再生障碍性贫血患者骨髓肾素血管紧张素系统表达的研究

1、再生障碍性贫血患者骨髓肾素血管紧张素系统表达的研究 08-03-03 16:12:00 编辑：studa20 作者：彭敏源，赵谢兰，高欣，雷瑚仪 【摘要】 肾素血管紧张素系统（RAS）已被证明参与了骨髓造血细胞的生长增殖和分化，而再生障碍性贫血（AA）被认为是与骨髓造血细胞受损和造血微环境缺陷有关的疾病。为了探讨AA的发病机制，运用放射免疫方法检测22例AA患者骨髓和外周血肾素活性及Ang、Ang浓度，并以16例外周血常规和骨髓检查正常的患者为对照组，比较两组之间的差异。结果发现： AA组骨髓Ang浓度低于对照组（P0.01），AA组的骨髓Ang浓度与外周血比较差异无统计学意义（P0.05），

2、对照组的骨髓Ang浓度较同组的外周血高（P0.05）。结论： AA患者骨髓Ang浓度降低，AA发病可能与其有关。 【关键词】 再生障碍性贫血Renin Angiotensin System in Bone Marrow of Patients with Aplastic AnemiaAbstract Renin-angiotensin system (RAS) has been shown to be involved in the growth，production，proliferation and differentiation of the bone marrow (BM) hemat

3、opoietic cells，while aplastic anemia (AA) is a disease in which proliferation ability of the BM hematopoietic cells is damaged with defective hematopoietic microenvironment. To investigated the pathogenesis of AA，the rennin activity，angiotensin(Ang) and angiotensin (Ang) concentration in peripheral

4、blood and BM of 22 AA patients were detected by radioimmunnoassay，16 nonhematological disease patients with nomal blood counts and BM picture were used as control，and the differeence between two groups was compared. The results showed that BM Angconcentration in the AA patients was significantly low

5、er than that in the control （P0.05）. In conclusion，the decreased BM Angconcentration in AA patients may be involved to the pathogenesis of AA.Key words aplastic anemia; rennin angiotensin system; Ang； Ang; bone marrow hematopoietic cell 肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)被认为是调节血压电解质的内分泌系统，然而近年发现

6、，该系统在许多组织中（心脏、血管、肾脏和消化系统）存在旁分泌和自分泌，并参与组织器官的损伤修复。1996年Haznedaroglu等1首次提出骨髓中也存在RAS，并认为该系统在病理和生理条件下对骨髓（BM）造血、造血细胞的生成和增殖分化可能产生作用。目前已有研究发现，血管紧张素(Ang)能够促进放射线损伤后小鼠骨髓造血功能的恢复2，增强人类脐血CD34+CD38-细胞集落形成的增殖能力3。应用免疫组织化学方法也发现，骨髓细胞胞浆内和胞膜上有血管紧张素转化酶（ACE）的表达4。再生障碍性贫血(AA)被认为与造血干细胞损伤、造血微环境功能缺陷有关，但是其确切的发病机制未明，因此研究AA患者骨髓RA

7、S的变化，有助于了解RAS在骨髓造血中及在AA发生机制上的作用。材料和方法对象选取2004年7月-2005年3月在中南大学湘雅医院确诊为再生障碍性贫血的患者22例(AA组)，男10例，女12例，年龄15-63岁。 AA患者均为初治病例，22例中急性再生障碍性贫血8例，慢性再生障碍性贫血14例，均符合诊断标准5。外周血和骨髓均正常的非血液病患者16例（对照组），其中因肌营养不良健康体检患者6例，头昏乏力要求健康体检者10例，男6例，女10例，年龄12-55岁。所有患者均须排除以下情况： 排除高血压、糖尿病、心力衰竭、严重的肝肺肾病等与RAS有关的疾病，无浮肿脱水；排除服用ACEI（血管紧张素转化

8、酶抑制剂）、ARB（血管紧张素受体拮抗剂）类药或停用1周以内的患者，服用可能影响RAS的药物（如两性霉素B，受体阻滞剂）的患者；排除严重感染、重要脏器出血；排除低增生性MDS、低增生性白血病、纯红细胞AA和急性AA危象。标本的收集两组病人均在骨髓穿刺前当天行血常规检查，并在穿刺前休息10分钟以排除紧张情绪，骨髓穿刺部位除1例再生障碍性贫血为胸骨外，其余均为髂后上棘。常规骨髓涂片后立即抽取骨髓液2 ml，注入预先加有0.3 mol/L EDTA 40 l、8-羟喹啉 20 l、2-巯基丙醇10 l的聚乙烯塑料试管中，轻微摇匀。同时取患者肘静脉血2 ml，注入预先加有0.3 mol/L EDTA

9、20 l、8-羟喹啉20 l、2-巯基丙醇10 l的聚乙烯塑料试管中，轻微摇匀。4冰箱静置2小时，然后500g离心10分钟。分别取上清移入聚乙烯塑料试管并标记，置-20冰箱保存。每月检测1次。骨髓和外周血标本均为卧位下获取。RAS的检测用放射免疫分析法检测肾素活性和Ang、 Ang浓度，操作严格按试剂盒说明书(试剂盒由北京北方生物技术研究所提供)进行。批内变异系数（CV）10%，批间变异系数（CV）15%，所有样本均在湘雅医院内分泌实验室测定。骨髓增生程度判断骨髓增生程度依据骨髓中有核细胞的量来确定，采用5级评定法。级：极度活跃（有核细胞成熟红细胞为10.5-2.0）；级：明显活跃（有核细胞成

10、熟红细胞为15-12）；级：活跃（有核细胞1成熟红细胞为116-32）；级：减低（有核细胞成熟红细胞为135-70）；级：重度减低（有核细胞成熟红细胞为1300）。统计学处理所有数据以均数标准差表示，采用SPSS 11.5统计软件分析。外周全血数据为正态分布，方差齐，采用单因素方差分析。其他数据均为非正态分布，方差不齐，采用秩转换的非参素检验。骨髓增生度比较为单向有序列联表资料，采用秩和检验。骨髓和外周血RAS比较：组内比较采用配对样本比较的Wilcoxon符号秩检验，组间比较采用两个独立样本比较的Wilcoxon秩和检验。P0.05）。对照组外周血细胞计数与AA组差异有统计学意义（P0.01

11、）。骨髓增生程度的比较AA组患者骨髓细胞学检查均为增生减低或重度减低，对照组均为增生活跃或明显活跃。两组骨髓增生度比较，差异有统计学意义（P0.05)。对照组骨髓和外周血中肾素活性、Ang浓度无明显差异(P0.05)，而骨髓Ang浓度明显高于外周血 (P0.01)。AA组骨髓Ang水平明显低于对照组(P0.05）。外周血肾素活性、Ang和Ang水平两组间无明显差异（P0.05）（表2）。Table 2. Peripheral blood and Bone marrow RAS analysis in aplastic anemia patients（略） 由于骨髓抽取物是骨髓和血液的混合物，因此骨髓肾素活性、Ang和Ang浓度可考虑是骨髓和外周血来源的总合，用骨髓肾素活性、Ang和Ang浓度减去外周血相应指标可能更好的代表骨髓源的肾素活性、Ang和Ang水平，这样可以缩小循环RAS对骨髓的影响。所以我们同时计算骨髓源肾素活性、Ang和Ang浓度。计算公式如下：骨髓源肾素活性=骨髓肾素活性-外周血肾素