![FACSAriaⅡ流式细胞仪上样准备_第1页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-2/9/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a1.gif)
![FACSAriaⅡ流式细胞仪上样准备_第2页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-2/9/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a2.gif)
![FACSAriaⅡ流式细胞仪上样准备_第3页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-2/9/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a3.gif)
![FACSAriaⅡ流式细胞仪上样准备_第4页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-2/9/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a/4c3bd3fe-a8fe-4228-8da5-5f39d379335a4.gif)
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文档简介
1、FACSAri a流式细胞仪上样准备(一)上样时需要准备的物品漂白水 3-5L75%酒精 5L无菌 PBS或生理盐水 5-10L(二) FACSAri a 分选时需自备的质控品Accudrop beads (分选时液滴延迟校准) :货号 345249,货期需 4 周,如需分选要提前订购。注:做分选时需自备,如无自备亦可上样,但不保证分选效果。(三)上样时,样品的准备保证细胞活性:需4冰上保存保证样品为单个细胞,不黏连:反复吹打,用尼龙膜过滤分选时,需再次培养的,收集管内需装至少1/2 培养基。建立实验模板1.在软件界面左侧 Browser 面板下,依次点击 New Folder、Experim
2、ent、Specimen(均可重命名),单击 Specimen左侧“ +”符号,显示下方的 Tube,点击左侧灰色指示箭头,使之变成绿色。2. 在软件 Cytometer 面板上,点击 Parameters选项卡,选择实验所需荧光通道(按 Ctrl 键可多选),并删除多余通道。选择荧光素名称、信号放大类型( log/lin )、信号脉冲类型( H/A/W ),3. 在右侧 worksheet 页面中,画出实验所需模板:选择点图(双参数)或直方图(单参数),在图中选择参数,并建立所需“门” (多边形、矩形、十字象限形、 线形,根据实验情况而定) 。利用鼠标右键 Show Populations选
3、项建立图之间的联系。4.至此,一个简单的实验模板基本建成。 现在可以将样本管放在上样台上,点击上样面板的 load,此时 Acquire Data 自动被激活或手动点击采集控制面板上的 Acqire data 按钮,仪器开始获取样本数据。5.调整 Cytometer 面板中各通道电压, 使 FSC/SSC 中信号位于利于观察的位置。调整阈值(Threshold),去除碎片和噪音信号。 调整上样速度 (FlowRate)。6.在 FSC/SSC中调整门的位置、 大小和形状, 使之圈住感兴趣细胞群。 调节荧光通道的电压,使荧光信号位于合适的位置。7.在鼠标右键中打开数据显示,观察实验的实时结果。8.实验条件调整完毕后,在上样
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