细胞膜通透性实验报告

1、【实验题目】细胞膜通透性实验【实验目的】1、观察溶血现象并掌握其发生机制。2、了解细胞膜的渗透性与各类物质进入细胞的速度。【实验材料与用品】1. 试剂：0.85% NaCI溶液、0.085% NaCI溶液、0.8mol/L甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、6%葡萄糖溶液、2% TritonX-1002. 器具：离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机3. 材料：鸡血红细胞【实验原理】细胞膜是细胞与环境进展物质交换的选择性屏障，它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，通透性高肾小管、 肠上皮、植物根细胞更高，水分子可以从渗透压低的一侧通过

2、细胞膜向渗透压高的一侧扩 散，这种现象称为渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。1. 溶血现象将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞使细胞涨破，血红蛋白释放到介质当 中，介质由不透明的细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液此时的细胞膜收缩，会略有不 溶性容物，这种现象称为溶血。红细胞在等渗盐溶液中短时间之不会发生溶血，但是由于红细胞的细胞膜对不同物质的通透性不同，时间久了，膜两侧的渗透压平衡会被打破，也会发生溶血。由于各种溶质透过细胞膜的速度不同， 因此发生溶血的时间也不一样。 发生溶血现象所 需的时间，可以作为测量某种物质进入红细胞速度的指标。即溶血时间对应着穿膜速度。2. 物质穿膜运输的

3、类型1被动运输不耗能被动运输分为简单扩散顺浓度梯度扩散和协助扩散。通道：载体蛋白、通道蛋白2主动运输耗能需要跨膜载体蛋白的协助，这些载体蛋白起到泵的作用，有选择性地把专一溶质逆浓度 梯度的穿膜运输。3. 影响物质穿膜通透性的因素1脂溶性越大的分子越容易穿膜非极性的物质比极性的物质更容易溶于脂类物质2 小分子比大分子更容易穿膜小的非极性分子，如Q、CO等3不带电荷的分子容易穿膜离子难溶于脂质物质，离子带水膜使体积增大4亲水性分子和离子的穿膜要依赖于专一性的跨膜蛋白【实验步骤】配置50%勺 鸡血红细胞 悬液取6只试管分别 参加等量的不 同溶质一、大体流程、6只试管分别滴加50%红细.胞悬液1滴 在

4、显微镜下观1混匀后，观察并记察细胞形态录溶血时间Lj、具体操作1. 取鸡血6ml,力卩0.85%NaCI溶液4ml，在1000r/min条件下离心5分钟；RBCE积量不 少于 0.6mol2. 将上述离心后的红细胞按沉淀量配成 50淋度；总体积应不少于1.2ml3. 每组取6支试管，分别参加如下溶液各 3ml:10.85%NaCl溶液20.085%NaCl溶液30.8mol/L 0.3mol/L 等渗甲醇溶液40.8mol/L 0.3mol/L等渗丙三醇溶液56% 5%等渗葡萄糖溶液62% 1.5%等渗TritonX-1004. 向上述6支试管中分别参加50啣细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察试管中

5、是否有溶血现象 发生观察时间1小时，记录溶血时间，并于显微镜下观察各溶液的细胞。【实验结果与分析】I. 实验结果图 1:0.85% NaCI 溶液图2:0.085% NaCI溶液 图3： 0.8mol/L甲醇溶液图6:丙三醇溶液60min图4：丙三醇溶液20min图5:丙三醇溶液40min图7：葡萄糖溶液图 8： Triton X-100II.观察记录表编号溶液类型是否溶血溶血时间现象记录10.85%NaCI 溶液不溶血/溶液呈暗红色乳浊液，未发生 溶血，作为对照组20.085%NaCI 溶液完全溶血6s溶液呈鲜亮的红色，完全溶 血，作为对照组。30.8mol/L 甲醇溶液完全溶血35s溶液呈

6、鲜亮的红色；完成溶血的时间很短40.8moI/L 丙三醇溶液不完全溶血20min溶液短时间仍呈暗红色，透明度不咼；溶血速度缓慢，每隔10mi n 进展观察，发现显微镜下个别 细胞形态有所改变56%葡萄糖溶液几乎不溶血1h溶液呈暗红色乳浊液；溶血速度慢，在1h几乎没有溶血现象62%TritonX-100完全溶血1min溶液呈鲜亮红色，震荡后溶液 上层有泡沫产生；溶血速度快，且细胞膜被破坏III .实验分析1号溶液和鸡血是等渗的，在 短时间不发生溶血时间假设过长，膜两侧的渗透压平衡会被 打破，也会发生溶血本次实验中控制溶血观察时间在1h；2号溶液为低渗溶液，发生完全溶血，因此可将1号、2号溶液作为

7、对照和另四种溶液进展 比对；3号甲醇溶液中的鸡血红细胞 溶血速度很快，在几十秒就已完全溶血，因甲醇的脂溶性 高、分子量小，进入细胞的速度很快，因此在操作过程中要求速度快，在完全溶血前做好装 片在显微镜下观察；4号丙三醇溶液虽然脂溶性较高，但分子量较大，因此 进入细胞的速度慢，溶血过程缓 慢，在20min左右发现有溶血的细胞图4，在40min以后发现有个别细胞在显微镜下的 形态有变化图5、图6，因丙三醇进入细胞，且其对光的折射率很高，使细胞看上去有缺 口；5号葡萄糖溶液，因其分子量过大，进入细胞的速度很慢，在1小时的观察中，未发生 明显溶血现象；6号溶液中添加了外表活性剂，可以将膜蛋白抽提出来，使 细胞膜的通透性增大，快速 发生溶血现象，同时由于有大量膜蛋白被抽提， 细胞结构遭到破坏，假设操作速度过慢容易 观察不到细胞；膜蛋白溶于溶液中使得溶液的 透明度没有2号溶液的高；经过本次实验可以看出，由于溶质的脂溶性、分子量等的差异会导致其进入细胞的速度 不同，从而导致溶血时间上的不同，因此可把发生溶血现象的时间当做一种测量物质进入红 细胞速度的指标。【本卷须知】1、滴加完50%勺血细胞悬液后，可用手指轻弹试管，使其混合均匀，防止血细胞沉入底部，但不要用力震荡，以免细胞遭到人为损坏；2、注意滴加的顺序，因3号溶液再参加血细胞后溶血时间很短，最好