S7实验七大蒜离体繁殖(理论)Word版

1、实验七 大蒜离体繁殖（理论）植物离体快速繁殖 又称微体快繁，是指利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖的方法。是常规营养繁殖的扩展和延伸。 特点： 繁殖数量大，速度快一、意义与作用 是改良品种、培育新品种的一种手段；获得大量优质苗木的有效方法。 1、繁殖系数高，繁殖周期短，繁殖速度快 2、应用广泛 3、材料用量少，不受季节限制，可工厂化生产 4、能获得无毒苗木无性系 5、木本植物应用潜力大二、基本程序分为5个时期1 / 10 1、稳定的无菌培养体系的建立时期 指从外植体选择、采取、清洗、灭菌、接种和茎芽发生，直到获得茎芽稳定生长和增殖、茎芽扩繁数量可随意控制的时段。本期目标： 成功地无污染接种

2、，并且诱导茎芽发生 提供合适的试管环境使培养物的生长达到稳定过程包括： 外植体选择、外植体灭菌、培养基选定和稳定化培养2、稳定培养系的增殖、生长和增壮时期 达到稳定状态的培养物通过不断的继代培养进行增殖、到达需求数量 是商品化组织培养的主要时期分为3个阶段： 培养物保存阶段 培养物大量增殖阶段 培养物生长和增壮阶段基本目标： 维持培养物的稳定状态 不断增殖茎丛达到需要数量措施： 调整培养基成分及含量 以细胞分裂素为主，生长素为辅 温度、光照的改变 3、诱导茎芽生根形成小苗时期 使上一期培养的微枝发出不定根，形成完整小苗，便于经过驯化、培养成商品苗。功能： 保证组织培养微枝的生根 安全地从试管内

3、无菌环境转移到试管外有菌环境茎芽生根诱导的途径： A、试管内生根 培养基总盐浓度低，无机盐含量低，细胞分裂素可不含有，生长素有一定量，降低蔗糖浓度，琼脂含量高B、试管外生根 优势： 根系发育好，根毛多，木质化程度高，分生能力强，生长速度快，茎干皮层细胞个体较小、液泡小，叶片角质层发达、气孔内陷、抗蒸腾能力和适应能力强，光合能力强注意： 试管外生根不是万能的，对于难生根植物，试管内生根还是唯一选择。 4、生根小苗移栽和驯化时期本阶段含两个过程： 异养阶段过度到自养阶段 人工环境过度到室外环境措施： 将小苗分级 炼苗：一般1周左右 选定好植场所 严格移栽技术，科学确定移栽时间 移栽后管理 5、商品

4、苗培育时期经过驯化培养的小苗，可按照一般苗木的培育要求进行培养三、植物离体无性繁殖中的器官发生方式有五种方式：1、不定芽型a、繁殖率高b、能保持遗传稳定性c、缩短繁殖周期2、器官型a、繁殖率高，但速度慢b、遗传性稳定3、器官发生型a、繁殖速度快b、遗传性不稳定，易产生变异c、愈伤组织是遗传转化、细胞培养或原生质体培养的良好材料4、胚状体发生型a、数量多、速度快、繁殖系数高；b、遗传性稳定。5、原球茎型 指兰属特有的器官发生方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株。四、影响因素（一） 内因1、外植体 基因型 外植体类型及其生理状态 外植体大小 取材植株的年龄及生理状况2、继代培养次数 继代

5、次数多 器官建成能力下降 根分化和茎分化具有相同规律3、愈伤组织的遗传特性及生理状态 愈伤组织增殖培养越久或代数越多，转移到分化培养基上时，形态发生就会越困难，甚至丧失 愈伤组织块过大也不利于分化原因：长期培养导致染色体组变化 产生多倍体或非整倍体4、芽的增殖途径 嫩梢扦插增殖途径 关键是外植体芽位的选取 丛生芽增殖途径 器官发生途径 愈伤组织 器官形成 胚状体途径 原球茎途径：兰科植物的增殖（二） 外因1、培养基2、培养条件五、无糖组培快繁技术简介植株生长方式 自养：依靠自身光合作用进行 异养：依靠培养基中糖进行 混养：前二者兼有 糖易导致污染发生1、技术原理 用人工控制手段，以CO2代替糖

6、作为碳源，提供最适条件，促进植株光合作用，从而促进植物的生长发育，在短时间内，较低生产成本下，快速繁殖大量优质种苗。2、措施A、培养容器 设计并使用具有控制湿度、气体的流动、CO2浓度、热的扩散的自动化容器。特点： 透光性好，便于气体交换，分布均匀，利于CO2的吸收B、培养基质 采用多孔有机材料来替代琼脂、卡那胶 蛭石、珍珠岩、砂、塑料泡沫、石棉、陶棉、纤维素等特点： 良好的透气性，生产成本低C、CO2输入 替代糖，减少了微生物的污染，促进植株自养人工换气加速了气体的交换，满足了植株的生长需气量3、优势 通过人工控制，动态调整优化植物生长环境 大幅度减少了植物组培过程中微生物的污染 节省投资，降低生产成本 工艺简单化，