净血宁口服液中人参总皂甙含量测定的研究

1、    净血宁口服液中人参总皂甙含量测定的研究        净血宁口服液是一种保健调脂药品。本品以绞股蓝、黄芪、白术、淫羊藿、决明子、泽泻、丹参等为原料，经水提、酒沉浓缩而成。具有益气消痰、健脾补肾，祛湿化瘀的功效，适用于高血脂症。绞股蓝系君药，其主要成分为人参皂甙，能与香草醛、高氯酸溶液反应显色，据此，我们建立了测定净血宁口服液中人参总皂甙含量的方法。本法稳定，重现性好，切实可行，现介绍于下。1仪器与试剂分光光度计(751G上海分析仪器厂)；所用试剂；均为分析纯样品：永安

2、药业有限责任公司生产；对照品：绞股蓝含有70余种皂甙1，它们均具有与人参皂甙相似的四环三萜基本结构，其中5种与人参皂甙Rb1、Rb2、Rb3、Rd及F2相同，因此，选定以人参皂甙Rb1为对照品，测定制剂中总皂甙含量，作为控制制剂质量的重要指标。人参皂甙Rb1对照品由中国药品生物制品检定所提供。2提取条件的选定选择提取条件时，以经水饱和的正丁醇为溶剂，对不同提取次数和溶剂体积进行比较。(见表1、2)说明提取3次，相对提取率已达94%；提取3次含量为0.556%提取5次含量为0.564%，结果相近。所以本文择定提取3次，提取溶剂体积为50ml。表1提取率试验(n=2)提次次数12345每次提取率(

3、%)73.013.17.83.82.2累计提取率(%)73.086.193.997.799.9表2不同体积溶液提取的比较(n=3)溶剂体积(ml)255075含量(%)0.5120.5560.5483呈色条件及测定波长的选择绞股蓝皂甙与香草醛、高氯酸(或硫酸)混合可产生紫色反应。曾用香草醛与77%硫酸混合进行显色，结果发现样品在500600nm波长范围内无最大吸收。后改用香草醛与高氯酸混合显色，对照品溶液与供试品溶液在550±10nm波长范围内有最大吸收。由于供试品所含皂甙成分复杂，影响因素较多，且吸收峰较为平缓，所以最大吸收波长有一定范围，与单一成分的对照品溶液吸收波长有些距离。根

4、据上述实验结果及相关资料及标准，所以选择550nm波长作为测定波长。 4标准曲线的制备精密称取人参皂甙Rb1对照品适量，加甲醇制成每1ml中含1.2mg的溶液，摇匀，精密量取0、50、100、150、200、250l，置水浴上蒸干，分别各加新鲜配制的5香草醛冰醋酸溶液02ml和高氯酸08ml，摇匀，置60水浴中加热15min。取出，迅速移入冰水中冷却2min，精密加冰醋酸5ml，摇匀，以相应试剂为空白，立即在550nm波长处分别用分光光度计测定吸收度。以吸收度为纵坐标，对照品量为横坐标绘制标准曲线。计算回归方程，Y2033X00244，r09998，表明皂甙在003480695mg范围内呈良好

5、的线性关系。5重现性试验取制剂按样品测定项下的方法测定5次（同一批号），结果（见表3），表明该法重现性较好，RSD3。表3重现性试验结果（n5）实验号吸收度RSD（）1068320692306752240665506556显色稳定性试验取对照品溶液，呈色后在不同时间内测定，以考察显色稳定性（见表4）。试验表明随着时间的延长，吸收度呈缓慢下降。因此，正文规定显色后放入冰水中冷却2min，加冰醋酸后，立即进行测定，以减少误差。 表4显色稳定性试验时间（min）02510152030456090120吸收度028802860282027802730269026202550242022802177空白

6、试验除以02ml的正丁醇代替样品外，其他按样品测定项下的方法测定，试剂空白吸收度均为003（n5）。由于试剂空白吸收度较小，可用冰醋酸溶液代替试剂空白，所以正文不规定用试剂空白校正。 8回收率测定采用加样品回收法测定回收率，精密称取不同量的Rb1对照品，加入已知含量的样品中，按样品测定项下的方法测定（见表5）。试验表明本法回收率较高，方法可行。表5回收率测定（n5）实验号样品中总皂甙量（mg）添加人参皂甙Rb1量（mg）测定总皂甙量（mg）回收率（）平均回收率（）RSD（）13061374389642306214519995328428955694197930428440567997552675588359189样品测定精密量取本品10ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇溶液提取3次（20、15、10ml），合并正丁醇溶液。用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml。弃去水层，正丁醇溶液置水浴上蒸干。残渣用甲醇转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取200l，照标准曲线制备法项下的方法，自“置水浴上蒸干”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂甙Rb1的含量（见表6）。表65批样品的含量测定批号总皂甙含量（n3）（）RSD（）9806010