=（注射MSU后大鼠右后足容积-注射MSU前大鼠右后足容积）/注射MSU前大鼠右后足容积。结果见表3。表1  加味四炒方对化学性刺激的镇痛作用（略）与模型组比较,*P0.05，*P0.01，n=10表2  

8、;加味四炒方对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用（略）与模型组比较,*P0.05，*P0.01，n=10表3  加味四炒方抗痛风作用的结果（略）与模型组比较，*P0.05，*P0.01，n=8    结果表明，全方和水溶性成份组在造模后16 h内，均能抑制大鼠的足肿胀率（P0.01或P0.05），黄酮组大鼠足肿胀率均低于模型组，且在1，5 h和6 h有统计学的差异（P0.01或P0.05），有机酸组在1，3 h和5 h对鼠足肿胀率也有一定的抑制作用（P0.05）。3  结

9、论采用醋酸引起的小鼠化学性刺激模型、二甲苯所致的小鼠耳肿胀模型、尿酸盐所致大鼠痛风性关节炎模型，对加味四妙方各部位进行评价。结果表明，全方有抗炎、镇痛和抗痛风作用(P<0.01工P<0.05)；有机酸有一定的抗炎镇痛作用(P<0.01或P<0.05)，在形成大鼠痛风性关节炎模型1，3 h和5 h后，也有一定的抗痛风作用(P<0.05)；水溶性成份有一定的抗炎和抗痛风作用(P<0.01或P<0.05)，但未表现出镇痛作用；黄酮对耳廓炎症有明显的抑制作用(P<0.01)，在1、5和6 h也表现出一定的抗痛风作用(P<

10、;0.01或P<0.05)。生物碱和皂苷仅对小鼠耳廓炎症有明显的抑制作用(P<0.05)，未表现出镇痛和抗痛风的作用。以上实验结果可以看出，加味四妙方的各部位都表现有一定的作用，但有机酸体现出了抗炎、镇痛和抗痛风的综合作用，因此，对本方抗炎、镇痛作用以及治疗痛风的有效部位的研究，可在有机酸的基础上进一步开展。参考文献：1  时  乐，徐  立，尹  莲.四种不同加味“四妙散”抗实验性痛风作用的比较J.南京中医药大学学报，2005，21（2）：106107.2  陈  奇.中药药理研究方法学M.北京：人民卫生出版社，1993：378378.3  李仪奎.中药药理实验方法学M.上海：科学技术出版社，1991：300300.4   Coderre TJ and Wall PD.Ankle joint urate arthritis in&