乳腺癌VEGFC的表达与淋巴管生成的相关性

1、乳腺癌VEGFC的表达与淋巴管生成的相关性 11-01-09 14:01:00 编辑：studa20 作者：盛薇，王虎霞，王光辉，樊林，单涛【摘要】 目的 探讨乳腺癌血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C, VEGFC)的表达与乳腺癌肿瘤淋巴管生成及淋巴结转移的关系。方法 用免疫组化SP法对60例乳腺浸润性导管癌进行VEGFC染色，并用D240标记肿瘤淋巴管。取15例乳腺纤维腺瘤标本做对照。结果 乳腺癌组VEGFC阳性表达率明显高于对照组(P0.01)。VEGFC表达与乳腺癌淋巴管密度(lymphatic vessel density, L

2、VD)和腋淋巴结转移相关；VEGFC表达阳性组肿瘤淋巴管密度大(P0.05)，腋淋巴结转移组VEGFC表达水平高。乳腺癌组所有病例均有不同程度的淋巴管染色，以肿瘤间质组织中淋巴管生成为主。淋巴管密度与乳腺癌腋淋巴结转移呈正相关，腋淋巴结转移组的肿瘤淋巴管密度比无淋巴结转移组高(P0.05)。结论 乳腺癌中存在淋巴管生成，且主要发生在肿瘤间质组织中；VEGFC表达与肿瘤淋巴管生成及腋淋巴结转移相关。 【关键词】 乳腺癌；血管内皮生长因子C；D240；淋巴管生成；淋巴结转移ABSTRACT: Objective To study the expression of VEGFC in breast

3、cancer and its correlation with lymphangiogenes is and lymph node metastasis. Methods Immunohistochemical SP method was adopted in detecting the VEGFC protein expression in 60 cases of breast cancer, and the lymphatic vessels were labeled with D240. We took 15 cases of breast fibroadenoma as control

4、s. Results The rate of VEGFC positive expression in breast cancer was higher than that in the control group (P0.01). VEGFC expression was positively correlated with lymphatic vessel density (LVD) and axillary lymph node (both P0.05). VEGFC was significantly higher in lymph nodepositive group than in

5、 lymph nodenegative group. Different levels of lymphangiogenesis occurred in all the cases of breast cancer; LVD was significantly higher in VEGFC positive group than that in the negative group, but it was mainly located in tumor stroma, and apparently mature lymphatic vessels were not found in canc

6、er nests. LVD was positively related to the lymph node metastasis in breast cancer. It was obviously higher in lymph nodepositive group than in lymph nodenegative group (P2cm且5cm 30例，5cm 7例。按WHO乳腺浸润性导管癌病理学分级标准，级19例，级18例，级23例。所有患者均为女性，年龄(45.218.23)岁，术前均未接受放、化疗等，均行乳腺癌改良根治术。取门诊乳腺纤维腺瘤石蜡标本15例作为对照。1.2 试剂与

7、方法兔抗人VEGFC多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司；鼠抗人D240单克隆抗体、免疫组化染色试剂盒及DAB试剂盒购自北京中山生物有限公司。采用免疫组化SP法，操作按试剂盒说明进行。行微波抗原修复，一抗工作浓度均为1100。PBS缓冲液代替一抗为阴性对照，用已知阳性的结肠癌组织切片作为阳性对照。1.3 结果判定以细胞质显示棕黄色颗粒视为VEGFC阳性着色，无棕黄色颗粒为阴性着色。结合着色范围和染色强度进行半定量处理：在显微镜下(200倍)随机选取5个视野，以阳性染色细胞占视野中所有细胞的百分比均值作为着色范围。着色范围积分：1% 0分，2%-20% 1分，21%-50% 2分，51%

8、3分。着色强度积分：无着色0分，浅着色1分，深着色2分。上述两项积分0-1为阴性(-)，2为弱阳性(+)，3为阳性()，4为强阳性()。 D240标记淋巴管，可见淋巴管内皮细胞胞质染成棕黄色，直观显示淋巴管壁薄、形态不规则、管腔较大、内皮细胞核相对较稀疏或呈叠状。参照Weidner等2的计数方法：先在光镜低倍(4)视野下寻找微脉管最密集区即“热点”(hot spot)，然后在200倍视野下观察着色的单个细胞和细胞丛，并以此作为1个微脉管。以5个200倍视野(0.74mm2/视野)内微脉管数的平均值为微脉管密度。内皮细胞与基膜均着色者判定为微血管，仅内皮细胞着色者判定为微淋巴管，光镜下难以区分者

9、暂判为微血管。1.4 统计学分析 数值均以s表示，计数资料比较使用2检验，计量资料使用t检验和单因素方差分析，使用Spearman进行相关分析。实验数据由SPSS 13.0统计分析软件处理。显著性检验水平=0.05。2 结果2.1 VEGFC 在乳腺组织中的表达43例乳腺癌组织可见VEGFC表达阳性，对照组仅2例可见VEGFC弱表达。乳腺癌组VEGFC表达阳性率(71.7%)明显高于对照组(13.3%)，有显著性差异(P0.01)。乳腺癌腋淋巴结转移组VEGFC表达阳性率(86.2%)明显高于腋淋巴结无转移组(58.1%)，有显著性差异(P0.05，表1)。表1 VEGFC与乳腺癌临床、病理相关参数的关系（略）乳腺癌组VEGFC表达程度积分值(2.551.61)明显高于对照组(0.270.70)，差异有统计学意义(P0.01)。腋淋巴结转移组VEGFC表达程度积分值(3.171.28)高于腋淋巴结无转移组(1.971.68)，具有显著性差异(P0.01，图1-图2)。VEGFC表达与乳腺癌淋巴结转移呈正相关(r=0.369，P0.01)。2.2 淋巴管密度LVD的测定乳腺癌组全部病例均有不同程度淋巴管染色，对照组仅2例有淋巴管散在轻度染色