应用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样本浓度

1、应用 EXCEL 绘制 ELISA 标准曲线及计算样本浓度整体思路：在 ELISAELISA 实验结束后，我们得到的是经酶标仪读出的标准品以及样本 的 0D0D 值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的 0D0D 值及其相对应的 浓度，以 ODODfi为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。 这样，我们把样本的 0D0D 值以 X X值代入，便可求出丫值，即样本浓度。下面我们就一步步来实现这个目标：1.首先，将数据整理好输入 Excel，分别为经酶标仪读出标准品的 0D 值及其对应的浓度值。Jig立件世）備指也）现谢叩（I）稱式I工貝（I）数据迎 窗口吧 帮蜀堪Add

2、2.2.拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“ XYXY 散点图”并选择子图表类型的 散点图”（第一个没有连线的）。如下图所示。JITAB.c .I)5 .FGBI .123标推品QD值2.8221. 855L 20 40. 7510. 459 0.3070.2120.1524 J标推品液度JOOO_ 50025012S62 5 31.251 6251 05G139www. easyiaos. com. onAf文件心褊辑视圍理)插入.格式 工 数据丿窗口WJ) AiobtFDFQ3 3点击 下一步”出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如果是纵向列表就改选

3、 列”10.11.1213141617标准品CD值 标推品疲度I已无Bwwwfe在做 ELISAELISA 标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本 ODOD 值是已知的， 因此，我们需要将 ODOD 值设为 X X。根据上图我们可以看到，横坐标 X X 值为 ODOD 值, 纵坐标丫为标准品浓度，这正是我们想要的。4.4.有时需要我们手动选择 X X 值，这时可以点击系列”来更改，如下图1011 -B141G17ISB3E2 2标准品0D值标准品派度1www. : Fmq |B2I 10(4681016171?1J68g9_ Il甜制z蠅系列如果要对横坐标和纵坐标进行掉换，我们可以就点击X

4、 X 值和丫值文本框右边的小图标，结果如下图:WWW,jg加 L*隔.（舉洁 山上一步妁眉掠QD计充成込=SLins3$3：$ii3=Shtnnsb P6 6点击 下一步”在弹出的窗口再点击“完成”现在一张带标准值的完整散点图 就已经完成，如下图。3标准品QD标准品浓1416161710JP-EH7 7到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊？其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上 ），然后单击右键，点 击添加趋势线。如下图：8.8.弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图9.9.在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或

5、接近直线，我们就选择“线性”， 意思就是出来的趋势线是一条直线， 相应的该 直线的方程就是y=ax+y=ax+b b的形式。不过，一般的 ELISAELISA 都不会是所有的标准点呈 完全的线性关系的，也就是说不是一条完全的直线，这时我们可以选择“多项式”， 多项式后面还有“阶数”的选项，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选“2 2 阶”，即出来的方程为 y=axy=ax2 2+bx+c.+bx+c.选择完毕后，弹出以下窗口1010趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来，我们需要将公式显示出 来，以根据样本的 ODOD 值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后 出现下图的样

6、子即线由很多点标识出来），单击鼠标右键，选择趋势线格式1111 我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选择显示公式, 显示 R R 方，即相关系数，这时公式与 R R 方值便都显示出来了。Microsoft Excel. BookRilJ丈件 删龜）视圉磺人格式工具圈表 窗口电）*d 12 H虫|dJLI辿I备追 7 吟*聊区A我们将样本的 ODOD 值作为 X X 代入上述方程，求出来的便为浓度值了，哈哈。一般 ELISAELISA 的标准曲线的相关系数要达到 0.990.99 以上，本例中为 0.9999,0.9999,非常不错的曲线，这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。toU_12131415