菊花的组织培养.ppt

1、 通过必修课的学习，我们已经了解通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？法呢？ 组织培养组织培养营养繁殖营养繁殖 指植物的离体部分（包括任何器官、指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或组织、细胞或原生质体原生质体），在人工控制的），在人工控制的培养基及环境条件培养基及环境条件（温度及光照）下，得（温度及光照）下，得以生长和以生长和分化分化成完整植株的一种无菌培养成完整植株的一种无菌培养技术。技术。又称：植物离体培养又称：植物离体培养一、一、植物组织培

2、养的概念植物组织培养的概念 学习目标： 1、说明植物组织培养的基本原理；、说明植物组织培养的基本原理；2、掌握植物组织培养的基本技术；、掌握植物组织培养的基本技术；3、进行菊花或其他植物的组织培、进行菊花或其他植物的组织培养。养。课题课题1 1 菊花的组织培养菊花的组织培养需要了解的几个概念需要了解的几个概念 1、细胞分化、细胞分化 2、细胞的全能性、细胞的全能性 3、愈伤组织、愈伤组织 4、脱分化、脱分化 5、再分化、再分化 6、外植体、外植体 1、细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在、细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现形态、结构和生理功能上都会出现稳定性

3、的差稳定性的差异异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是胞分化是基因选择性表达基因选择性表达的结果。的结果。 2、细胞的全能性：、细胞的全能性：已分化已分化的植物细胞仍然具有的植物细胞仍然具有发育成为完整个体的潜能。发育成为完整个体的潜能。 。需要了解的几个概念需要了解的几个概念3、愈伤组织：由、愈伤组织：由离体离体的植物器官、组织或细胞在一定的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过的培养条件下经过脱分化脱分化过程形成的组织，就叫愈伤过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则排列疏松而无规则，是一种高，是一

4、种高度液泡化的呈无定形状态的度液泡化的呈无定形状态的薄壁薄壁细胞细胞4、脱分化：由、脱分化：由高度分化高度分化的植物组织或细胞产生的植物组织或细胞产生愈伤组织愈伤组织的过程，称为脱分化，又叫去分化。的过程，称为脱分化，又叫去分化。5、再分化：脱分化产生的、再分化：脱分化产生的愈伤组织愈伤组织继续进行培养，继续进行培养，又可以又可以重新分化重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。6、外植体：用于、外植体：用于离体离体培养的植物器官或组织片段。培养的植物器官或组织片段。 植物组织培养的原理是什么？植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性植物细胞具有全能

5、性思考思考1：概念：概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。发育成完整个体的潜能。原因：原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质所特有的全套遗传物质植物组织培养的基本过程是怎样的呢？思考思考2：植物组织培养过程示意图植物组织培养过程示意图 上面的示意图中还有什么地方不够完善的？上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。正常苗正常苗污染苗污染苗分析总结：1、植物组织培养过程中需要进行无菌技术操作植物组织培养过程中需要进行哪些

6、无菌植物组织培养过程中需要进行哪些无菌技术操作呢？技术操作呢？（一）防止外植体带菌（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁（四）保证接种与培养环境清洁二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程 离体器官、 组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 愈伤组织愈伤组织 影响植物组织培养的因素还有那些呢？思考思考3： 2、外植体的选择（1）不同的植物组织，培养的难易）不同的植物组织，培养的难易程度有很大差别；程度有很大差别； （2）同一

7、种植物材料，因其年）同一种植物材料，因其年龄、保存时间的长短不同也会影响龄、保存时间的长短不同也会影响培养的结果。培养的结果。 （3）一般选择植物生长旺盛的）一般选择植物生长旺盛的部位部位。 3、培养基 （1）组成成分的影响，如：大量元素、微量元素、无机盐、有机物、水、能源等。 大量元素：大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等阅读课文，思考以下问题阅读课文，思考以下问题微生物培养基以有机营养为主。与微生物的微生物培养基以有机营养为主。与

8、微生物的培养不同，培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。量元素两大类。1. 同微生物培养基相比，同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的培养基的配方有哪些明显的不同？不同？2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？些步骤的适宜条件是什么？植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分

9、裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。过程中芽和根的形成。 使用生长素和细胞分裂素的比较： 使用顺序 实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用生长素和细胞分裂素分化频率提高 生长素和细胞分裂素同时使用时，用量的比例对植物细胞的生长素和细胞分裂素同时使用时，用量的比例对植物细胞的发育方向有影响发育方向有影响 3、其他因素 pH、温度、光照等等。 pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 每日光照每日光照12h消毒消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环

10、境在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境离体的植物器官离体的植物器官、组织、细胞、组织、细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化芽芽根根植植物物体体植物组织培养过程植物组织培养过程植物组织培养条件植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要具有以下优点：（1）快速）快速 采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。（2）周年生产）周年生产 花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行，因条件可控，所以不受季节限制，可以全年

11、进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。（3）经济效益高）经济效益高 花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1元计算，每年产值上百万元。（4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。组织培养与常规繁殖相比优点众多组织培养与常规繁殖相比优点众多二、实验操作：二、实验操作：菊花的组织培养的实验操作：菊花的组织培养的实验操作：1、制备、制备MS培养基（注意无菌操作）培养基（注意无菌操作）2、外植体的选择与消毒、外植体的

12、选择与消毒3、接种（注意无菌技术的操作、方向）、接种（注意无菌技术的操作、方向）4、培养（注意消毒和对光照的控制）、培养（注意消毒和对光照的控制）5、移栽（注意试管苗的适应外部环境的过程）、移栽（注意试管苗的适应外部环境的过程）6、栽培、栽培配制各种母液配制各种母液配制培养基配制培养基灭毒灭毒冲洗冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌水冲洗至少三无菌水冲洗至少三次之上次之上组织培养为什么不用葡萄糖而用蔗糖组织培养为什么不用葡萄糖而用蔗糖1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、

13、酒精灯、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧灼烧）4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中，是如何来实现在整个操作过程中，是如何来实现无菌无菌环境的？环境的？结果分析与评价结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格 课堂小结：一、基础知识1、植物组织培养的基本过程（1）有关的概念（细胞分化、细胞的全能性、脱分化、再分化、愈伤组织、外植体）；（2）植物组织培养的基本过程。2、影响植物组织培养的因素（1）外植体的选择；（2）培养基；（3）无菌技术操作；（4）其他因素（pH、温度、光照等）。3、实践活动（1）同样作为碳源物质为植物细胞提供能量来源，蔗糖较葡萄糖能更好地调节培养基内的渗透压。（2）植物组织培养过程中，要时刻注意