月桂氮酮在复方去炎酊中对盐酸苯海拉明透过离体鼠皮的促进作用

1、    月桂氮酮在复方去炎酊中对盐酸苯海拉明透过离体鼠皮的促进作用        摘要目的:考察月桂氮芯酮在复方去炎酊中对盐酸苯海拉明促透情况并找出最佳促透浓度。方法:采用自制改良Bronaugh扩散池，小鼠皮作透皮试验，月桂氮芯酮浓度分别为0，0.540%，1.039%，2.094%，3.271%时盐酸苯海拉明的透皮情况。结果:盐酸苯海拉明透皮接近皮肤作为均质膜扩散模型，月桂氮芯酮最佳促透浓度为1.039%(g.ml-1).结论:月桂氮芯酮在复方去炎酊中对盐酸苯海拉明促透浓

2、度为1.039%( g.ml-1)。关键词月桂氮芯酮；盐酸苯海拉明；透皮吸收中分类号：R986文献标识码： A文章编号： 1001-5213(2000)11-0647-03 Study on the effect of azone on external percutanous permeability of diphenhydramine hydrochloride in complex Qiyan tinctureZHU Wei-Wen，LIU Yi-Beo，CHEN Ri-Tian(Institute for Dermatosis Defence and Treatment of Hui

3、zhou, Guangdong, Huizhou 516001)ABSTRACTOBJECTIVE：To study the effect of azone on external percutanous permeability of diphenhydramine hydrochloride in complex Qiyan tincture and determine the optimal concentration of azone. METHODS：We evaluated the effects of five azone concentrations which were 0,

4、 0.540%, 1.039%, 2.094%,3.271% on external percutanous permeability of diphenhydramine hydrochloride by using selfmanufactured bronaugh diffusion cell and skins of mouses.RESULTS：In this experiment, the way of the diffusion complies with the diffusion model in uniform membrane, the optimal concentra

5、tion of azone was 1.039%( g.ml-1). CONCLUSIONS：The optimal concentration of azone on external percutanous permeability of diphenhydramine hydrochloride in complex Qiyan tincture is 1.039%( g.ml-1).KEY WORDSazone; diphenhydramine hydrochloride; percutanous permeability复方去炎酊为惠州市皮肤病防治研究所研究开发的一种外用药，用于过敏

6、性皮炎、湿疹、皮肤病的治疗。处方主含盐酸苯海拉明、薄荷脑、水杨酸、醋酸曲安奈德，为增强药物作用效果，考虑加入月桂氮酮作为药物透皮促进剂，薄荷脑和水杨酸用于止痒，但不溶于水，醋酸曲安奈德具有抗炎作用，在处方中浓度很低且难溶于水，因此均难以作透皮研究。盐酸苯海拉明能对抗组胺引起的过敏症状且水溶性好，易作透皮研究。本文研究了5个月桂氮酮浓度在复方去炎酊中对盐酸苯海拉明促透情况并找出最佳促透浓度。1材料Waters高效液相色谱仪（美国）；CS561型超级恒温器(重庆试验设备厂)；自制改良Bronaugh非流通扩散池；月桂氮酮（医药级，江苏胜龙精细化工有限公司）；盐酸苯海拉明 (上海四药股份有限公司)；

7、乙腈(分析纯，广州化学试剂厂)；小鼠中山医科大学实验动物中心，体重(23.8±1.0) g，7只,6只。2方法2.1色谱条件1色谱柱：CN柱（L105 m，150 mm×4.6mm）;流动相:乙腈-水-三乙胺（50500.5），用冰醋酸将pH值调至6.5;检测波长:254 nm;流速:1.0 ml*min-1。2.2标准曲线制备精密称取干燥至恒重的盐酸苯海拉明0.0493 g，加蒸馏水稀释至100 ml，然后分别取0.1，0.3，0.5，0.8，1.0，1.2，1.5 ml用蒸馏水稀释至50 ml。进样20 l，再用蒸馏水进样20 l对照，可得盐酸苯海拉明在保留时间3.38

8、 min处有吸收峰，以峰面积积分值（A）对浓度(C)回归得回归方程：A=82987.5511 C-0.0349×10-3,r=0.999 7。表明盐酸苯海拉明在9.84×10-414.79×10-3 mgml-1范围内具有良好线性关系。2.3离体皮肤制备2取小鼠称重后，处死，用脱毛剂脱毛，剥取背部皮肤，去除皮下组织及真皮层。将皮置于0.1%苯扎溴铵浸泡半小时防腐，取出用灭菌生理盐水洗净后，用10%甘油水溶液处理，贮于-4 以下备用。2.4透皮试验按照复方去炎酊处方配制含月桂氮酮浓度为0，0.540%，1.039%，2.094%，3.271%的复方去炎酊。将皮肤固定

9、于给药室与接受室之间，皮内侧与接受液接触，皮外侧与给药室药液接触，扩散池有效接触面积为0.2cm2。分别精取10 ml含不同浓度月桂氮酮的复方去炎酊加入给药室，精取25 ml生理盐水加入接受室。水浴温度(37±0.5) ，在7 h内每1 h从接受室取样2 ml，并立即补回2 ml生理盐水。样品液用蒸馏水稀释至5 ml后用HPLC法测定盐酸苯海拉明浓度，并换算样品液中药物浓度。每个月桂氮酮浓度复方去炎酊均用随机剪取的3块皮肤进行试验(n=3)，取同一时间点接受液的3个浓度的均值为该时间点接受液浓度值，用7个时间点的浓度值计算累积透过量M。M与给药室盐酸苯海拉明初始浓度比值（M/C0），

10、再以M/C0对时间t作，以直线部分回归计算渗透系数，渗透系数最大时的月桂氮酮浓度即为最佳促透浓度。2.5干扰试验配制含1.040%月桂氮酮而不含盐酸苯海拉明复方去炎酊（空白1）和既不含月桂氮酮又不含盐酸苯海拉明复方去炎酊（空白2）做透皮试验，取样、进样及处理方法同1.4，检测器灵敏度不变。发现在盐酸苯海拉明峰位有吸收峰，但峰很小而且7 h内变化不大，空白1吸收峰较空白2稍大（1）。用75%乙醇作透皮试验其接收液在盐酸苯海拉明峰位无吸收，提示复方去炎酊处方中的某些成分在用HPLC法检测盐酸苯海拉明时有干扰。月桂氮酮对其他成分有促透作用，干扰值7 h内变化不大，可以认为实际测得的接受液浓度的变化可

11、以代表盐酸苯海拉明浓度变化。1干扰试验吸收峰峰高对时间t的曲线空白1空白23结果以盐酸苯海拉明累积透过量与给药室盐酸苯海拉明初始浓度比值（M/C0）对时间t作(2)。2M/C0对时间t的曲线00.540%1.039%2.091%3.271%从可以看出该透皮扩散接近皮肤作为均质膜的扩散模型2。以2中各曲线的直线部分(后4点)回归求斜率得各月桂氮酮浓度下盐酸苯海拉明渗透系数，见表1。1.039%月桂氮酮浓度下盐酸苯海拉明渗透系数最高，为最佳促透浓度。表 1各月桂氮酮浓度下盐酸苯海拉明渗透系数月桂氮酮浓度g/100ml渗透系数/mlh-1)00.017040.5400.017041.0390.030

12、232.0940.015763.2710.020164讨论 本实验装置参照简易扩散池3与Bronaugh流通扩散池2的特点，给药室与皮肤固定方法参照Bronaugh扩散池，接受室参照简易扩散池，取消接受室内搅拌装置，每次取样前均先摇匀或用注射器反复抽吸45次(3)。本实验装置优点为皮肤固定得好，成本低，操作简单。3自制改良Bronaugh非流通扩散池1.给药室盖2.给药室3.取样孔4.样品液(内液)5.螺纹6.皮肤7.接受室8.接受液(外液)9.水浴槽(水温37 )本实验证明，月桂氮酮对盐酸苯海拉明和复方去炎酊中其他某些成分有促透作用。由于其他成分干扰了盐酸苯海拉明测定，所以只能确定整个曲线上

13、移，而不能具体确定上移量，因此本实验不能确定时滞。复方去炎酊中除盐酸苯海拉明为水溶性外，其余成分均为水不溶或极微溶，但由于少量乙醇透过，轻微增加了溶解度，造成干扰。排除干扰方法除每个月桂氮酮浓度透皮均设空白对照，检测方法尚有待改进。复方去炎酊成分复杂，除月桂氮酮外其他成分如薄荷脑等有报道对皮肤渗透性有影响4。本实验得出的渗透系数是诸多成分共同作用的结果，月桂氮酮是诸多成分中浓度变化最大的药物，其余成分浓度没有变化，渗透系数变化主要由于月桂氮酮浓度变化引起。 朱伟文（惠州市皮肤病防治研究所, 广东 惠州 516001）刘一波（惠州市药品检验所，广东 惠州 516001）陈日添（惠州市药品检验所，广东 惠州 516001）朱伟燕（惠州市中心人民医院, 广东 惠州 516001）吴海新（惠州市中心人民医院, 广东 惠州 516001）黄小雄（惠州市皮肤病防治研究所, 广东