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1、1、 柠檬酸发酵过程中有哪几个控制要点，如何控制? 答：（1）EMP畅通无阻：控制Mn2+、NH4+浓度，解除柠檬酸对PFK的抑制；控制溶氧，防止侧系呼吸链失活。（2）通过CO2固定反应生产C4二羧酸，强化这一反应的方法：适量的生物素。（3）控制培养基中的Fe2+ 的浓度，使顺乌头酸水合酶失活。2、 说明柠檬酸发酵过程中氧的重要性。答： 乙酰CoA和草酰乙酸结合生成柠檬酸过程中要引进一个氧原子，因此氧也可以看作为柠檬酸生物合成底物。它对柠檬酸发酵的作用为：(1)氧是发酵过程生成的NADH2重新氧化的氢受体。(2)近来的研究发现，黑曲霉中除了具有一条标准呼吸链以外，还有一条侧系呼吸链。 当缺氧时

2、，只要很短时间中断供氧，就会导致此侧系呼吸链的不可逆失活，而导致柠檬酸产酸急剧下降。 3、 简述CO2固定反应对提高柠檬酸产率的意义？答：（1）无CO2固定反应的产率 合成1分子柠檬酸需要3分子乙酰 辅酶A，也就是需要1.5分子的葡萄 糖。 理论产率为： 192 /( 180×1.5) =  71.1%（2）通过CO2固定反应提供C4二羧酸葡萄糖生成柠檬酸的全过程中，在碳平衡方面没有碳原子的损失，在乙酰COA和草酰乙酸缩合时还从水中引进一个氧原子，总反应式为：C6H12O6+1.5O2C6H8O7+2H2O可见柠檬酸发酵对糖的理论转化率为106.7，以含一个结晶水的柠檬酸计

3、为116.74、 简述黑曲霉柠檬酸高产菌的生理特征？答：（1）能耐高浓度的柠檬酸（15%以上）而不利用和分解柠檬酸。 （2）耐高浓度葡萄糖，能产生和分泌大量的酸性淀粉酶和酸性糖化酶 （3）能抗微量金属离子，尤其能抗较高浓度的锰、Mn2+、Cu2+。 （4）在深层液体发酵培养时，能形成大量的细小球体，球体直径为0.1mm。 （5）在以葡萄糖为唯一碳源的合成培养基上。生长不好，生成小菌落，包子形成能力弱。（6）在生长、繁殖期，细胞内具有较高水平的氨基酸，NH4+，水平高 （7）菌丝体中含有底水平的甘油三酯和磷酸酯。 （8）细胞壁几丁质含量高，但-葡聚糖和聚半乳糖含量低。 （9）在生长和产酸期，细胞内蛋白质、核酸水平低。 （10）具有很强的侧

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