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文档简介
1、中药药理学实验总结学院:农学院 专业:中草药栽培与鉴定 班级:121 姓名学号1实验组实验时间 指导教师成绩实验内容实验一 小白鼠的捉拿、固定、给药、标记及处死方法 实验内容包括小白鼠的捉拿、小白鼠的固定、小白鼠的给药、小白鼠的标记、小白鼠的处死方法实验二 中药镇痛作用比较(扭体法)实验内容包括小白鼠的选择、小白鼠的分组、小白鼠的给药、扭体次数的测量、镇痛率的计算、实验数据的处理。实验三 中药番泻叶对小白鼠肠蠕动的影响实验内容包括小白鼠的选择、小白鼠的分组、小白鼠的灌胃给药、小白鼠的处死和解剖、炭末推进长度和小肠长度的测量、炭末推进率的计算、实验数据处理。实验四 补益药抗应激作用实验内容包括小
2、白鼠的选择、小白鼠的分组、小白鼠的给药、密封计时、测量小鼠耐缺氧时间、实验数据的处理。实验目的实验一 通过本实验的学习,让学生了解实验动物的捉拿、固定、给药、标记及处死方法。实验二 通过本实验的学习,让学生了解用扭体法筛选镇痛药的实验方法;观察中药的镇痛作用。实验三 通过本实验的学习,让学生了解生番泻叶对肠蠕动的影响实验四 通过本实验的学习,让学生学习小白鼠耐常压缺氧的实验方法,研究补中益气丸的抗应激作用。实验材料与药品实验一 仪器设备条件:鼠笼(1个)、灌胃针(1支)、烧杯(2个)、1 ml注射器(4支)等,小白鼠,每组3只雌鼠,3只雄鼠。实验二 仪器设备条件:鼠笼(1个)、灌胃针(1支)、
3、烧杯(2个)、1 ml注射器(4支)。实验动物小鼠(每组3只雌鼠,3只雄鼠)、实验三 仪器设备条件:鼠笼1个)、灌胃针(1支)、烧杯(2个)、1 ml注射器(3支)、电炉、铁锅、铁铲、搪瓷盘、蛙板、眼科剪、眼科镊、直尺。物质条件:实验动物小鼠(每组4只),番泻叶实验四 仪器设备条件:鼠笼(1个)、灌胃针(1支)、烧杯(2个)、1 ml注射器(3支)、线、玻璃缸(水桶)、200ml磨口瓶等物质条件:实验动物小鼠(小鼠每组4只)、补中益气中药水煎液实验方法与步骤实验一 小白鼠是药理实验常用的一种动物,常用于药物的筛选、LD50ED50的测定、中枢神经系统药试验、抗炎免疫药试验、避孕药、抗肿瘤以及抗
4、衰老药试验等。常用体重1822g。 1捉拿方法 右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼)上面,轻向后拉其尾,用左手拇指和食指捏住其头部皮肤及双耳,将小白鼠固定在掌中,使其腹部朝上,然后以第四指和小指夹住鼠尾。 2给药途径:(1)经口给药法:口服(PO):将受试药物放入饲料或溶于饮用水中,由动物自由提取的一种方法。缺点是摄入剂量不够准确。灌胃(IG):将小鼠固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角插入口腔,沿上腭插入食道。如遇阻力,可将针头抽出再另插,以免穿破食道或误入气管。灌注量为0.10.3ml/10g体重。(2)皮下注射(SC):常在背部皮下注射。一手固定动物,另一手注射,注射量为0.10.3
5、ml/10g体重。(3)肌内注射(IM):多注射于后肢股部肌肉,每侧不超过0.1ml.(4)腹腔注射(IP):左手固定小鼠,右手持注射器,从下腹部外侧进针约35mm,呈450角刺入腹腔,注射量0.10.2ml/10g体重。(5)静脉注射(IV):将小鼠至于固定筒内,使尾巴露在外面,用7075%酒精棉球擦尾部,或将鼠尾浸入4550OC温水中。待尾部左右侧静脉扩张后,左手拉尾,右手进针。注射量不超过0.5ml/只。实验二 1.药品的配制 元胡止痛分散片每片重0.4g,成人的剂量每天3次,每次3片,即成人剂量是3.6g/60Kg,换算成小白鼠的剂量是0.0144g/20g(即0.72g/Kg)。又因
6、为小白鼠给药量是0.4mL/20g,故元胡止痛片溶液的浓度应该为0.0144g/0.4mL,所以将18g的元胡止痛分散片溶于500mL的去离子水中,制成0.0036g/mL(即14.4g/400mL)的元胡止痛片溶液。 阿咖酚散同样的方法换算成小白鼠的剂量也是0.0144g/20g(即0.72g/Kg)。小白鼠的给药量是是0.4mL/20g,故阿咖酚散溶液的浓度应该为0.0144g/0.4mL,所以将18g的阿咖酚散溶于500mL的去离子水中,制成0.0036g/mL(即14.4g/400mL)的阿咖酚散溶液。 生理盐水配制成0.9%的浓度。冰醋酸配制成0.6%的浓度。 2.将小鼠随机分为3组
7、,每组3只,称重并编号。第一组灌胃未知中药醇提液0.2ml/10g(体重),第二组腹腔注射颅痛定0.2ml/10g(体重)(40mg/kg),第三组灌胃等容量生理盐水作为对照。给药30min后,每组小鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只,观察并记录20min内小鼠扭体次数。 对照组扭体次数 给药组扭体次数 镇痛率= ×100% 对照组扭体次数实验三1.药品不同炮制品的处理 要求学生根据所学知识拟写操作步骤和实际操作。 2. 药品制备:炭末生理盐水混悬液0.1g/ml(炭末为活性炭),番泻叶水煎液1g/ml(含炭末0.1g/m1), 3.取禁食20-24h成年、体重相近的4只小白鼠
8、,随机分为2组,每组2只,用苦味酸标记。分别用上述2种炭末液0.3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲部的肠管,置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末在肠内推进距离”。取各组2只小自鼠平均值,用公式汁算炭末推进百分率,并注意观察各组小肠容积是否增大。 炭末在肠内推进距离(cm)炭末推进率= ×100% 小肠全长(cm)实验四 取4只小鼠,雌雄不限,称重,用苦味酸标记,随机分为两组。给药组每只灌胃未知中药水煎液0.25ml/10g,对照组每只灌胃等容量的生理盐水,给药后
9、30min将小鼠放入盛有15g钠石灰的广口瓶内(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口盖严,是之不漏气,立即计时。以呼吸停止为判断死亡指标,记录小鼠因缺氧而死亡的时间。与对照组比较并进行统计学处理。综合全实验室的结果,分别算出两组的平均存活时间按表记录 未知中药对小鼠耐常压缺氧的影响组别 动物数 剂量 存活时间(n) (ml/10g) (min)生理盐水 未知中药水煎液实验结果与分析实验一 小白鼠的捉拿、给药、注射操作不熟练,致使小白鼠受伤实验二 表 未知中药对小白鼠镇痛作用的影响(X±SD)(实验小组数据)组别动物数(只)剂量(g/kg)开始扭体时间(cm)20min内扭体次数(cm
10、)炭末推进率(%)生理盐水20.4ml雄10次;雌4次阿咖酚20.4ml雄16次;雌0次元胡镇痛片20.4ml雄9次;雌0次表 未知中药对小白鼠镇痛作用的影响(X±SD)(全班数据)(全班数据)组别动物数(只)剂量(g/kg)开始扭体时间(min)20min内扭体次数(cm)炭末推进率(%)生理盐水210.7249.56元胡止痛片220.7234.48阿咖酚散190.7232.02分析:根据全班实验结果发现,一生理盐水组为对照发现元胡止痛片和阿咖酚散均有止痛作用,且阿咖酚散的止痛效果比元胡止痛片的止痛效果略明显;根据小组实验数据,发现雄性小鼠的比雌性小鼠的痛感更敏感,而且两种止痛药对
11、雌性小鼠的作用效果跟好实验三表 中药对小白鼠肠蠕动的影响(X±SD)组别动物数(只)剂量(g/Kg)小肠总长度炭末推进距离cm炭末推进率(%)肠容积变化生理盐水140.6050.2840.4990.45不变番泻叶180.6049.9340.6295.51增大分析:根据统计结果分析,番泻叶炭末推进率比生理盐水的炭末推进率高出5.06%。说明番泻叶液可促进炭末在小肠推进,番泻叶有助于小肠蠕动实验四表 中药对小鼠耐常压缺氧的影响(X±SD)组别动物数(只)剂量(g/kg)存活时间(min)生理盐水151.859.50补中益气丸211.867.15分析:上表的统计结果表明,补中益气
12、丸有抗耐常压缺氧的作用。注意事项1、所有实验中小白鼠体重越接近越好,平均体重最好用20g左右的小鼠,肠管比较粗大,易于操作。2、实验三番泻叶的泻下作用实验中肠容积变化可以上下端接扎,称取重量,以定量化。3、实验三和实验四即番泻叶泻下作用实验和补中益气丸的常压耐缺氧试验中,开始给药至处死动物的时间必须准确,以免时间不同造成实验误差。4、实验四中的实验之前先检查钠石灰,若钠石灰吸水和二氧化碳变色以后应立即更换,再放入瓶子中开始试验。5、实验操作过程中避免错误操作,使用器械时不要伤到操作者及周围的同学,带乳胶手套,以防被小鼠咬伤。6、请珍爱生命,尊重生命。小鼠为实验奉献生命,实验者应认真对待实验实验
13、小结中药药理学是以中医药基本理论为指导,运用现代科学方法,研究中药和机体(包括正常机体、病理机体和病原体)相互作用及规律的一门学科。本学期通过罗老师的讲授,我学习了中药药理学这一课程,对中医药的基本理论和现在科学方法的结合有所了解,并在罗老师的指导下完成了课程设计中的实验部分。 在实验操作之前,通过一些实验视频也对实验中的操作细节有所了解,大概几乎没有接触过这种情景,也许是女生的心天生就胆小慈悲,看到一些血淋淋的场面,身上的汗毛不禁竖立起来。等到亲自实验,看到活生生的小白鼠时,其实心理准备也做的差不多了,但是小白鼠的味道真的很不容易让人接受。在一旁观察老师的操作示范后,自己去模仿练习,第一次接触,小白鼠的捉拿真的不容置操作好,每次用手抓住小白鼠的耳朵及背后的皮,小白鼠就会蜷缩起来,更不用说再去把灌胃针伸进它的胃里了。在捉拿过程中,发现有的小白鼠排泄,难道是知道自己命不久矣而害怕到如此。轻抚它的背,跟它说话,渐渐的对小白鼠的恐惧和嫌弃就消失了,在我眼里这就是我的实验材料。接下来的实验灌药,打针,观察,解剖等过程,其实还是勉强不了自己亲自操刀上阵,还好组里有其他的小伙伴跃跃欲试,所以分工就明确和合理了。一人操作,一人督导、观察并记录结果,实验就这样的做完了。在实验过程中,从排斥,到接受,到能够
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