xk细菌鉴定药敏分析仪sop文件

1、实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-01 XK型细菌鉴定/药敏分析仪一、XK型细菌鉴定/药敏分析仪概况及检测原理 1XK型细菌鉴定/药敏分析仪是快速自动细菌鉴定/药敏系统，能对于临床大多数的细菌能进行快速鉴定和药敏实验。2鉴定实验：是经过各种反应底物的发酵，氧化，降解，水解反应，利用显色用于细菌的鉴定。3药敏实验：应用微量肉汤对倍稀释的方法检测细菌的药物敏感实验，能精确地检测出细菌的MIC 浓度。4专家系统、对细菌耐药机制检测包括：（1） 产ESBL的肠道菌

2、（2） 万古霉素耐药(VRE)的肠球菌（3） 高度的氨基糖肽类抗生素耐药（HLAR）的肠球菌（4） 甲氧西林耐药（MRS）的葡萄球菌二、开机:1检查电源系统：XK型细菌鉴定/药敏分析仪相连的输出电压220±2；2开机： 1.接通打印机开关； 2.接通显示器开关； 3.接通主机开关（前面板右侧）； 4.接通判读仪开关（后面板右侧）。三、操作： 1.1在显示器左侧双击图标根据预先设定好的用户名进入XK型细菌鉴定/药敏分析仪软件界面；1.2患者信息输入： 单击工具栏上的按钮，或点击 “操作”菜单中的“检验申请”菜单项，进入检验申请操作界面。依次录入相应的申请信息并按【添加】或回车，完成检验

3、申请信息的录入保存；起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-011.2.1录入【病历号】后按回车键，系统将首先按病历号检索。如果系统中已有该病历号的申请信息则自动加载，用户在进行信息确认后便可完成【添加】；否则，光标自动移至【姓名】框，继续当前录入操作。1.2.2录入【姓名】后按回车，光标自动移至【性别】框，可通过点击其右边的倒三角选定性别，也可通过“上/下光标”键进行性别选定。1.2.3通

4、过信息录入、回车键和“上/下光标”键的操作结合，将依次完成【年龄】、【年龄单位】、【住址】、【病房床号】、【检验标本】、【检验目的】、【送检科室】、【送检医师】、【诊断病症】和【备注】的录入。1.2.4信息输入完毕确认无误，后单击或【退出】，可退出。1.3细菌鉴定药敏分析操作： 单击工具栏上的图标，或单击“操作”菜单中的“鉴定操作”项，进入系统鉴定操作界面。 1.3.1双击左上侧待鉴定的患者信息列表，同时中间位置的“检验编号”处显示同一编号在完成患者信息的选定。1.3.2鉴定试剂盒判读请打开鉴定仪器判读仓上盖，将鉴定试剂盒装入仪器判读仓卡槽内，选定“细菌类别”；单击【自动鉴定】仪器将自动对已放

5、入的试剂盒进行检测，并显示详细的检测结果。1.3.3鉴定结果确认：在对鉴定状态和结果进行确认后，单击【确认返回】键，退出当前的细菌鉴定返回到鉴定操作界面，细菌结果同时显示在相应的信息框内，根据细菌类别传递确定药敏类别，并将药敏鉴定部分的【自动鉴定】按钮和起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-01【人工鉴定】按钮均由不可操作状态改为可操作。1.3.4药敏板的判读请打开鉴定仪器判读仓上盖，将药

6、敏试剂盒装入仪器判读仓卡槽内；单击【自动鉴定】仪器将自动对已放入的试剂盒进行检测，并显示详细的检测结果。1.3.5药敏结果确认：对结果进行确认后，单击【确认返回】键，退出当前的药敏鉴定返回到鉴定操作界面，并将药敏结果和专家评语分别显示在相应的信息框内。最后单击【保存】。1.3.6报告打印：单击“鉴定操作”界面左下侧已检验完毕的患者信息后，单击【打印】键进行报告单的打印1.4阴性报告1.4.1 打开鉴定操作：单击工具栏上的图标，或单击“操作”菜单中的“鉴定操作”项，进入系统的鉴定操作界面。1.4.2 双击左上侧待鉴定的患者信息列表，同时中间位置的“检验编号”处显示同一编号在完成患者信息的选定。1

7、.4.3 阴性报告类型的选定：单击阴性报告选择框 ，选定具体的阴性报告类型。单击【保存】按钮进行信息保存。1.4.4报告打印：单击“鉴定操作”界面左下侧已检验完毕的患者信息后，单击【打印】键进行报告单的打印1.5报告修改：（如发现结果有误） 单击“鉴定操作”界面左下侧已检验完毕的患者信息后，单击【修改】键输入当前用户密码点击“回车”可对报告的结果进行相应修改。1.6患者信息修改：（如发现患者信息有误）单击工具栏上的按键，选择申请日期，单击患者信息直接进行修改后再单击【修改】键修改完成。1.7报告的删除：在鉴定报告列表中选定某一有效记录，然后单击【删除】按钮，系统将给出是否确定删除的信息提示，选

8、择“是”则执行删除，选择“否”则取消删除。1.8院感点击“操作”菜单中的“医院感染监测”项，进入“医院感染监测”界面。输入监测到的菌落数，单击【添加】后保存，打印报告。1.9在工具栏内还可根据系统提供的其他功能进行相应的操作，如：统计、查询、起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-01设置、用户管理等操作。1.10判读结束后应第一时间关闭“判读仪开关（后面板右侧）”，以保证仪器使用寿命四、关

9、机：下班前或使用完毕后应关闭仪器所有电源；1关闭判读仪开关（后面板右侧）；2关闭主机（前面板右侧）；3关闭打印机开关；4关闭显示器开关。五、细菌鉴定和药敏分析试剂盒操作1、标本按微生物室标准操作程序所推荐的方法进行收集、运送和初步离培养。2、染色：挑取纯培养细菌进行革兰氏染色 1）革兰氏阴性杆菌：进行氧化酶、OF实验，记下实验结果，氧化酶（-）、OF(F)选用肠杆菌试剂盒；氧化酶（+）、OF(O)选用非发酵菌试剂盒；氧化酶（-）、OF(F)选用弧菌试剂盒山东鑫科生物科技股份有限公司生产。2）革兰氏阳性球菌：进行触酶实验，记下实验结果，触酶（+）选用葡萄球菌试剂盒；触酶（-）选用链球菌试剂盒山东

10、鑫科生物科技股份有限公司生产。3）真菌：革兰氏阳性，镜检符合酵母样真菌特征选用真菌试剂盒山东鑫科生物科技股份有限公司生产。3、接种：1. 接种准备：（1）取无菌稀释液试管一支。（2）用无菌接种针，从待检细菌的平板中挑取待检菌落，加入稀释液中，制成约0.5麦氏单位（真菌2麦氏单位）均匀的菌悬液备用。2. 接种（菌悬液）： 拆开试剂盒包装，分别取出鉴定试剂盒和药敏分析试剂盒，打开试剂盒盖，首先将菌悬液用微量移液器按150ul的定量加入鉴定试剂盒的每个孔内，按鉴定试剂盒内标签的提示加入相应的孔内石蜡每孔两滴；做好标记盖好盖子，鉴定试剂盒操作结束。 第二步更换微量移液器吸头，然后吸取无菌培养液100u

11、l加入阴性对照孔（A1孔）内，再用微量移液器吸取菌悬液100ul加入到10 ml培养液内进行稀释并混匀，配制成药敏分析液；最后将药敏分析液加入到各杯孔中（A1孔除外），接种完成，盖好盖子；药敏试剂盒操作结束。3. 培养：将接种完毕的鉴定、药敏试剂盒放入35培养箱中，进行1824小时培养。起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-014. 上机鉴定： 取出培养完毕的鉴定、药敏分析试剂盒。打开“细

12、菌鉴定/药敏分析仪”软件，点击“鉴定”键，选择与生化鉴定相一致的“患者的检验编号”，打开试剂盒进出仓盖，放在试剂盒托盘上并固定，盖上试剂盒进出仓盖；点击“自动分析”仪器自动分析结果，（按先鉴定后药敏的顺序进行判读。如果感觉自动分析结果有误还可进行手工分析或手工修改），并保存结果，最后打印“微生物检验报告单”；鉴定操作完成。5.处理： 所有使用过的菌悬液、试管、药敏分析试剂盒、塑料吸头等必须按医疗废物管理条例的规定进行高压灭菌或焚烧。6.质量控制，为保证试剂盒的质量： 6.1试剂盒开封后应保持干燥，不受潮，在24小时内使用。 6.2用无菌生理盐水按每孔0.1ml（100ul），加入各杯孔中，进行

13、无菌试验。 6.3试验中对结果的准确性产生干扰的可能因素有杂菌污染、培养时间、菌液浓度等。6.4推荐应用以下标准菌株进行室内质控标准菌株适用试剂盒大肠埃希氏菌（ATCC25922）肠杆菌试剂盒金黄色葡萄球菌（ATCC25923）葡萄球菌试剂盒铜绿假单胞菌 （ATCC27853）非发酵菌试剂盒粪肠球菌（ATCC29212）链球菌试剂盒起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-017.附录：7.1

14、鉴定试剂盒：生 化 项 名 称结 果阳 性阴 性葡萄糖黄色红色或紫色棉子糖黄色红色或紫色蔗糖黄色红色或紫色麦芽糖黄色红色或紫色乳糖黄色红色或紫色纤维二糖黄色红色或紫色肌醇黄色红色或紫色海藻糖黄色红色或紫色山梨醇黄色红色或紫色侧金盏花醇黄色红色或紫色木糖醇黄色红色或紫色甘油黄色红色或紫色a-甲基-D-葡萄糖苷黄色红色或紫色N-乙酰-D-葡萄糖胺黄色红色或紫色甘露醇黄色红色或紫色菊糖黄色红色或紫色密二糖黄色红色或紫色环糊精黄色红色或紫色果糖黄色红色或紫色起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验

15、科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-01生 化 项 名 称结 果阳 性阴 性水杨素黄色红色或紫色甘露糖黄色红色或紫色鼠李糖黄色红色或紫色卫矛醇黄色红色或紫色尿素红色或紫色黄色精氨酸红色或紫色黄色赖氨酸红色或紫色黄色鸟氨酸红色或紫色黄色枸橼酸钠红色或紫色黄色丙二酸钠红色或紫色黄色苹果酸红色或紫色黄色己二酸钠红色或紫色黄色D-葡萄糖酸钠红色或紫色黄色七叶苷黑色或灰色无色-半乳糖苷黄色无色7.2药敏试剂盒反应状态浑浊清晰敏感度耐药敏感起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy

16、-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-011）非发酵菌阴性对照：在A1孔；阳性对照：在A2孔抗生素名称浓 度（ug/ml）抗生素名称 浓 度（ug/ml）高(R)中(I)低(S)高(R)中(I)低(S)氨曲南A3(32)A4(16)A5(8)米诺环素D4(16)D5(8)D6(4)洛美沙星A6(8)A7(4)A8(2)头孢吡肟D7(32)D8(16)D9(8)复方新诺明A9(4/76)A10(2/38)亚胺培南D10(16)D11(8)D12(4)左氧氟沙星B1(8)B2(4)B3(2)哌拉

17、西林/他唑巴坦E1(128/4)E2(64/4) E3(32/4)E4(16/4)头孢他啶B4(32)B5(16)B6(8)头孢噻肟E5(64)E6(32)E7(16)E8(8)哌拉西林B7(128)B8(64)B9(32)B10(16)头孢曲松E9(64)E10(32)E11(16)E12(8)环丙沙星C1(4)C2(2)C3(1)美罗培南F1(16)F2(8)F3(4)妥布霉素C4(16)C5(8)C6(4)氯霉素F4(32)F5(16)F6(8)阿米卡星C7(64)C8(32)C9(16)多西环素F7(16)F8(8)F9(4)头孢哌酮/舒巴坦D1(64/4)D2(32/4)D3(16/

18、4)起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-012）肠杆菌 阴性对照：在A1孔；阳性对照：在A2孔抗生素名称 浓 度(ug/ml)抗生素名称 浓 度(ug/ml)高（R）中（I）低（S）高（R）中（I）低（S）呋喃妥因A3(128)A4(64)A5(32)头孢吡肟D4(32)D5(16)D6(8)洛美沙星A6(8)A7(4)A8(2)亚胺培南D7(4)D8(2)D9(1)头孢西丁A9(32)

19、A10(16)A11(8)左氧氟沙星D10(8)D11(4)D12(2)氨苄西林B1(32)B2(16)B3(8)头孢呋辛E1(32)E2(16) E3(8)头孢唑啉B4(8)B5(4)B6(2)阿米卡星E4(64)E5(32)E6(16)庆大霉素B7(16)B8(8)B9(4)环丙沙星E7(4)E8(2)E9(1)氨曲南B10(16)B11(8)B12(4)复方新诺明E10(4/76)E11(2/38)哌拉西林/他唑巴坦C1(128/4)C2(64/4) C3(32/4)C4(16/4)头孢他啶F1(16)F2 (8)F3(4)头孢噻肟C5(4)C6(2)C7(1)头孢哌酮/舒巴坦F4(64

20、/4)F5(32/4)F6(16/4)头孢噻吩C8(32)C9(16)C10(8)哌拉西林F7(128)F8(64)F9(32)F10(16)妥布霉素D1(16)D2(8)D3(4)起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-013）葡萄球菌阴性对照：在A1孔；阳性对照：在A2孔抗生素名称浓 度（ug/ml）抗生素名称浓 度（ug/ml）高(R)中(I)低(S)高(R)中(I)低(S)阿奇霉素A

21、3(8)A4(4)A5(2)头孢他定D5(32)D6(8)D7(4)青霉素A6(0.25)A7(0.12)红霉素D8(8)D9(4)D10(2)D11 (1)D12(0.5)苯唑西林(金黄色葡萄球菌、路登葡萄球菌)A8(4) A9(2)四环素E1(16)E2 (8)E3(4)苯唑西林(除路登葡萄球菌以外的凝固酶阴性葡萄球菌)A10(0.5) A11(0.25)多西环素E4(16)E5(8)E6(4)万古霉素（金黄色葡萄球菌）B1(16)B2(8)B3(4)B4(2)利福平E7(4)E8(2)E9(1)万古霉素（凝固酶阴性葡萄球菌）B5(32)B6(16)B7(8)B8 (4)洛美沙星E10(8

22、)E11(4)E12(2)克林霉素B9(4)B10(2)B11(1)B12(0.5)阿米卡星F1(64)F2(32)F3(16)庆大霉素C1(16) C2 (8)C3(4)头孢吡肟F4(32)F5(16)F6(8)环丙沙星C4(4)C5(2)C6(1)复方新诺明F7(4/76)F8(2/38)左氧氟沙星C7(4)C8(2)C9(1)呋喃妥因F9(128)F10(64)F11(32)头孢西丁C10 (8)C11(4)哌拉西林/他唑巴坦G1(16/4)G2(8/4)头孢噻肟D1(64)D2(32)D3(16)D4(8)起 草 人操 作 人批 准 人生效日期张林张伟张九斌2017-01-01实验室主

23、 题文件编号 lwzyy-jy-xj-yq-2 莱芜市中医医院检验科临床微生物室细菌鉴定仪操作规范第 页 共 12 页第 1 版 第0次修改撰写日期：2017-01-014）链球菌阴性对照：A1孔；阳性对照：A2孔抗生素名称浓 度抗生素名称浓 度高中低高中低克林霉素A3A4A5头孢曲松D1D2 D3D4青霉素A6A7四环素D5D6D7D8青霉素A8A9 A10A11复方新诺明D9D10 D11 D12头孢噻肟B1B2B3左氧氟沙星E1E2E3头孢吡肟B4B5 B6B7利福平E4E5E6氨苄西林B8B9头孢呋辛E7E8E9氨苄西林B10B11B12氯霉素E10E11E12万古霉素C1 C2C3C4C5C6庆大霉素(高水平) F1红霉素C7C8C9 C10C11C12 6、 异常结果处理实际结果解释下一步的行动实验结果和预期结果完全符合本实验室的使用条件合格可以常规使用该产品鉴定菌种正确或不正确，与菌种典型反应不符合。u 重复质控过程；u 在额外的调查和/或更正行动未采取前，不能使用该批次产品。*从以下方面完成调查：u 仪器 (XK主机, 比浊仪、加样枪): 完成维护和/或校正。u 菌株:检查纯度和活性，必要时，使用新鲜菌株重复实验。u 方法学：严格遵循产品包装说明资料中提到的环节是否符合。S, I, R值和期望值不一致或MIC超出了期望值（和期望值有一个及以上稀释度的差异）不能使用