第三讲植物组织培养、DNA技术及植物有效成分的提取

1、循着示想一想知识点一植物组织培养1.原理和基本过程物织养植组培原酹植物细胞的全能性过程外植体亞翌愈伤组织蚤仝旦根、芽一植物体2.菊花的组织培养材料选择材料木身的种类、年龄、保存时间的长短等。菊花的 组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新生的侧枝营养因素MS培养基:大量元素、微量元素、有机物等植物激素生长素和细胞分裂素外界条件pH:5.8；温度:18-22 °C；每日光照 12 h实验操作配制培养基f外植体消毒f接种f培养f移栽f栽培3月季的花药培养月 季 的 花 药 培 养被子植物花过程:小砲子母细胞f小抱子四分体时期f单 粉的发育核期一双核期一花粉粒产生花粉L花药中宓進胚状体诊复丛

2、 植株的两- 种途径砧卄沁脱分化再分化的屁粉愈伤组织丛芽影响因素1材料的选择h般选择单核期H培养基的组成斤植物激素的用量及配比实验操作斤材料的选取材料的消毒接种和培养-> 鉴定和筛选知识点二DNA的粗提取与鉴定DNA的粗提取与鉴定基本原理<0提取思路利用DNA和其他物质在理化性质方面的差异,1提取I)NADNA 的性质一I丿溶解度：DNA在014mol/L的NaCl中溶解度 最低；DNA不溶于酒精对酶、高温和洗涤剂的耐受性DNA的鉴定：DNA+二苯胺试剂 沁養蓝色实验流程选取材料一破碎细胞,获取含DNA的滤液去除滤液 中的杂质一DNA的析出与鉴定知识点三植物有效成分的提取提取方法实

3、验流程玫瑰精油 的提取水蒸气 蒸億法鲜玫瑰花+清水一水蒸气蒸憎一油水混合 物加入NK1分离油层加应水山洪）4除水弊 玫瑰油橘皮精汕 的提取压榨法石灰水浸泡一漂洗压榨一过滤一静置 f再次过滤f橘皮汕胡萝卜素 的提取萃取法（石油 瞇最适宜作 萃取剂）胡萝卜粉碎一干燥萃取一过滤一浓 缩f胡萝卜素胡萝卜素的性质:不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石汕瞇 等有机溶剂鉴定方法:纸层析法也I课堂考点一站突破分点编排讲练设计气贯通更系统in考点_ I植物组织培养和花药离体培养必备知能1.植物细胞全能性表达的条件(1) 离体状态。(2) 适宜的营养物质：大量元素、微量元素等无机营养和有 机营养。(3) 植物激素：生长

4、素、细胞分裂素。(4) 适宜环境条件：温度、pH和光照条件。(5) 无菌条件。2.植物组织培养技术和花药离体培养技术的比较目 项相同点激 七E1II 林 选等 照 光、H PN不同点体 植 外胞 细 体方结 培性 育育可不育 度可 高后体f 植养 外普 基沖培 养接栽 培二 备毒栽 制消移归纳串记生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用(1)使用顺序不同，结果不同：使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不 分化先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高(2)用量比值不同，结果也不同:生长素/细胞分裂素结果比值間时促根分化，抑芽形成比值低时促芽分化，抑根形成

5、比值适中促进愈伤组织形成必明考向考向一植物组织培养和花药离体培养的过程1. (2012-山"考辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如下图。(1)图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的和过程。2.某二倍体植物是杂合体，下图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据下图回答：(1)图中表示的是该花粉培养过程中的过程，表示的是过程，X代表的是,表示的是过程,表示的是诱导过程。培养基编号浓度/mgLTml%/个6BAIAA10.5076.73.110.177.46.130.266.75.340.560.05.0项目2 mol/LNaCl溶液0

6、.14 mol/LNaCl溶液溶解规律DNA溶解析出IV0.14 mol/L NaCl 溶液蛋白部分发生盐析溶解NaCl溶液从2 mol/L降低过质沉淀程中，溶解度逐渐增大可移动的实验平台 可揭为己有的实验室 手指轻点玩转实验1. DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度特点比较考点二DNA的粗提取与鉴定必备知能必明考向考向DNA的提取与鉴定1. （2014江苏髙考）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是取DNA的材料D原则上含DNA的生物材料都可用来提取DNA ,只是选用DNA含量高 缶半弩如一盒功的可能件审大fDNA在2 nwl/L NaCl溶液和超留水中溶解度都较大 才占為却

7、央物向鸡血细胞液中加蒸懾水搅拌,鸡血细胞会吸水破裂，但在蒸偶水DNA溶液加入 苯胺试剂后需沸水浴加热,待冷却后溶液变监。95 %酒精单层纱布过滤滤液鸡血细胞2 mol/L.J NaCl溶液Q2下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的一些重要操作示意 图，据图回答下列有关该实验的问题：析出较纯1一/净的丝状2物DNA浓NaCl溶液在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA 丝状物分别放入体积为2mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得如下表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液o1B液中搅拌研磨后过滤滤液E22 mol/L 的NaCl溶液搅拌后过滤滤液F30.14 mol/L 的NaCl溶液

8、中搅拌后过滤滤液G4冷却的体积分数为95 %的 酒精溶液中搅拌后过滤滤液H考点三I植物有效成分的提取必备知能1. 三种提取方法的比较提取 方法水蒸气蒸馆法压榨法有机溶剂萃取法实验 原理利用水蒸气将挥 发性较强的植物 芳香油携带出来通过机械加压，压榨 出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有 机溶剂中，蒸发溶 剂获得芳香油方法 步骤 水蒸气蒸馅 分离油层 除水过滤 石灰水浸泡、漂洗 压榨、过滤、静置 再次过滤 粉碎、干燥 萃取、过滤 浓缩提取 方法水蒸气蒸憎法压榨法有机溶剂萃取法适用 范围适用于提取玫瑰 油、薄荷油等挥 发性强的芳香油适用于柑橘、柠 檬等易焦糊原料的提取适用范围广，要求原 料的颗粒要尽可能细 小，能充分浸泡在有 机溶液中优点简单易行，便于 分离生产成本低，易 保持原料原有的 结构和功能出油率高，易分离局限 性水中蒸馆会导致 原料焦糊和有效 成分水解等问题分离较为困难， 出油率相对较低使用的有机溶剂处理 不当会影响芳香油的 质量考向二胡萝卜素的提建2. (2013山东K)胡萝卜素是一种常用的食用色