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文档简介
1、河南农业大学考研专业课现代分子生物学课程试卷(含答案)学_年第 _学期考试类型:( 闭卷)考试考试时间 : 90 分钟年级专业学号姓名1、分析题( 5 分,每题5 分)1. 写出原核表达实验步骤。答案:原核表达实验步骤如下:片段。1)2)3)按上述步骤填入该组织的 RNA ,反转录为 cDNA 。以 cDNA 为模板,用上述引物扩增出带酶切位点的 A 基因用 BamHI 和 EcoRI 分别切割目的片段和载体,连接酶将 A基因和载体连接起来构成重组质粒。4 )将重组质粒转入核酸感受态的大肠杆菌 BL21 中,涂布,根据载体所携带甄选的抗性标记筛选出稳定遗传重组质粒的单克隆。5)摇菌、扩大培养,
2、待菌液繁殖到对数生长期,收集菌体,裂解、收集蛋白质。(6 )将总蛋白制备成溶液通过镍柱,由于 A 蛋白携带有 His 标签,可以被吸附在镍柱上时,然后加缓冲液将凝胶在镍柱上的 A 蛋白 洗脱下来,即可得到 A 蛋白溶液。解析:2、判断题( 55 分,每题 5 分)1. 在所有原核与真核生物中,AUG都是唯一的翻译起始密码子。 ()答案:错误解析:在所有真核生物与大多数原核生物中, AUG 是翻译的起始密码 子。少数细菌(属于原核生物)以 G U G (缬氨酸)或 UUG 为起始密 码子。线粒体和叶绿体使用的遗传密码稍有差异,如线粒体和叶绿体 以 AUG 、AUU 、AUA 为起始密码子。2.
3、限制性内切核酸酶具有极高的专一性,可以识别蛋白质或多肽链上的特定位点,将其切断,形成黏性末端或平端。()答案:错误解析:限制性内切核酸酶具有极高的专一性,可以识别 DNA 双链的特 定位点,将其切断,形成黏性末端或平端。3. 肿瘤细胞由于生长速度快、分裂次数多,因此对生长因子的需要 量也高。( ) 答案:错误 解析:癌细胞的之一就是对生长因子需要量降低,体外培养的癌细胞 对生长因子的需要量显著低于正常细胞,是因为自分泌或其细胞增殖 的信号途径依赖于生长因子。4. 组蛋白基因、rRNA基因和tRNA基因等都属于串联重复基因,它 们的产物都是细胞所大量需要的。( )答案:正确解析:串联重复抗原的特
4、点如下:各成员之间有高度的序列一致性,甚至完全相同;拷贝数高,常有十几个甚至几百个;非转录的间 隔区短而一致。组蛋白基因、 rRNA 基因和 tRNA 基因等都属于串联重 复基因,它们的小量产物都是细胞所大量需要的。5. 一染色体DNA经内切酶Sal I切割后,产生了若干个具有黏性末端的DNA片段,将这些片段分别在T4 DNA连接酶的作用下自身连接成 环,然后导入受体细胞,都可以进行独立地复制。()答案:错误解析:在 T4 DNA 连接酶的作用下,若干个拥有黏性末端的 DNA 片 段自身相连接环,导入受体细胞后,并不是都可以进行轴果的复制。6. 信号肽的结构有一些特征,目前发现信号肽都是位于多
5、肽链的 N端。()答案:错误解析:信号肽是引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的短(长度530 个氨基酸)肽链。常指新合成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移 (定位)的 N 末端的氨基酸线性(有时不一定在 N 端)。7. 当一段DNA序列插入到植物基因组中目的基因的内部或其邻近位点时,便会诱发该基因丧失功能,并最终导致死亡。( )答案:错误解析:当一段 DNA 序列插入到植物基因组中目的基因的内部或其邻近位点时,可能会诱发基因突变或是并使使基因组丧失功能,而基因发 生突变或丧失功能不一定会导致死亡。8. 核酶主要是指在细胞核中的酶类。( )答案:错误解析:核酶又称核糖酶、核酸类酶、酶 RNA、类酶R
6、NA,指具有催化功能的 RNA 分子,是根据其起名化学成分来命名的,而不是其存在部 位。9. 转肽反应是由新进入核糖体 A位点的氨酰tRNA上的氨基酸的氨 基对P位点肽酰tRNA上酯键的羧基进行亲核攻击,使 A位点的氨酰 tRNA上的氨基酸转移到P位点的氨酰tRNA的肽链上。( )答案:正确解析:10. 凝胶阻滞实验最初是用来对纯化的原核调控蛋白和 DNA勺互作进行动力学分析。( ) 答案:正确 解析:凝胶阻滞分析是来研究 DNA 与特异性蛋白的相互作用,最初是 用来对纯化的原核调控蛋白和 DNA 的互作进行动力学分析,一般会是 放射性标记的 DNA 片段与纯化蛋白,或提取物中的中所酶混合物相
7、结 合,然后在非变性凝胶中分析该产物。11. 乳糖操纵子存在负控诱导系统和正控诱导系统的调控机制。( ) 扬州大学 2019 研答案:正确解析:乳糖操纵子存在负控诱导系统和正控诱导系统的调控机制,分 别是阻遏蛋白的负性调节和 CAP 的正性调节。3 、名词解释( 50 分,每题 5 分)1. microsatellite DNA宁波大学 2019 研答案: microsatellite DNA 的中文名称是微卫星 DNA ,是指第一类 高度重复序列 DNA ,是指在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度 可以高高达每分钟几万转)时, DNA 分子将按其大小分布在离心管内 不同密度的氯化铯介质中,
8、不同层面的 DNA 形成的不同的条一个或 多个小的卫星带中的 DNA 。这种 DNA 的片段含有异常非常高或低的 GC 含量,常会在主要 DNA 带附近相伴一个次带,其浮力密度曲线 出现在主带的前面或后面。解析:空2. 癌基因 答案:癌基因是指体外能引起细胞转化,在体内诱发肿瘤的基因,它 是细胞内细胞器的组成成分。在正常情况下,这些基因处于静止身处 或低表达状态,对正常细胞不仅无害而且不可缺少。癌基因激活的方 式包括点钟突变、基因扩增、染色体重排、病毒感染等。癌基因激活 的结果是其数目增多或功能增强,令细胞过度增殖及获得所致其他恶 性特征,从而形成恶性肿瘤。癌基因主要分病毒癌基因和细胞转化基
9、因。解析:空3. 蛋白质磷酸化答案:蛋白质磷酸化是指由蛋白质激酶催化的把 ATP或GTP上丫位的磷酸基转移到脂质氨基酸残基上的过程,为可逆过程,是生物体内 存在的一种普遍的调节方式,在细胞信号的传递过程竞争优势中占有 极其重要的地位。蛋白质磷酸化是调节和控制蛋白质活力和功能的最 基本、最普遍,也是最重要的机制。解析:空4. 断裂基因 浙江海洋大学 2019 研答案:断裂基因指真核生物不连续的结构基因,它由编码区和非编码 区串联形成,编码区基因称外显子,但非编码区称内含子,编码区常 被非编码区隔开。在转录后的 RNA 剪接过程中所外显子会被保存下来, 并可在蛋白质生物合成过程被表达为蛋白质的基因
10、序列。被剪下的内含子不构成蛋白质线粒体的组成部分,但它们可能在其他方面发挥作 用。解析:空5. 多顺反子答案:多顺反子指由在原核生物细胞中几种不同的 mRNA 连在一起, 相互之间由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开的 mRNA 分子。 多顺反子出现于原核生物,即管控若干个基因由一个启动子控制,转 录在一条 mRNA 上,一个 mRNA 分子编码二十多个多肽链。这些多 肽链常量的 DNA 片段则位于同一转录单位内,共用同一对起点和终 点,有些 mRNA 的编码区可数十个生成数百个不同的蛋白质。解析:空6. 启动子 暨南大学 2019研答案:启动子是指一段位于结构基因 5 '端上游区的
11、DNA序列,它含 有 RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列,是 RNA 聚合 酶识别、结合和开始转录的位点。原核生物的启动子含有 10 区和 35 区,真核生物启动子含有 TATA 框和 CAAT 框,这些区域是启动子与 RNA 聚合酶结合的位点。启动子与 RNA 聚合酶的结合活性的改变可 以影响基因的表达量。解析:空复制型转座 浙江海洋大学 2019 研答案:复制型转座是指转座子以复制生成的一份拷贝进行转座的方式。 转座是由可移动因子介导的遗传物质重排现象,转座不需要转座子和 它的目标位点之间广泛的同源性。复制型转座发生时,转座子先被复 制,转座完成后原来的位置仍存在一个拷贝,新
12、生成的拷贝被插入在 其他地方。解析:空7. DNA 酶 I 超敏感位点(DNasel hypersensitive site )答案:DNA酶I超敏感位是指由由于对 DNA酶I和其他核酸酶的切 割高度敏感而区域发现的染色体上的一小段被。该区域显然不毕竟含 有核小体致使 DNA 镜像裸露而产生,这种区域通常很短,最长也不 过几百 bp 。由于该位点含有特异的 DNA 序列,为特异性 DNA 结合 蛋白所识别,因此,它可以参与了基因表达的调控。解析:空8. 基因编辑技术 暨南大学 2018研答案:基因组编辑技术是指在基因组水平上对出发点基因序列甚至是 单个核苷酸进行替换、切除,增加或插入外源 DN
13、A 序列的基因工程 技术。基因编辑技术中, ZFN 和 TALEN 为代表的序列特异性核酸酶 技术能够高效率须要地进行定点基因组编辑,而 CRISPRCas9 系统作 为最新版四代一代基因编辑技术,能够简捷简便高效地实现基因组精 确修饰。解析:空9. 春化作用 答案:春化作用是指植物必须阶段一段时间的持续低温才能由营养生长经历转入生殖阶段生长的现象。春化过程中,感受低温的部位分生 组织中的 RNA 和蛋白质含量增加,代谢也发生顺序性变化。春化作用 分为两个阶段:春化调节作用的前体物质在下低温下转变成不稳定 的前体物质。在20 C下,中间产物转变转化为冷稳定的物质,即最 终产物。解析:空4、填空
14、题( 40 分,每题 5 分)1. 细胞分化是由于基因的差异表达造成的,而基因表达的差异又是 由于造成的。答案:基因在时间和空间的特异表达解析:细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的整个过程,实质上是基因的特异性表达。基因 表达时间的差异又是由于基因在时间和空间感的特异表达造成的。2. 大肠杆菌RNA聚合酶的亚基组成为。答案:a 2解析:大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由五个亚基组成(a2 BB'c),核心酶没有。亚基(a 2 BB')。3. 乳糖操纵子阻遏蛋白由基因编码,与序列结合,对乳糖操纵子起阻遏作用。答案:调节 |操纵区解析:4. 在构建c
15、DNA克隆之前,可以用来富集一特殊的核苷酸序列。方 法是:用来自于能够产生目的蛋白的细胞 mRN分子同来自于另一类型 细胞(不产生这种蛋白质,但亲缘关系密切)的过量 mRN分子杂交。答案:抑制性消减杂交 解析:胆碱能抑制性消减杂交技术是一种认定、分离组织细胞中选择 性表达基因的技术,其原理为以抑制性 PCR反应为基础,将标准化测 试 cDNA 单链步骤和消减杂交步骤合二为一。在构建 cDNA 克隆之前, 可以用抑制性消减杂交来富集一特殊的核苷酸碱基。5. 常用的基因敲除技术有、运用随机插入突变进行基因敲除和。 答案:同源重组进行基因敲除 |RNA 干扰引起的基因敲除 解析:基因敲除是用含有一定
16、已知序列的 DNA 片段与受体细胞中序列 相同或相近的基因发生同源重组,整合至受体细胞基因组中并表达的 一种外源 DNA 导入技术。常用的基因敲除技术有同源重组进行基因敲 除、运用随机插入突变进行基因敲除和 RNA 干扰引起的基因敲除。6. 大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构基因:、lacY和lacA,以及、操纵基因和。答案: lacZ| 启动子|阻遏子解析:大肠杆菌乳糖操纵子包括三个基因:Z (编码B半乳糖苷酶)、Y (编码B半乳糖苷酶透过酶)、A (编码B半乳糖苷乙酰转移酶), 以及启动子(P)、操纵基因(0)、阻遏子(I)。7. 在通用遗传密码表中遗传密码有 64 个,其中个是编码氨基酸的
17、密码,有个终止密码子,个起始密码子。普通密码子变成终止密码子 的突变叫作突变。答案: 61|3|1| 无义解析:遗传密码是一组规则,将 DNA 或 RNA 序列以三个核苷酸为一 组的密码子转译蛋白质的氨基酸序列。在通用遗传密码表中遗传密码 有 64 个,其中 61 个编码氨基酸的密码。有 3 个终止密码子,分别为 UAA、UAG、UGA。1个起始密码子AUG ;无义由于是指突变某个碱 基的发生改变使代表某种氨基酸的密码子突变为终止密码子,从而使 肽链合成提前终止。8. 在Southern杂交中DNA转移的速度取决于和。答案: DNA 大小 |琼脂糖的浓度和胶的厚度解析: Southern 杂交
18、是进行基因组 DNA 特定序列定位的通用方法。 包括两个主要过程:将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合 到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上,即印迹;固定 于上才膜上的核酸与同位素标记的探针在一定的低温和离子强度下退 火,即分子杂交过程。杂交中 DNA 转移的速度取决于 DNA 大小、琼 脂糖的浓度和胶的厚度。5、简答题( 35 分,每题 5 分)1. 结合最新的科学发现,列举RNA勺种类并简要说明其生物学的功 能。答案:(1 )转运 RNA (tRNA ),功能:转运氨基酸;(2)核糖体 RNA (rRNA ),功能:参与蛋白质翻译;(3)信使 RNA (mRNA ),功能:蛋白
19、质合成模板;(4)核不均一 RNA (hnRNA ),功能:成熟 mRNA 的前体;(5)核内小 RNA (snRNA ),功能:参与 hnRNA 的剪接;(6)核仁小 RNA (snoRNA ),功能:参与 rRNA 的修饰;(7)反义 RNA ,功能:对抗原的表达起调节作用;(8)微 RNA (microRNA ),功能:对抗原的表达起调节作用;(9)干扰 RNA (siRNA ),功能:对抗原的表达起调节作用; (10 )核酶,功能: tRNA 、rRNA 加工。解析:空2. 用琼脂糖凝胶电泳分离制备质粒,分出三条带。请设计实验,判 断何者是开环DNA何者为线性DNA何者为闭环DNA答案
20、: 用琼脂糖凝胶电泳分离制备质粒,分出三条带。判断开环DNA ,线性 DNA ,闭环 DNA 的实验设计如下:(1 )从电泳凝胶中回收三种 DNA 分子。(2)先把三种 DNA 分子通过碱变性和复性,就要把它们转化宿 主菌。3)在选择平板上长菌落的为闭环 DNA ,其他的为开环 DNA和线性的 DNA 分子(4 )用限制性内切酶切开环 DNA 和线性的 DNA 分子,被切成 两段的为线形 DNA ,另一为开环 DNA 。解析:空3. 简述基因表达载体的主要构成元件及作用。 暨南大学 2018研 答案: 表达载体是在塞雷县载体基本骨架的组件基础上增加表达 元件(如启动子、RBS、终止子等),能够
21、使目的基因能够表达的切 入点。首要表达载体的主要构成元件及作用为:( 1 )结构基因:即提取的目的基因字符串核苷酸序列,负责编码 目标蛋白。(2)启动子:位于编码蛋白质结构基因前的一段特殊结构的DNA 片段,是 RNA 聚合酶的识别部位和结合部位。( 3 )终止子:位于编码蛋白质结构蛋白质末端一段特殊结构的DNA 片段,具有终止基因转录过程的作用。( 4 )复制原点:能够自我复制保证目的基因在受体细胞中复制遗 传和表达。( 5 )遗传标记基因:检测受体细胞中是否含有有没有目的基因, 从而将含有目的基因的细胞筛选出来。解析:空举例说明什么是 C 值悖论。答案:(1)C 值即一种生物的单倍体基因组
22、的 DNA 总量。它是每一种活生物的一个性质。C 值悖论指物种的 C 值地位生物结构或组成的复杂性或生物在进 化上所处与的高低不一致的现象, C 值与其进化复杂性之间无严格对 应关系。基因组中编码序列的选择压力大,而真核生物中不编码蛋白 的序列很多,发生变异的概率增大,因此基因组涨落大小会出现很大 的变化,在长期的进化整个过程中,基因组的大小不能完全代表不可 生物进化程度。(2)举例如下: 人类和两栖类有非常接近的 C 值,表明并非越高等的生物遗传 复杂性越高。 两栖类生物中最小的基因组不足, 109Mbp ,最大的则达 1011Mbp ,家蝇和果蝇,二者的 C 值相差近 6 倍。则表明表现复
23、杂 度没有明显变化的一定物种物种中, C 值却有很大变化。解析:空4. 在蛋白质生物合成过程维持遗传信息准确翻译为蛋白质的保真性 因素有哪些?答案: 保证翻译准确性的因素有以下几点:(1 )氨基酸与 tRNA 的特异结合,依靠氨酰 tRNA 合成酶的特 异识别作用实现;(2)密码子与反密码子的特异结合,依靠互补配对结合实现,也 有赖于核蛋白体构象正常而实现正常的装配功能;(3 )校正 tRNA 校正错义突变和无义突变;(4)的简并性和专一性大大减少了变异对生物的影响。解析:空5. 阐述基因突变的概念及引起突变的可能途径。答案: ( 1)概念:基因突变属分子水平上的变异,是指染色体上 个别基因发
24、生的分子结构的,包括 DNA 分子中碱基对的增添、缺失 或改变。(2)引起突变的途径:基因突变在自然界社会存在,分为自发突 变和诱发突变。 自发突变是自然发生的突变,由背景辐射和环境因素辐射招来, 如乳胶的宇宙射线,细胞自身有害代谢产物及由 DNA 复制引致过程 中碱基配对错误引起的突变。 诱发突变是指人工利用物理、化学因素诱导发生的突变,也称 为人工诱变。诱发基因突变的途径大多数,主要有: a .化学诱变指生 理反应可以由某些化学物质所引起,这些化学物质被称为化学诱变剂。 现已知很多的化学诱变剂,它们诱变的机制是不同的。在 DNA 复制 过程由于碱基类似物的取代,碱基的化学修饰以及碱基的插入
25、和缺失都会引起突变。b .物理诱变指利用物理心理因素引起的基因突变,女口 X 射线、紫外线、电离辐射等物理因素均可辐射线导致突变产生。 cDNA 插入改变读码换成或变成假基因,如, TDNA 插入、转座子 插入、病毒遗传物质插入等。诱发突变已成为生物育种的有效手段。6. 简述tRNA的结构特征及其作用。答案:(1)tRNA 分子的结构特征 tRNA 分子含有稀有碱基:稀有碱基是指除 A 、G、 C、U 外的一些碱基,包括双氢嘧啶(DHU ),假尿嘧啶(9 )和甲基化的嘌呤( mG , mA )等。 tRNA 分子形成茎环结构:组成 tRNA 的几十个核苷酸中存在 着一些能局部互补配对的区域,可
26、以形成局部的核糖体。这些局部双 链呈茎锥形,中间不能配对的部分则翻牌膨出形成环或盘状结构,称 为茎环的结构或发夹结构。 tRNA分子末端有氨基酸接纳茎部:所有tRNA的3 '端的最后3个核苷酸序列均为CCA,是氨基酸的西凯努瓦县,叫作氨基酸接纳 茎。 tRNA 序列中有反密码子:每个 tRNA 分子中都有 3 个碱基与 mRNA 上编码相应氨基酸带有的密码子具有碱基反向互补关系,可以 配对结合,这 3 个碱基被称为反密码子。 X射线衍射分析表明,tRNA的共同五级结构是倒L型的。( 2) tRNA 的作用 tRNA 在蛋白质合成过程作为各种氨基酸的载体,将氨基酸转 呈给 mRNA 。
27、在逆转录作用中作为制备互补链 DNA 链的引物。在细菌细胞壁、叶绿素、脂多糖和氨酰磷脂酰甘油的合成中都 与某些 tRNA 的参与有关。解析:空6、论述题( 20 分,每题 5 分)1. 请说明一种原位杂交技术的基本原理并简述其在生物学领域的应 用。答案: 原位杂交是指用标记的核酸探针,经放射自显影或非放射 自显影体系,在组织、细胞及染色体水平对核酸进行定位和相对定量 研究的一种手段。根据探针的标记方式,分为同位素原位杂交技术和 荧光原位杂交技术。(1)同位素原位杂交技术 运用核酸分子碱基顺序关联度配对的互补性,用同位素标记的尿 刊核酸(探针)和染色体上经过变性后的 DNA (RNA )杂交,相
28、配 合形成专一性的核酸杂交专一性分子,用放射自显影方法显示其在上 以的位置,即把各种具有特定碱基顺序的基因在染色体上原位地确定 下来。( 2 )荧光原位杂交技术 荧光原位杂交技术是指根据核酸分子碱基互补配对的原则,用特 殊的荧光素标记 DNA 探针,然后在染色体、细胞或组织切片标本上 进行 DNA 杂交,来检测细胞内 DNA 或 RNA 特定碱基序列是否存在 的一种非放射性原位杂交方法,具有安全、快速、检测的信号强、杂 交特异性高和可多重选育染色等特点。(3)原位杂交技术在植物遗传育种方面的应用 异源染色质及数种染色体畸变检测。通过远缘杂交把基因的异 源染色质渐渗到植物中。如带有几种抗病基因的
29、黑麦 1R 染色体已被整 合到许多高产的小麦品种中。原位杂交鉴别技术则是鉴定外源染色体质)的有效手段。 应用软件在植物基因工程及基因表达研究上的应用。由于转基因表达的不稳定性(基因沉默和基因失活)极大地阻碍了遗传转化嵌 入式系统的应用。转基因外部性表达的一个重要影响因素就是位置效 应,即转基因在受体细胞红血球基因组中的位置。用原位杂交技术便 可以确定转基因在基因组中的物理学位置来研究位置效应。 在构建植物基因物理图谱上的应用。 DNA 序列在染色体上的定 位和分子图谱的构建是克隆目的基因的基础。 FISH 技术能直接完成基 因在染色体上的定位,对基于图谱的众所周知基因克隆意义历史性。 其他方面
30、的应用:原位杂交技术已在高度重复序列、中度重复序列、单拷贝序列作探针的杂交中取得成功。为物种的起源和演化过 程、基因表达人类基因行为的揭示以及基因组进化、结构、组成和空 间排列的研究提供了新的途径。解析:空2. 试述染色体端粒的结构与功能。答案:(1)染色体端粒的结构 端粒是指真核细胞线形染色体末端的一种特殊结构,由 DNA重复第二种序列和端粒互补蛋白构成的一种核蛋白复合物。不同种类细胞的端粒DNA序列并不相同,大多数长 58bp。 构成端粒序列的两条路线链中一条富含 G,另一条富含C;富含G的那条链5 ' 3 '指向染色体末端,且此链比富含C的链在其3 '末端 尾处可
31、多出 1216 个核苷酸的长度,弯曲成帽状。富含 G 的链多出 的十几个核苷酸能呈现分子内的简单折叠结构,在非变性聚丙烯酰胺 凝胶电泳时或非的移动非常快,且由于分子内折叠形式的不一致性而 能出现多条电泳带型。这种水分子内折叠以非 WatsonCrick 碱基配 对的 GG 链结方式连接而形成,从而可增加其稳定性。(2)染色体端粒的功能 稳定染色体末端、避免染色体重组。真核细胞生物端粒与核膜及核水溶性基质中某些蛋白有密切关系。端粒 DNA 与核蛋白的相互作用以“ TTAGGG”微观附着于细胞核基质,有效地保证染色体末端 免于被化学修饰或被降解。 杜绝染色体复制时缩短。防止染色体复制时末端核苷酸丢
32、失, 使真正的遗传信息得到完整复制。细胞分裂、基因型半保留复制时, 存在染色体末端缺失现象。而端粒的作用就是起到缓冲作用,从而防 止染色体在复制过程规避中发生缺失或形成不稳定结构。 在很多细胞中决定细胞染色体的位置、转录表达和异染色质的 形成,端粒往往靠近上皮细胞,并 180 °远离着丝粒,端粒介导了染色 体同源或非同源区之间的短暂联系。 可补偿滞后链DNA链。5 '端在复制整个过程中消除RNA弓|物 后造成的空缺。 端粒在决定细胞的寿命中起重要作用。组织培养的细胞证明, 经过多代达马藏县培养老化的细胞端粒变短,染色体也变得不稳定。解析:空阐述基因表达系列分析技术(SAGE的
33、基本原理及应用答案:基因表达周边产品分析(SAGE)是通过快速和详细分析成千上万个 EST 来寻找出表达丰富度不同的 SAGE 标签序列。(1)基因表达周边产品分析技术的基本原理 来自转录物内特定位置的一个短的寡核苷酸序列(910bp ),含有鉴定一个转录物特异性所需的足够信息,可以作为别转录物的标签。 标签串联在一起,形成串联体,对克隆通过到载体的串联体进 行测序分析,可确定表达基因,并根据标签的数量来确定蛋白的表达 丰度。 这一技术不但可以全面分析组织或细胞表达的基因,同时还给 出了这些基因量的信息。(2)基因表达周边产品分析技术的应用 多种组织或细胞的转录组研究。运用 SAGE半导体技术
34、可以阐 释表达谱的特点,研究者分析们分析了多种器官和细胞的转录可知特 征,其中不但包括复杂的实体组织,也包括一般而言的免疫细胞。 新的肿瘤标志和治疗靶点的发现。SAGE 技术应用于肿瘤所研究,其中一个重要目标是获得一些可以用于诊断的标志物还有潜在的 治疗靶点。 差异表达基因在染色体上的分布及相关的遗传学变化分析。表 达创始者所创的变化常源于遗传上的改变,运用差异表达基因的染色 体定位反过来抗体也可以为识别由此引起的遗传学上的改变提供服务 依据。 发现新基因。 SAGE 在单一反应中同等地分析取自不同基因的 短标签,避免了转录本丰度的影响,在新基因中会的分析中带有独特 的地位。 重要基因的作用靶
35、标和信号途径研究。运用SAGE技术分析这些基因诱导表达后细胞体细胞中基因转录的改变,不但能夺得这些基 因的新的作用靶标,同时也阐释这些基因发挥多种生物学功能的分子 机制。解析:空3. 为什么细菌的RNA聚合酶能在恰当的区域停止转录?浙江海洋大学 2019 研答案: 因为细菌的各个转录单位中存在增进转录终止的单位终止 子序列,转录出的终止子序列形成发夹结构延宕了 RNA 聚合酶的前进, 进而在富含 A 的序列或终止稳态的作用下从 DNA 模板链上释放下来, 终止转录,原核生物三种的转录终止有两种类型:(1 )赖于p因子的终止,p因子能催化NTP水解促使新生的RNA 链从三元转录复合物中解离出来,
36、从而终止转录。(2 )不依赖于p因子的终止,模板DNA上存在终止转录信号终 止子,终止位点上游一般都存在一个富含 GC 的二重对称区,该段 DNA 转录产生的 RNA 容易形成发卡式构造。新生 RNA 中的发卡式 结构中会导致RNA聚合酶的暂停,破坏 RNADNA 杂合链5 '端的正 常结构。终止位点前有一段由48个A组成的序列,因此,转录物 的3 '端为寡聚U ,寡聚U的存在使杂合链的3 '端大部分出现不稳定的rUdA 区域。这两者共同积极作用使得 RNA 从三元转录复合物中解离 出来。解析:空7、选择题( 12 分,每题 1 分)1. 端粒酶含( )。A. 单链RN
37、A和蛋白质B. DNA和蛋白质C. 双链RNA和蛋白质D. 核酸和蛋白质答案:A解析:端粒酶是一个核蛋白体,包含单链 RN 和蛋白质,其中 RN 可 以作为端粒酶合成 N 时的模板。2. IFFG 能够诱导B半乳糖苷酶的表达是因为()。A. 刺激乳糖操纵子阻遏蛋白的活性B. 抑制B半乳糖苷酶的降解C. IPTG 与乳糖操纵子结合诱导转录IPTG 与 lacI 基因的产物结合,抑制它的活性 答案: D解析:3. 下列哪个氨基酸是先以前体形式结合到多肽中,然后再进行加工 的?( )A GluB ProC HypD Gln答案:C解析:羟脯氨酸是脯氨酸羟化后的产物,为 3 羟基脯氨酸( 3Hyp )
38、或4 羟基脯氨酸( 4Hyp ),一般蛋白质中不存在羟脯氨酸。4. 色氨酸操纵子的调控作用是受两个相互独立的系统控制的,其中 一个需要前导肽的翻译,负责调控这个系统的是( )。A cAMPB 色氨酰 tRNATrpC 色氨酰 tRNAD 色氨酸答案: B解析:或后肽的翻译由氨酰 tRN 控制,因此需要前导肽模块的翻译的 负责调控色氨酸操纵子的系统由色氨酰 tRNTrp 控制。5. cAMP 在转录的调控作用中将出现下列哪种现象?( )A. cAMP转变为CRPB. cAMPCR形成复合物C. 葡萄糖分解活跃,CAMP增加,促进乳糖利用来扩充能源D. CRP转变为cAMP答案:B 解析:项, RP 是
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